赛科希德SF-8000凝血测试系统性能评价

吴启娇，童毅，曹丽琰，杨德琴，徐君全，常俊，范林霞

(昆明学院医学院，云南昆明650214)

赛科希德SF-8000凝血测试系统性能评价

吴启娇，童毅，曹丽琰，杨德琴，徐君全，常俊，范林霞

(昆明学院医学院，云南昆明650214)

目的对国产赛科希德SF-8000凝血测试系统(简称SF-8000)进行性能评价。方法对SF-8000的精密度、准确度、线性、可比性等基本性能进行评价。将200 g/L血红蛋白液以1∶200、2∶200、3∶200、4∶200、5∶200比例分别加入到12例新鲜血浆中，获得实验血浆，与原血浆及盐水稀释对照血浆凝血结果进行比较;对15例气泡标本与对照标本进行配对t检验，比较检测参数有无差异;对12例新鲜标本应用新鲜复溶试剂及冷藏24 h试剂分别进行检测，比较测定结果的差异;分别对13例冷藏4 h及24 h标本与新鲜标本进行配对t检验，比较测定结果的差异。结果仪器各项基本性能均符合厂家要求。溶血及气泡会不同程度影响凝血4项的检测，当血红蛋白浓度达到1～1.5 g/L时，活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)结果与原血浆组产生差异有统计学意义(P＜0.01)，达到4 g/L时与对照血浆组差异有统计学意义(P＜0.01);试剂复溶24 h后除APTT试剂外(P＜0.01)，其它项目试剂与新复溶试剂检测结果无明显差异，稳定性良好;标本放置4 h不会导致结果出现明显差异，但放置24 h后，APTT、PT、纤维蛋白原(FIB)结果差异有统计学意义(P＜0.01)。结论SF-8000凝血测试系统实验性能符合国家、行业标准。应严格按照使用手册操作，避免干扰因素出现，以保证结果的临床适用性。

SF-8000凝血测试系统;性能评价;干扰因素

长期以来，由于国内医疗器械技术水平与国外差异悬殊，且国内医院也不认可，所以我国高端医疗设备市场被进口产品所垄断。近日，国家卫生与计划生育委员会启动第1批优秀国产医疗设备产品遴选工作［1］。这意味着在推进我国医疗制度的改革过程中，推进国产医疗设备发展应用，降低医疗成本，也是非常重要的一环。基于这样的国产医械发展背景，我们对国产赛科希德SF-8000凝血测试系统(简称SF-8000)的性能进行了系统评测，旨在客观的评价其实验室应用的可接受性及为产品今后技术升级的方向提出些许建议。

材料和方法

一、仪器

SF-8000和法国STAGO-STA全自动血凝仪(简称STAGO-STA)。

二、试剂

SF-8000配套2 mL活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time，APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time，PT)、凝血酶时间(thrombin time，TT)、纤维蛋白原(fibrinogen，FIB)测定试剂和STAGO-STA原装试剂。

三、标本

某高校医学生志愿者静脉血，109 mmol/L枸橼酸钠抗凝，2500×g离心15 min;赛科希德Ⅰ、Ⅱ水平质控血浆用于日间精密度及准确度测定。

四、方法

1.批内精密度分析将3份高、中、低值标本各连续测定20次APTT、PT、TT、FIB，计算各参数的变异系数(CV)值。

2.日间精密度及准确性分析将同批次赛科希德水平Ⅰ、Ⅱ质控血浆(批号D124B001-1、D112C002-2)连续测定10 d，每天测定2次，2次测定间隔4～6 h，求各参数的CV值;并同时进行单样本t检验，检验待评价的检测系统测定值与标定值是否存在差异，从而评价其准确性。

3.线性分析针对SF-8000的特点，进行FIB的线性相关度及线性范围的检测，将3 g/L定值血浆用咪唑缓冲液做1∶5、1∶10、1∶20、1∶30稀释，应用线性回归检测其线性相关性。

