去离子水稀释法与高速离心法减少血脂对生化检测结果干扰的效果比较

2015-01-16 05:32杨文龙山西煤炭中心医院检验科山西省太原市030006
医学理论与实践 2015年12期
关键词:离心法去离子水生化

杨文龙 山西煤炭中心医院检验科,山西省太原市 030006

去离子水稀释法与高速离心法减少血脂对生化检测结果干扰的效果比较

杨文龙 山西煤炭中心医院检验科,山西省太原市 030006

目的:比较分析去离子水稀释法和高速离心法减少血脂对生化检测结果干扰的效果。方法:进行三酰甘油即TAG干扰试验选用相应的去离子稀释倍数,然后再用去离子水稀释法、高速离心法来处理血清,用t检验上述两种方法消除血脂干扰的效果。结果:去离子水稀释法与高速离心法处理后P与Ca结果之间的差异有统计学意义(P<0.05),但是比较其他各项指标,差异不明显,没有统计学意义(P>0.05)。结论:采用去离子水稀释法能够有效消除血脂对于生化检验结果的影响,可为临床提供精确度更高的生化检验结果。

去离子水稀释法 高速离心法 血脂 生化检测 效果

临床注射脂肪乳患者、急诊患者的血清标本,常常会出现不同程度的浑浊,且浑浊血清中乳糜微粒的核心成分TG,能够对入射光产生散射,对生化检验结果产生一定的干扰,故临床检验一般需要采取相关措施降低标本中TG浓度,进一步提高检测结果的精确性[1]。本文主要分析去离子水稀释法和高速离心法减少血脂对生化检测结果干扰的效果,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 (1)标本。选取我院急诊及住院患者当作标本甲、标本乙、标本丙,其中标本甲:42份新鲜乳糜血标本;标本乙:42份外观澄清的新鲜血清;标本丙:250份乳糜血及血浑的新鲜血液标本。(2)仪器与试剂。用日立型号为7600的全自动生化分析仪,德国Eppendorf公司生产的5430台式高速冷冻离心机。从日本株式会社日立高新技术公司购买肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、葡萄糖(GLU)与钙(Ca),从北京利德曼生化技术有限公司购买淀粉酶(AMY)、尿素氮(UREA)、肌酐(CREA),检测用到的去离子水主要从双峰创优纯水设备制造厂生产出来的净水处理设备(型号:GNRO-200)中制取。

1.2 方法

1.2.1 制备血脂浓缩液。把标本甲按照4 000rmin的速度实施常规离心获取血清,然后根据13 000rmin的速度高速离心吸取浑浊的脂血血清,吸去下层部分,然后向余下的脂层中加入大量生理盐水,大约是其10倍的体积,均匀混合后静置5~10min。然后再重复上述离心稀释过程,兑入500μl的生理盐水留作备用。

1.2.2 三酰甘油的干扰实验。把标本乙混合均匀后,用混合血清当作空白管标本,在高速冷冻离心机上连续数次检测实验指标,将余下的20ml混合血清分成10份,加入不同剂量的血脂浓缩液,然后制作出有TG浓度梯度的干扰物样本,需要在生化分析仪器上重复性检测上述各项指标3次。计算出空白管的平均数值与标准差,当超过空白管浓度(±1.97s)时定义为干扰。

1.2.3 去离子水稀释法。依照干扰实验所得结果,选用多数检测项目无明显干扰的最大三酰甘油浓度当作稀释目标浓度,稀释不一样水平的标本直至达到目标浓度再实施生化检测。把标本丙置于生化分析仪器上面,检测出三酰甘油浓度实施去离子水稀释,并将稀释后的标本置于机器上连续检测2次,选取平均数值再和稀释倍数相乘得到检测结果。

