Caspase-3 和P53 在胃癌中的表达及临床意义

谢 琼，卢月月，易宏锋

荆州市第一人民医院1.内分泌一科;2.消化二科;3.消化一科，湖北 荆州434000

胃癌为人类常见的恶性肿瘤，也是消化系统常见的恶性肿瘤之一，极大的危害着人类的健康，目前对于胃癌的治疗方法包括手术、化疗、放疗，但是仍有大量的胃癌患者治疗后的生存率仍不高，主要原因在胃癌发生转移或者分期太晚。大量的研究表明Caspase-3 和P53 与肿瘤的发生、发展及肿瘤患者的预后密切相关。本研究通过检测胃癌组织及正常胃黏膜组织中Caspase-3 及P53 表达情况，探讨其与胃癌发生、发展的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013 年3 月-2014 年3 月就诊于荆州市第一人民医院普通外科的胃癌患者50 例，所有患者术后均经病理证实，男35 例，女15 例，年龄40～75 岁，平均年龄(61.0 ±2.3)岁，根据患者的病理结果，确定胃癌患者的转移情况、浸润深度、分化程度。选取就诊于荆州市第一人民医院消化内科行电子胃镜检查的胃溃疡患者溃疡周围的组织，并且经过病理检查提示为正常胃黏膜组织，排除癌前病变等相关病变共20 例作为对照，男12 例，女8 例，年龄20 ～45 岁，平均年龄(31.0 ±3.5)岁。

1.2 实验试剂 Caspase-3 鼠抗人单克隆抗体、P53鼠抗人单克隆抗体购自北京中山生物制品有限公司，S-P 试剂盒、DAB 显色试剂盒购自福州市迈新生物技术开发有限公司，其余免疫组织所需要的试剂由荆州市第一人民医院中心实验室提供。

1.3 实验方法 将所手术后采集的标本固定在10%甲醛中，24 h 内脱蜡，并编号，切片，然后依次采用烤片、脱蜡、水化、冲洗、抗原修复、4 ℃冰箱过夜、PBS 液冲洗、DAB 显色、封片、阅片。阳性对照采用乳腺切片，阴性对照采用PBS 缓冲液。结果的判断由两位副主任医师以上病理科医生综合判断，若结果不统一时，由第3 位病理科医生判断。

1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0 统计学方法对实验所得数据进行统计分析，计数资料采用χ2检验，当理论频数小于5，采用精确概率法，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Caspase-3 在胃癌组织及正常胃黏膜组织的表达情况 Caspase-3 在显微镜下主要表现为细胞质呈棕黄色染色物质。Caspase-3 mRNA 在正常胃黏膜组织及胃癌组织的表达水平分别为0.41 ±0.13、0.78 ±0.22，差异有统计学意义(P ＜0. 05，见图1、表1);Caspase-3 在胃癌组织中阳性表达率为30. 0% (15/50)，在正常胃黏膜组织中阳性表达率为70.0%(14/20)，胃癌组织与正常胃黏膜组织比较，差异有统计学意义(P ＜0.05)。

图1 Caspase-3 在胃癌组织中表达情况(免疫荧光染色，400 ×) A:阳性表达;B:阴性表达Fig 1 Expression of Caspase-3 in gastric cancer tissues (immunofluorescence staining，400 × ) A:postive expression;B:negative expression

表1 Caspase-3 在胃癌组织及正常胃黏膜组织的表达水平Tab 1 Expression of Caspase-3 mRNA in gastric cancer tissue and normal gastric tissue

2.2 Caspase-3 阳性表达率与其临床病理特征的相关性分析 Caspase-3 在胃癌组织中的阳性表达率与胃癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关，差异具有统计学意义(P ＜0.05)，表现为随着浸润深度的加深，其阳性表达率显著降低;随着分化程度的降低，其阳性表达率降低;随着淋巴结转移的出现，其阳性表达率也显著降低(见表2)。

2.3 P53 在胃癌组织及正常胃黏膜组织的表达情况

P53 mRNA 在正常胃黏膜组织及胃癌组织的表达水平分别为0.40 ±0.11，0.81 ±0.21，差异有统计学意义(P ＜0.05);P53 在显微镜下呈紫色，P53 在胃癌组织中的阳性表达率为76.0%(38/50)，在正常胃黏膜组织中的阳性表达率为25.0%(5/20)，差异有统计学意义(P ＜0.05，见表3、图2)。

表2 Caspase-3 在胃癌组织中的阳性表达率与其临床病理特征的相关性分析Tab 2 Correlation analysis of Caspase-3 positive rate and its clinicopathological features in gastric cancer tissues