4.可比性分析将32份正常及异常标本、质控血浆分别用SF-8000和STAGO-STA测定APTT、PT［国际标准化比值(international normalization ratio，INR)］、TT和FIB，最后分别进行各参数2个组之间的相关性分析。

5.携带污染率实验采用Bioughton法［2］测定，即高低2个含量的血浆，先测定高值样品3次(H1、H2、H3)，随时测定低值样品3次(L1、L2、L3)。携带污染率=(L1-L3)/(H3-L3)× 100%，本研究主要对1组标本进行了APTT、PT、TT、FIB的携带污染率抽样实验。

6.干扰实验本研究主要考查了溶血与气泡对凝血4项测定的影响。用洗涤压积红细胞冻融溶血，离心去除细胞碎片，制作成(200± 2)g/L的血红蛋白液，以0∶200、1∶200、2∶200、3∶200、4∶200、5∶200、6∶200梯度比例加入到血浆中，对照血浆用生理盐水作相同稀释，分别进行凝血4项的测定;用2 μL加样枪反复吹吸，获取(2.0±0.5)mm气泡层，从而得到气泡血浆，与原血浆采用1∶1配对，分别测定凝血4项参数，最后用配对t检验分析溶血及气泡对检测结果的干扰。

7、试剂复溶冷藏时间影响分析分别使用复溶0 h及复溶24 h冷藏试剂同时对12份标本进行APTT、PT、TT、FIB测定，应用配对t检验分析2个组之间有无差异。

8、标本放置时间影响分析分别对同一标本在采集后0 h及冷藏4、24 h后进行APTT、PT、TT、FIB测定，应用配对t检验分别分析标本冷藏4 h和24 h后结果有无差异。

五、统计学方法

结果

一、批内精密度及日间精密度分析

SF-8000日间精密度略高于批内精密度，与厂家提供的CV范围吻合，即正常样本FIB≤5.0%，其余3项均≤3.0%;异常样本FIB≤10.0%，其余3项均≤5.0%，同时也符合美国临床实验室标准化委员会(the National Committee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS)EP5-A2文件［3］的要求。见表1、表2。

二、准确性分析

SF-8000检测水平Ⅰ质控血浆PT、APTT、FIB的结果与质控品靶值进行比较，差异均有统计学意义(P均＜0.05)，但偏倚均＜±10%(SF-8000产品使用手册要求)。而水平Ⅰ质控血浆TT及水平Ⅱ质控血浆各指标的检测结果与靶值比较差异均无统计学意义(P均＞0.05)。因此，可认为SF-8000的准确度符合要求。见表3。

表1 批内精密度

三、线性分析

FIB浓度在0.88～5.98 g/L之间有良好的线性相关(P=0.000)，回归方程为Y=-0.66+ 1.011X，线性系数=1.011，在厂家要求的范围(1.00±0.02)内，同时线性范围与厂家说明的0.8～8.0 g/L符合，能满足大多数临床标本的检测线性范围。

表2 日间精密度

四、可比性分析

采用SF-8000和STAGO-STA同时测定32份正常及异常标本。结果显示2个检测系统PT、APTT、TT、FIB测定结果的相关性良好［相关系数(r)分别为0.911、0.962、0.844、0.887，P均= 0.00］，TT、FIB项目的r值略低。见表4。

五、携带污染率

本研究中PT、APTT、TT 3项参数时间延长定为低值样品，时间正常为高值样品，FIB浓度高者为高值样品，反之为低值样品。SF-8000携带污染率＜±5%，符合厂家的要求。见表5。

