缺血性脑卒中患者血清抗氧化型脂蛋白抗体活性检测分析＊

杜亚梅，张国军，王 谦，方 芳，康熙雄（首都医科大学附属北京天坛医院检验科，北京 100050）

近年来研究表明，动脉粥样硬化（AS）是导致缺血性脑卒中的主要危险因素。目前临床多以三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）水平反映AS，但是TG、TC、LDL水平升高只是AS的危险因素而不是致病因素，并不能反映AS的真实情况。虽然通过降低脂蛋白（尤其是TC）对预防冠心病、二次心肌梗死有一定的效果，但是仍然有很多没有高胆固醇或其他高脂蛋白病史的患者有相关疾病。关于AS的发病机制，脂蛋白氧化修饰假说基本已被公认。氧化型脂蛋白是免疫原，可以刺激机体产生抗氧化型脂蛋白抗体（ALOA）；ALOA不仅可以与氧化型脂蛋白结合，还可以作为酶的催化剂使LDL中的脂质氧化，进一步促进AS的形成。检测患者血清中的ALOA可以直接反映机体脂蛋白氧化的情况。为研究缺血性脑卒中与ALOA的相关性，作者采用Athero AbzymeTMIgG检测试剂盒检测了45例缺血性脑卒中患者及45例健康体检者的ALOA活性，对ALOA的临床意义有了进一步的认识，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料45例健康对照者为首都医科大学附属北京天坛医院2013年5月的健康体检者，其中男23例，女22例，年龄37～74岁，平均（56.2±11.5）岁。45例缺血性脑卒中患者为本院2013年5～7月神经内科的住院患者，符合卫生部2012年制定的缺血性脑卒中诊断和诊疗质量控制行业标准，其中男34例，女11例，年龄24～89岁，平均（59.6±14.3）岁。两组年龄、性别差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 仪器与试剂日立008生化仪、美国Molecular Devices Spectra Max M5酶标仪；罗氏TG、TC、LDL、高密度脂蛋白（HDL）检测试剂、Athero AbzymeTMALOA IgG检测试剂盒。

1.3 方法

1.3.1 所有检测者均空腹8h以上，次日清晨取静脉血，抽血后30min内分离血清，-80℃保存。

1.3.2 ALOA活性检测 使用Babraham Research Campus的Athero AbzymeTMALOA IgG检测试剂盒进行测定，方法为酶联免疫吸附试验（ELISA），操作按照说明书进行。每份待检标本分2份进行处理，1份56℃加热30min，1份不处理。反应完成后，使用酶标仪测定A值，标本加热孔的A值为A2，未加热孔为A1。实验结果判断：A2＞阳性质控值×0.6且A2-A1＞阳性质控值×0.1判为阳性；A2＜阳性质控值×0.6且A2-A1＜阳性质控值×0.1判为阴性。

1.4 统计学处理用SPSS17.0软件进行统计分析，ALOA活性阳性率采用百分率表示，组间比较采用卡方检验，TG、TC、LDL、HDL检测结果用±s表示，组间比较采用t检验；显著性检验水准α=0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 ALOA活性测定缺血性脑卒中组ALOA活性阳性率为40.0%（18／45），明显高于健康对照组的8.9%（4／45），差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 TC、TG、LDL、HDL测定见表1。缺血性脑卒中组TG、TC、LDL明显高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；HDL明显低于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 两组TG、TC、LDL、HDL测定结果（mmol／L,±s）

表1 两组TG、TC、LDL、HDL测定结果（mmol／L,±s）

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3 讨 论

脑卒中是神经系统的常见病和多发病，是世界范围内人类因疾病致残和致死的主要病因之一。在基于全国第六次人口普查数据对脑卒中患者进行年龄、性别和城、乡构成比例标准化后，中国脑卒中的患病率为1.82%。并且，我国脑卒中发病的年轻化趋势非常明显，青年（15～45岁）缺血性脑卒中发病率约为（2～10）／10万，40岁以下脑卒中患者人数占全部脑卒中患者的10%～20%［1］。脑卒中根据发病原因不同分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中两大类，脑卒中患者中有85%～90%为缺血性脑卒中［2］。缺血性脑卒中已成为严重危害人类健康的一种疾病。

研究表明，AS与缺血性脑卒中的发生密切相关，在中国人群中颅内AS是导致缺血性脑卒中的最主要因素［3］。踝肱指数（ABI）是通过测量踝部胫后动脉或胫前动脉以及肱动脉的收缩压，得到踝部动脉压与肱动脉压之间的比值，常用于AS血栓形成性疾病的初筛。有学者通过测量ABI，发现缺血性脑卒中与AS呈强相关性，进一步证实AS是导致缺血性脑卒中发病的主要原因［4］。AS与缺血性脑卒中的相关性也得到了影像学的证实。Singh等［5］通过高分辨超声检查发现，有动脉粥样斑块的患者再次发生脑卒中的可能性更高。AS由多种因素引起，如TC、TG、LDL、HDL、氧化型LDL（ox-LDL）、抗ox-LDL抗体等。本实验研究结果显示，缺血性脑卒中患者TG、TC、LDL明显高于健康者，HDL明显低于健康者，说明高血脂是缺血性脑卒中的危险因素。

近年来研究发现，诱发AS的关键原因是脂蛋白氧化修饰［6］。LDL含有丰富的多不饱和脂肪酸，很容易被氧化修饰形成ox-LDL，ox-LDL通过促进泡沫细胞形成、促进细胞黏附于内皮并向内皮下趋化、促进巨噬细胞增殖退化、诱导内皮细胞增生和平滑肌细胞增生移行等多种途径参与AS的形成过程。同时ox-LDL还具有免疫原性，可以刺激机体产生抗ox-LDL。诸多研究结果提示，抗ox-LDL水平的增加和AS病变有关，且独立于年龄、性别、体质量指数、TG、TC和HDL水平［7-8］。但也有研究表明，抗ox-LDL是AS的保护因素。Rossi等［9］检测了529例冠心病患者的抗ox-LDL滴度，结果表明抗ox-LDL是AS的保护因素。Che等［10］检测了154例冠心病患者的抗ox-LDL滴度，发现抗体滴度明显低于健康者，并且与疾病的严重程度呈负相关。目前，对于抗ox-LDL与AS发病的关系有以上两种矛盾的结论。

ALOA是一种新的氧化型脂蛋白抗体，不仅可以与脂蛋白发生抗原抗体反应，还可以氧化LDL中的脂类，使LDL转化为ox-LDL，目前多认为这是AS的主要发病机制。本研究结果显示，ALOA活性升高与缺血性脑卒中的发病具有相关性，有酶活性的ALOA的产生可能与缺血性脑卒中的发病有关。之前对抗ox-LDL的检测都是用ELISA检测抗体的滴度，本研究用ELISA检测抗体酶的活性，而酶活性是使LDL转化为ox-LDL的关键。检测ALOA的活性可以直接反映机体内的脂蛋白氧化状态，是诊断缺血性脑卒中的较好指标。本实验研究结果表明，有活性的ALOA的产生与缺血性脑卒中的发病有关。

综上所述，ALOA活性是反映缺血性脑卒中的较好指标，可以反映患者体内脂蛋白的氧化情况，对于指导临床治疗及判断患者预后具有重要意义。健康者ALOA活性阳性时，体内有脂蛋白氧化，这可能是发生AS的潜在危险因素。对ALOA活性阳性的健康者进一步长期随访研究，更有助于探讨ALOA活性的临床意义。

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