图2 P53 在胃癌组织及正常胃黏膜组织的表达情况(免疫荧光染色，400 ×) A:正常胃黏膜组织P53 少量表达;B ～C:胃癌组织P53 表达明显增多Fig 2 Expression of P53 in gastric cancer tissue and normal grastric tissue (immunofluorescence staining，400 ×) A:expression of P53 was low in normal gastric mucosa tissue;B ～C:expression of P53 increased significantly in gastric cancer tissue

2.4 P53 的阳性表达率与其临床病理特征的相关性分析 P53 在胃癌组织中的表达水平与胃癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关，差异具有统计学意义(P ＜0.05)，表现为随着浸润深度的加深，其阳性表达率显著升高;随着分化程度的降低，其阳性表达率增高;随着淋巴结转移的出现，其阳性表达率亦显著增高(见表4)。

表3 P53 在胃癌组织及正常胃黏膜组织的表达水平Tab 3 Expression of P53 mRNA in gastric cancer tissue and normal gastric tissue

表4 P53 在胃癌组织中的阳性表达率及与其临床病理特征的相关性分析Tab 4 Correlation analysis of P53 positive rate and its clinicopathological features in gastric cancer tissue

3 讨论

目前大量研究表明Caspase-3 及P53 与肿瘤的发生、发展密切相关，Caspase-3 为参与凋亡重要的因子，是Caspase 酶解底物之一，为凋亡级联反应下游产物，研究表明当Caspase-3 作用被受到抑制的时候，就会促进肿瘤的产生或者加速肿瘤的发生。本研究，Caspase-3 在胃癌中的阳性表达率明显低于正常胃黏膜组织。这与寇有为及刘勇等［1-2］的研究相一致。本研究中发现在伴有转移的胃癌、低分化的胃癌、浸润胃黏膜深的胃癌，其Caspase-3 的阳性表达率更低，这就说明Caspase-3 与肿瘤的发生及发展密切相关，这与邬万新等［3］的研究相一致。

P53 是发现较早的促进细胞凋亡的因子，即野生型P53，可以监视细胞的癌变发生，当细胞基因DNA发生突变时，可以促进修复，从而达到防治癌变的作用。因此当P53 发生突变时，其监视肿瘤的作用将会间接促进肿瘤的发生，促进正常细胞的转化或者加速已经转化的细胞进一步恶化。研究表明［4］，在胃癌、直肠癌、乳腺癌等恶性肿瘤中，都发现了突变型P53 基因的表达。本研究中，在胃癌组织中P53 基因阳性表达率为76.0%(38/50)，在正常胃黏膜组织中阳性表达率为25. 0% (5/20)，差异有统计学意义(P ＜0.05)，因此可以认为P53 与胃癌的发生密切相关。本研究还发现P53 在胃癌组织中的表达水平与胃癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关，表现为随着浸润深度的加深，其阳性表达率显著升高;随着分化程度的降低，其阳性表达率增高;随着淋巴结转移的出现，其阳性表达率亦显著增高，这些说明P53 与胃癌的发生、发展密切相关，与胃癌患者的预后密切相关。这与王国利及李桂青［4-5］的研究一致。

综上所述，Caspase-3 和P53 在胃癌组织中的表达水平与胃癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关。可以认为，Caspase-3 和P53 与胃癌的发生、发展密切相关。

［1］ Kou YW，Wang Q. Expression of XIAP and Caspase-3 in gastric cancer and their relationship ［J］. China Journal of Modern Medicine，2011，21(28):3490-3494.寇有为，王强. XIAP、Caspase-3 在胃癌中表达及其相关性［J］. 中国现代医学杂志，2011，21(28):3490-3494.

［2］ Liu Y，Shi LJ，Men XH，et al.Expression of PUMA，Caspase-3 protein in gastric cancer and its clinical significance［J］Chin J Gastroenterol Hepatol，2010，19(11):972-974.刘勇，史立军，孟宪红，等. PUMA、Caspase-3 蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义［J］. 胃肠病学和肝病学杂志，2010，19(11):972-974.

［3］ Wu WX，Jiang YQ，Jiang XC .Significance of expression of Caspase-3 and bcl-XL in patients with gastric carcinoma［J］. Chinese Journal of Cancer，2001，20 (7):726-729.邬万新，江悦琴，姜徐诚.Caspase-3 和bcl-XL 在胃癌中的表达及意义［J］.癌症，2001，20(7):726-729.

［4］ Wang GL，Li JW. Expression and clinical significance of Clusterin，Livin and P53 in gastric cancer［J］. China Medical Herald，2012，9(32):20-22.王国利，李景武. Clusterin、Livin 和P53 在胃癌中的表达及意义［J］.中国医药导报，2012，9(32):20-22.

［5］ Li GQ. Expression and significance of heat shock protein60 and P53 in gastric carcinoma［J］. Chin J Clin Gastroenterol，2014，26 (1):11-14.李桂青. HSP60 和P53 在胃癌中的表达及意义［J］.临床消化病杂志，2014，26(1):11-14.