表3 SF-8000的准确性

表4 SF-8000与STAGO-STA的相关性分析

表5 SF-8000的携带污染率分析

六、干扰实验

随着血红蛋白加入量的增加，干扰越来越明显，特别是对PT、APTT测定的影响更为显著。溶血血浆血红蛋白浓度为1.0～1.5 g/L时，测定结果与原血浆结果的差异有统计学意义(P＜0.05)，血红蛋白浓度达到4 g/L时与盐水稀释血浆对照组差异有统计学意义(P＜0.05)。将200 g/L血红蛋白以1∶50～1∶40比例加入血浆时，仪器在2项以上测定中无法获得结果(即结果＞100或显示＞max)。由此可见，SF-8000有一定的抗溶血干扰能力，但对于特殊的重度溶血标本应注意结果的偏倚。

气泡血浆在PT、APTT、TT项目的检测上与对照组有明显差异(P＜0.05)。说明吸入气泡对检测结果有明显干扰，应注意避免。

七、SF-8000配套试剂复溶冷藏时间对检测的影响

SF-8000配套试剂说明书上声明试剂复溶后在2～8℃条件下可稳定5～30 d。本研究采用复溶后4℃冷藏24 h的试剂测定新鲜标本的PT、APTT、TT和FIB，其中APTT结果与新鲜复溶试剂测定结果比较有明显差异(P=0.00)，其余3项未出现差异，见表8。由此可见，APTT试剂在冷藏24 h后质量出现异常，会干扰到标本测定。

八、标本放置时间对检测的影响

SF-8000配套试剂说明书上声明标本应在4 h内进行检测。本研究中标本放置4 h后凝血4项检测结果与新鲜标本检测结果比较无明显差异(P＞0.05)，而标本冷藏24 h再进行PT、APTT测定，检测结果出现明显变化。

表6 溶血干扰实验结果

表7 气泡干扰实验结果

表8 新鲜复溶试剂与复溶后冷藏24 h试剂测定结果比较

表9 放置4 h、冷藏24 h与0 h标本的测定结果比较

讨论

SF-8000主要检测的参数为APTT、PT［凝血酶原比率(prothrombin rate，PTR)、INR］、TT、FIB值，其主要在民营、社区等一级医院应用较为广泛。本研究对SF-8000的精密度、准确度、线性范围、与同类仪器相关性、携带污染率、干扰因素等方面进行了系统测评。总体来看，该检测系统性能符合实验室的诊断要求，与同类型进口血凝仪有良好的相关性。且该型仪器操作方便，设计合理，安装条件不苛刻，非常适用于一、二级医院的诊断需求。

SF-8000的检测原理为凝固磁珠法，判断方法为涡流感应，不易受特异性血浆的干扰［4］。因此本研究未对高脂及黄疸标本进行干扰检测。SF-8000采用一次性检测杯，可减少携带污染，提高准确度。SF-8000的FIB参数使用Clauss法测定。该方法为NCCLS推荐的临床实验室测定FIB的常规方法，能真实反映人体内具有凝血功能的FIB水平［5］。SF-8000的线性范围能满足各级医院的诊断需求，若超出线性范围应按说明对标本进行稀释后再测定。

在使用SF-8000时应注意产品使用手册中明确提到的主要干扰因素，如溶血、血小板聚集及吸入气泡。应严格按照操作说明进行操作。对于溶血标本对测定结果的干扰，从本研究结果来看，有部分因素来源于血红蛋白液对血浆标本的稀释作用，这与光学法溶血、黄疸、高脂等特异性标本能改变样品的透射或散射浊度的成因是不同的［4］。气泡在双磁路磁珠法中一般不会严重影响测定结果［4］，但在本研究中其仍是影响结果的一项重要因素。分析原因可能是由于本研究使用的是低规格样品吸入模式，吸入的气泡较易造成标本吸入量误差［5］。

综上所述，在操作中应严格进行分析前质量控制工作，保证标本采集合格。同时应注意试剂复溶后及时使用，中间运输、转运等因素会导致复溶后的试剂实际使用时间缩短。对于标本而言，采集后也应及时进行测定，应避免长时间收集标本后统一上机检测。另外，由于各实验室条件不一，当正常实验对象测定值不在95%参考区间内，建议建立自己实验室的参考区间［6］。通过本次评测，希望相关医疗同行能客观看待国产医疗器械，并也希望民族品牌在我国的医疗行业中能不断壮大、繁荣。

［1］中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.国家卫生计生委、工业和信息化部联合召开推进国产医疗设备发展应用会议［EB/OL］.(2014-08-18)［2014-09-30］.http://www.nhfpc.gov.cn/ guihuaxxs/s3586/201408/71ce8bb4267 c4578a2ce 169a72bf4c60.shtml.

