■孟 岩 祁宏伟
(1.吉林农业科技学院,吉林省吉林市 132101;2.吉林省农业科学院畜牧科学分院,吉林公主岭 136100)
消化酶的活性对于动物体的营养物质吸收有着重要的影响,是营养物质消化并吸收的基础。大部分的营养物质都要在小肠中进行吸收,如果动物体的消化酶活性不高或者小肠功能出现障碍,那么在小肠内就会残存大量的不能吸收的物质,这些未吸收的物质会增加肠道内的渗透压,从而引起动物渗透性腹泻及其它疾病[1]。
本试验以豆粕提取物为研究对象,探讨不同添加水平的豆粕提取复合物对肉仔鸡养分表观代谢率以及肠道消化酶活性的影响,进而明确其在肉仔鸡玉米-豆粕型日粮中的适宜添加水平,为研究豆粕提取复合物促进肉仔鸡消化代谢的机理及其对肉仔鸡肠道机能作用提供参考依据。
豆粕提取物:吉林省农业科学院研制,具体组成为:大豆异黄酮0.928%,大豆低聚糖71.33%(其中蔗糖42.6%、水苏糖22.6%、棉籽糖6.13%)、大豆皂甙7.2%、大豆多肽6.2%。试验动物为1日龄健康的艾维茵肉仔鸡,购自公主岭市某孵化场。
选择健康状况良好的1日龄艾维茵肉仔鸡600只,随机分为5个处理,每个处理设4个重复,每个重复30只。其中一组设为对照组,只饲喂基础日粮,不添加任何添加剂。试验组分为4个组,分别为250 mg/kg处理组:基础日粮+豆粕提取复合物250 mg/kg;500 mg/kg处理组:基础日粮+豆粕提取复合物500 mg/kg;750 mg/kg处理组:基础日粮+豆粕提取复合物750 mg/kg;1 000 mg/kg处理组:基础日粮+豆粕提取复合物1 000 mg/kg。试验期为49 d,分为前、后两期,前期0~21 d,后期22~49 d。
基础日粮按照肉鸡不同生长发育阶段营养需要自行配制。基础日粮组成及营养水平见表1。
表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)
在试验前对鸡舍进行彻底清洁和消毒,试验期内鸡舍每7 d消毒两次。前期0~21日龄肉仔鸡采用笼养方式,后期22~49日龄采用地上平养饲养方式。试验期间,对鸡舍的温度和湿度进行人工控制,保持良好通风换气,自由饮水和采食,参照肉鸡标准化饲养管理进行。对肉仔鸡进行常规免疫,试验期间均不使用其他抗生素药物。
试验28 d时,每个重复随机选择2只鸡进行为期4 d的代谢试验。代谢试验采用全收粪法。在代谢试验开始和结束时将试验鸡以重复为单位称重,准确记录各重复的饲料添加量,并采集各组饲料样品,粉碎过40目筛,装入样品瓶备测。在各重复的粪盘上各放一块干净的塑料布用于接粪。每天早8∶00收集粪便,挑净粪布上的羽毛和饲料颗粒等杂物后,用10%的稀硫酸进行处理,每100 g粪样加10 ml,将4 d收集的粪便称重并混匀,冰箱4℃保存。将粪样65℃烘干,室温充分冷却回潮24 h,称重,粉碎过40目筛,装入样品瓶备测。测定饲料和粪样中的粗蛋白质、粗脂肪和能值,计算各营养物质表观代谢率。粪便和饲料样本的粗蛋白质含量测定采用凯式定氮法,粗脂肪含量采用索氏脂肪提取法,能值采用氧弹式测热仪测定。
蛋白质表观代谢率(%)=[(食入饲料量×饲料蛋白质含量-粪便量×粪便蛋白质含量)/食入饲料量×饲料蛋白质含量]×100;
脂肪表观代谢率(%)=[(食入饲料量×饲料脂肪含量-粪便量×粪便脂肪含量)/食入饲料量×饲料脂肪含量]×100;
表观代谢能(MJ/kg)=[食入能量(MJ)-排泄物中能量(MJ)]/食入饲料量(kg)。
于21日龄时每处理随机取4只鸡(每重复1只)屠宰,迅速打开腹腔,取十二指肠食糜。将十二指肠食糜按照生理盐水和食糜1∶5的质量比进行混合,混匀后在匀浆器进行匀浆,匀浆的过程中,匀浆管处于冰水混合物中,匀浆时间30 s,在4℃离心机,离心15 min(12 000 r/min),取离心后的上清液,放置于-80℃保存备测。使用试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)分别对淀粉酶、脂肪酶以及蛋白酶的活性进行测定。蛋白酶活性采用福林-酚试剂法[2]测定,淀粉酶活性采用碘-淀粉比色法[2]测定,脂肪酶活性采用比浊法[3]测定。
利用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析,试验数据结果用“平均值±标准差”表示,采用Duncan's法进行多重比较。