1.2.4 高速离心法。把标本丙按照13 000rmin的速度高速离心10min左右,取出下层清亮的血清生化检测2次,选取平均数值。

1.3 统计学分析 用SPSS14.0统计学软件分析本次检测所得的所有数据,用t检验两组数据匹配情况,然后进行线性回归分析,若P<0.05,则结果有统计学意义。

2 结果

2.1 三酰甘油干扰实验结果 分析整个实验过程可知:若TG在7.8mmolL之上对于P值检测会产生干扰,若TG在14.4mmolL之上对于P值与ALT检测均会产生一定程度的干扰,若TG数值为25.8mmolL时对于P值、ALT检测、AST检测均会产生干扰。故应将标本中TG浓度维持在10.9~12.6mmolL才能确保检测结果的精准性。

2.2 去离子水稀释法与高速离心法检测结果比较 从表1可知:去离子水稀释法与高速离心法处理后P与Ca结果之间的差异有统计学意义(P<0.05),但是比较其他各项指标,差异不明显,没有统计学意义(P>0.05),表明去离子水稀释法与高速离心法处理结果存在较高的一致性。

表1 两种方法减少血脂对生化检测结果干扰的效果比较

3 讨论

如果TG的浓度太高可能对生化检测的结果产生一定影响,但是急诊患者一般不能确保其在就诊前禁食8~12h,故其血液标本中的TG含量明显比空腹水平高。为了降低标本中TG浓度,从而减少对生化检测造成的影响,现阶段常用方法主要有乙醚处理法、磷钨酸-镁-PEG法与高速离心法[2]。其中高速离心法对于血脂正常或者中度血脂异常标本的生化检测结果不会产生太大影响,其检测结果在高速离心前、后大体一致,针对高度血脂异常的血清用这种方法能够有效消除血脂干扰。然而高速离心机价格昂贵,且其在检验科无其他特殊作用,所以通常情况下检验科不会配备高速离心机[3]。其余两种检测方法因为在试剂中添加了其他附加成分,检测的反应系统已经发生改变,操作步骤繁琐,不能精确地检测出相关生化指标。

本文结果表明:去离子水稀释法与高速离心法处理后P与Ca结果之间的差异有统计学意义(P<0.05),但是比较其他各项指标,差异不明显,没有统计学意义(P>0.05)。这与研究结果[4]相吻合。说明了各项检测指标基本上可以反映出患者肝肾功能情况,可以用来初步诊断急性胰腺炎与急性心肌梗死,其大体满足急诊生化检验需求。同时研究结果中P与Ca的检测结果存在明显差异,其中P检测结果差异大可能受到TG干扰程度大。去离子水稀释后标本TG平均数值8.0mmolL>TG对P干扰数值7.8mmolL,说明稀释倍数欠佳,需要深入稀释才可以得到更加精确结果。针对存在肾功能障碍可疑性高磷血症患者而言,可以由TG结果决定稀释倍数,以便于得到精确结果。Ca2+检测所得结果差异大可能是因为稀释以后标本中的Ca2+含量比试剂盒的检测下限低,一般而言Ca2+试剂线性在1.3~3.8mmolL范围内,采用去离子水稀释以后标本中的Ca2+浓度约为0.83mmolL,而标准差是0.17mmolL,故去离子水稀释法不适合用在消除血脂对Ca2+影响方面[5]。值得注意的一点是在采用去离子水稀释方法消除TG干扰的情况下,须选用合适的稀释倍数,确定TG浓度对于各项检验指标的干扰程度。

总之,采用去离子水稀释法能够有效消除血脂对于生化检验结果的影响,为临床提供精确度更高的生化检验结果。

[1] 张蕴秀.稀释法消除血脂对生化检测结果干扰的效果评价〔J〕.武警医学,2012,6(4):136-138.

[2] 刘万彬,隆维东.聚乙二醇4000处理脂血后对生化结果的影响〔J〕.国际检验医学杂志,2012,7(4):113-116.

[3] 张帆.高速离心对临床常规生化项目测定结果的影响〔J〕.国际检验医学杂志,2010,9(8):219-222.

[4] 韩晓娜.高血脂症对生化检验项目的干扰及消除〔J〕.大家健康:学术版,2014,2(1):35-37.

[5] 朱东.临床上血液标本的采集送检对生化检测结果的干扰与分析〔J〕.中国社区医师:医学专业,2011,7(19):238-241.

(编辑落落)

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B

1001-7585(2015)12-1649-02

2014-10-14

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