人参果的组织培养与快繁技术

焦 宏

（辽宁省森林经营研究所，辽宁 丹东 118002）

人参果又名艳果，茄科多年生草本植物，原产哥伦比亚和智利安第斯山温带地区。近年引入我国，以其良好的生长习性和所结果实受到人们的欢迎，是一种观赏兼食用的植物。在15～30℃一年四季均可开花结果。从坐果到成熟75天左右。浆果心形、桃形、椭圆形，果皮呈金黄色具有紫色条纹，在高温天气可散发出芳香。果实甜爽多汁、清香、味美，具有高蛋白、低糖、低脂肪的特点，有防癌和软化血管的功能。最吸引人之处是每100g鲜果中含钙高达910mg，是西红柿的164倍，还含硒、钼、钴等人体所需的多种微量元素，堪称难得的保健食品。通常以播种和茎段扦插繁殖，但引入之初，数量有限，用组织培养法可以大大加快繁殖速度，为该品种的推广提供了一条有效途径。

1 材料与方法

1.1 材料

取自辽宁丹东古城子苗圃，以人参果带芽茎段、叶片作为外植体。实验于2011年在组培中心实验室进行。

1.2 方法

1.2.1 试验基本程序

试材处理→接种→增殖培养→生根培养

试材处理：切取3cm带顶芽或侧芽的茎段→流水冲洗60min→75%酒精浸15s→0.1%升汞（HgCl2）溶液消毒7min→无菌水冲洗4～5次→用滤纸吸去水分→将叶切成0.5cm×0.5cm小方块；茎段切成0.5cm带侧芽的小段。

1.2.2 培养基制作

表1 培养基配方

以 MS为基本培养基，激素选择：6-BA，IBA，NAA，KT。按激素含量不同诱导培养基设9种处理，生根培养基3种处理，如表1。

表1培养基中蔗糖含量为30g／L（生根为20g／L），琼脂8.5g／L，pH5.8～6.0，在1.1大气压下灭菌20min。

1.2.3 培养条件

培养温度20～25℃，光照每天14h，光照强度2000lx。

2 结果与分析

2.1 外植体诱导培养

叶片：接种7天后外植体，在7～9号培养基中组织变厚；培养15天后，在8号培养基中的愈伤组织开始出现许多白色小突起；20天后突起逐渐增大；40天后，在8号培养基中的愈伤组织已直接分化出苗，形成芽丛。

茎段：培养10天后观察，在1～7号培养基中茎段基部开始膨大，出现愈伤组织；20天后，在4、7号培养基里的愈伤组织紧密，颜色深绿；在2、5号培养基里的愈伤组织紧密，颜色淡绿；在3、6号培养基里的愈伤组织松散，颜色发白。把愈伤组织紧密、颜色深绿、淡绿的，再重新转入2、4、5、7号培养基中继续诱导培养。

培养50天后观察带侧芽茎段的生长情况，在5号培养基里的愈伤组织已分化出苗，苗多而且壮，同时仍有愈伤组织继续出现，在2号培养基的苗特别多、弱，且少部分呈水浸状；在4号培养基的苗少、壮。其它培养基有的没有反应，有的愈伤组织出现，但松散、不利于苗的分化，有的直接分化出几株苗太少或太弱，不理想。

综上所述，以叶作外植体，用8号培养基进行诱导培养较为理想，一般在2个周期（40～50天）即能形成丛生芽，以茎段作外植体，在1～7号培养基一般20天能诱导出愈伤组织，但相对来讲在2、5、7号培养基比较理想，50天即能诱导出丛生芽。

2.2 增殖培养

将较长的试管苗切成1cm左右茎段，其余切割成0.5cm×0.5cm左右小块，转入继代培养基里进行增殖培养，观察试管苗在继代培养基中的表现情况，试管苗在5号培养基中，分化苗多且粗壮，其余苗长势较弱。最后需转入7号培养基中进行壮苗培养，待生根。增殖培养周期的长短，要根据试管苗生长快慢来决定，生长快则继代周期短，反之继代周期长。总之，观察试管苗生长速度下降时，即可继代。间隔时间太长，试管苗老化，叶变黄部分脱落；时间太短，浪费人力、物力。一般间隔期为20～25天，繁殖系数一般为3～5倍。

2.3 试管苗生根

在无菌状态下，选择粗壮、健康的2～3cm高小苗转入不同的生根培养基中进行生根培养，其余小苗继续进行继代增殖培养。结果见表2。

表2 试管苗在不同培养基生根情况

从表2中可以看出，11号培养基生根时所需天数最少，根系生长情况最好，根的条数最多，所以11号培养基为最适生根培养基。

2.4 试管苗移栽

试管苗移栽是组织培养快繁的重要环节，是由异养转为自养的过程。当根长到1.5～2.0cm时，打开瓶盖，取出小苗，洗净培养基，用多菌灵500～800倍溶液浸泡30min左右，然后栽入用0.1%高锰酸钾消过毒的炼苗床上，炼苗床基质作4个处理，分别为：沙土（1∶1）、沙：蛭石（1∶1）、纯沙、纯蛭石。1天浇1次水，1周喷1次百菌清和营养液，盖塑料拱棚，保温保湿，7天后逐渐增加通风，并逐渐减少浇水，1个月后移栽到营养钵或直接移栽大田。试验结果表明：以纯沙为基质最好，成活率达95%以上。

3 结论

3.1 茎段培养在5号培养基MS＋BA2＋KT2上表现最好，前期可诱导出愈伤组织，仍用原培养基继代1次即可出苗，繁殖系数3倍以上。

3.2 叶在8号培养基MS＋BA4＋KT2＋NAA0.1上连续培养40天即可分化出不定芽，继代培养时在5号培养基MS＋BA2＋KT2（同茎段）上表现最好。但较茎段分化出的苗弱，因此需转入7号培养基MS＋BA1＋KT1＋NAA0.1上壮苗。

3.3 生根培养以11号培养基1／2MS＋IBA0.1为好，生根率达98%以上，并且每株可达5～10条根。

3.4 移栽基质以纯沙为最好，成活率达95%以上，并且成本最低，资源丰富。