表2 豆粕提取物对养分表观代谢率的影响
由表2可见,不同添加水平豆粕提取物对肉仔鸡养分表观代谢率均可产生积极的影响。在粗蛋白代谢影响方面,试验组均比对照组有所提高,其中250 mg/kg处理组较对照组虽然有所提高,但影响不显著(P>0.05);500 mg/kg处理组比对照组提高了7.45%(P<0.05),提高幅度最大;750 mg/kg处理组比对照组提高了6.76%(P<0.05);1 000 mg/kg处理组比对照组提高了5.79%(P<0.05),500、750、1 000 mg/kg三个处理组之间无显著差异(P>0.05),但1 000 mg/kg处理组较750 mg/kg处理组代谢率有下降的趋势(P>0.05);在粗脂肪代谢方面,试验组与对照组相比虽然均有提高,但只有500 mg/kg处理组与对照组相比差异显著(P<0.05),其它各组与对照组相比均差异不明显(P>0.05)。表观代谢能方面,虽然试验组间有比对照组提高的趋势,但均无显著差异(P>0.05)。
表3 豆粕提取复合物对肉仔鸡肠道消化酶活性的影响(U/g)
由表3可见,各试验组的α-淀粉酶活性均比对照组有不同程度的提高,其中,250 mg/kg组比对照组提高10.55%(P<0.05),500、750、1 000 mg/kg组比对照组分别高出50.49%、50.61%、45.7%,差异极显著(P<0.01);三个处理组脂肪酶活性比对照组分别高出30.34%、28.08%、16.95%,差异显著(P<0.05),而250 mg/kg组的脂肪酶活性与对照组相比无明显差异(P>0.05);500、750 mg/kg和1 000 mg/kg三个处理组的总蛋白水解酶的酶活比对照组分别高出39.69%、33.04%、24.72%,差异显著(P<0.05),250 mg/kg组总蛋白水解酶活性比对照组有所增加,但差异不显著(P>0.05)。1 000 mg/kg组与500 mg/kg组和750 mg/kg组相比较,消化酶活性均有下降的趋势,但差异不显著(P>0.05 )。
大量的研究表明,豆粕提取物中的活性物质除了具有提高机体免疫力、抗脂质氧化、降血脂、抗自由基、抗病毒、抗肿瘤等生理功能以外,这些大豆活性物质还可以促进机体生长发育,提高机体对营养物质的消化吸收和利用,同时影响了机体正常菌群的活性,使得肠黏膜细胞代谢发生变化,进而影响了肉仔鸡养分表观代谢率。豆粕提取物活性物质一方面可以提高蛋白质等含氮化合物的利用;另一方面,豆粕提取物含有大量的多聚糖类,可以提高益生菌的活性,可以加强对含氮化合物的利用;低聚糖可以吸附氨气,使得肠道氨气浓度降低,吸附的氨气随着粪便排出体外;不仅提高了含氮化合物的利用度,还改善了肠道环境,最终可以提高机体对营养物质的吸收。本研究粗蛋白和粗脂肪的表观代谢率在豆粕提取复合物添加量为500 mg/kg之前是增加的,并达到最大值,在750 mg/kg之后呈现下降趋势。粗蛋白和粗脂肪表观消化率升降与豆粕提取物能够促进并提高肉仔鸡的生产性能结果是一致的,具体作用机理需要进一步深入的研究。
肠道中消化酶的活性一方面可以反映动物的消化能力;另一方面也是酶合成与酶分解的平衡反映。当动物受到应激刺激等行为时,其分泌的消化酶就会明显减少,影响动物对食物的消化吸收[4]。酶活性的增加另一方面是由于酶的合成增多,或者酶的合成大于酶的降解。其影响主要是由于机体对摄入的蛋白质和氨基酸进行代谢产生尿素等,这些含氮物质在机体肠道分解产生氨气,对消化道的pH值产生了影响,从而使得消化酶的活性发生改变。
本研究结果表明,豆粕提取物可以提高肠道中的淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶的活性,这主要是由于豆粕提取物提高了动物体的免疫能力,减少了动物的应激反应,提高了消化酶的合成速度。此结果与豆粕提取物提高养分表观代谢率相一致,结果表明肉仔鸡养分表观代谢率与肠道脂肪酶活性有关,也说明了鸡肠道消化酶活性可能反映了鸡对营养物质的利用能力[5]。本试验研究的数据结果和上述研究结果一致,豆粕提取物能够明显提高肉仔鸡的消化酶活性。
从本试验结果可以得出,肉仔鸡日粮中添加豆粕提取物可提高养分的表观代谢率以及肠道消化酶活性,综合对二者的影响结果,豆粕提取复合物在肉仔鸡日粮中的添加量以500~750 mg/kg为宜。