［2］International Committee for Standardization in Haematology and International Committee on Thrombosis and Haemostasis.ICSH/ICTH recommendation for reporting prothrombin time in oral anticoagulant control［J］.J Clin Pathol，1985，38 (7):133-134.

［3］National Committee for Clinical Laboratory Standards.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methds［S］.EP5-A2，NCCLS，2004.

［4］曾照芳，洪秀华.临床检验仪器［M］.北京:人民卫生出版社，2010:223.

［5］陆玉静，马骏龙，丛玉隆.UF-100分析仪检测结果偏低原因与故障排除［J］.江西医学检验，2007，25 (6):631.

［6］陈晓蓓.ACL-TOP全自动血凝仪纤维蛋白原测定方法学评价［J］.检验医学，2012，27(12):1021-1023.

［7］冯厚梅，孙德华，郑磊，等.Sysmex CA 7000全自动凝血仪性能评价［J］.检验医学，2011，26(1):58-62.

Performance evaluation of SUCCEEDER SF-8000 coagu lation testing system

WU Qijiao，TONG Yi，CAO Liyan，YANG Deqin，XU Junquan，CHANG Jun，FAN Linxia.(The Medical College of Kunming University，Yunnan Kunming 650214，China)

ObjectiveTo evaluate the performance of domestic SUCCEEDER SF-8000 coagulation testing system (SF-8000).MethodsThe precision，accuracy，linearity，comparability and so on of SF-8000 were evaluated.The 200 g/L hemoglobin solution was added to 12 cases of fresh plasma in the proportions of 1∶200，2∶200，3∶200，4∶200 and 5∶200，and the experimental plasma was prepared.The differences of the results in the experimental plasma，the original plasma and the brine-diluted control plasma were analyzed.The differences of 15 cases of bubble specimens and control specimens＇results were analyzed by pairedt-test.The 12 fresh specimens were measured with fresh dissolvedreagents and 24h-refrigerated reagents separately，and the differences of the 2 sets of results were analyzed.A total of 13 cases of 4h-refrigerated specimens，24h-refrigerated specimens and fresh specimens were measured，and the differences were analyzed.ResultsThe basic properties of the instrument were all in accordance with the requirements of manufacturers.Hemolysis and bubbles affected the results of SF-8000 in different levels.When hemoglobin concentration reached 1-1.5 g/L，the results of activated partial thromboplastin time(APTT)and prothrombin time(PT) had significantly statistical differences from those of the original plasma group(P＜0.01)，when it reached 4 g/L，they had statistically significant differences from the control plasma group(P＜0.01).In addition to the reagent of APTT (P＜0.01)，the results of 24 h-refrigerated reagents and fresh refrigerated reagents had no statistical differences with good stability.The results of 4h-refrigerated specimens and fresh specimens had no statistical difference，but the results of 24 h-refrigerated specimens and fresh specimens in APTT，PT and fibrinogen(FIB)had statistical significance(P＜0.01).ConclusionsThe performance of SF-8000 meets the national and industrial standards.The manual operation should be strictly carried out to avoid appearing confounding factors，in order to ensure the results with clinical applicability.

SF-8000 coagulation testing system;Performance evaluation;Confounding factor

1673-8640(2015)09-0921-05

R446.11

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.013

2014-09-30)

(本文编辑:范基农)

昆明学院大学生科研项目(DXS14057)

吴启娇，女，1992年生，主要从事血液学检验工作。

曹丽琰，联系电话:087-65098540。