水温对虎纹蛙受精卵孵化的影响

符史杭+徐尚冲

摘要：孵化是虎纹蛙（Rana rugulosa）养殖的第一个环节，为研究水温对虎纹蛙受精卵孵化率及蝌蚪成活率的影响，设置了12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃等水温进行虎纹蛙受精卵孵化，记录了48、60、72 h的蝌蚪数量。结果表明，虎纹蛙孵化的合适水温为24～34 ℃，其孵化率均在70%以上，孵出的蝌蚪24 h成活率均在96%以上;在此水温范围内孵化率随着温度的升高而升高，而蝌蚪24 h成活率则没有明显变化。

关键词：虎纹蛙（Rana rugulosa）;水温;成活率;孵化率

中图分类号：S966.3+3        文献标识码：A        文章编号：0439-8114（2014）20-4924-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.20.040

Effects of Water Temperature on Hatching Fertilized Egg of Tiger Frog

FU Shi-Hang， XU Shang-Chong

（College of Life Sciences/Ministry of Education Key Laboratory for Tropical Animal and Plant Ecology，

Hainan Normal University， Haikou 571158， China）

Abstract： Hatching was the first part of tiger frog breeding. The fertilized egg of tiger frog were incubated at 12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃ to study the impact of the water temperature on hatching rate of fertilized egg and survival rate of tadpole of tiger frog. The number of tadpole after 48、60、72 h were recorded. The results showed that the most suitable water temperature for hatching was 24～34 ℃， with hatching rate of more than 70% and 24 h survival rate of more than 96%. The hatching rate increased when the water temperature increased， but the 24 h survival rate of tadpole did not change.

Key words：tiger frog（Rana rugulosa）; temperature of water; survival rate; hatching rate

研究表明热环境能影响两栖爬行类的胚胎发育及幼体的生长发育，在孵化温度范围内，热环境显著地影响孵化成功率及新生幼体的大小、生长和行为[1-5]。恒定的相对高温增加了林蛙和中华大蟾蜍受精卵的孵化速率，但是降低了其存活率[6-8]。

国家林业局于2003年8月12日公布了《商业性经营利用驯养繁殖技术成熟的陆生野生动物名单》，虎纹蛙（Rana rugulosa）等54种陆生野生动物列在其中。海南省是全国最主要的虎纹蛙养殖区，养殖量曾经占全国的85%[9]。虎纹蛙人工养殖的第一个环节就是孵化。由于气温的原因，海南岛每年的冬春季中有一段时间无法进行产卵、孵化，生产进入种蛙保存环节，待气温回升后才能开始产卵、孵化。每年年初上市的商品蛙市场价格较高，养殖效益明显，导致养殖户都尽早安排每年的第一个养殖周期。在实际生产过程中，许多养殖户仅根据气温回暖的感觉安排生产，由于缺乏科学知识的指导，第一批虎纹蛙受精孵化率往往不高，有的养殖场甚至出现整批失败的现象，影响了虎纹蛙养殖业的发展。本研究将探明影响虎纹蛙受精卵孵化率的热环境量化因素，为虎纹蛙养殖业健康发展提供科学指导。

1  材料与方法

1.1  材料

虎纹蛙受精卵来源于海南省海口市美兰区大致坡镇伍生虎纹蛙养殖场730日龄虎纹蛙种蛙所产。

1.2  方法

根据虎纹蛙冬眠温度和海南省人工养殖虎纹蛙集中区域露天养殖池水体最高温度，在生化培养箱中设置了12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃等16个不同温度试验组，每组设3个重复。分别将10 mL的受精卵放在20 cm×10 cm×26 cm的孵化箱中进行孵化，记录各个孵化箱的受精卵投放数量（简称为受精卵总量，下同）和48、60、72 h蝌蚪的数量。

孵化率=（蝌蚪数量/受精卵总量）×100%;成活率=（72 h蝌蚪数量/48 h蝌蚪数量）×100%，并用Excel软件对试验数据进行统计分析。

2  结果与分析

2.1  水温对虎纹蛙受精卵孵化率的影响

在生化培养箱中设置了12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃等16个温度梯度，每个培养箱中放入3个20 cm×10 cm×26 cm的孵化箱，并加水至10 cm处。每个孵化箱水体中加入10 mL虎纹蛙受精卵进行孵化，虎纹蛙受精卵孵化结果见表1。由表1可以看出，12、14、16、18、20、38、40、42 ℃恒温环境中孵化48 h后，各个孵化箱均没有蝌蚪出现;而22、24、26、28、30、32、34、36 ℃恒温环境中孵化48 h后各个孵化箱均有蝌蚪出现。

2.2  不同水温环境中孵化的蝌蚪的存活情况

将孵化出来的虎纹蛙蝌蚪在培养箱中继续培养24 h，观察60、72 h孵化箱中的蝌蚪存活情况，每个孵化箱中均有死亡蝌蚪出现（表2）。

3  小结与讨论

2011～2013年，海南省养殖的第一批虎纹蛙的市场收购价格均在20元/kg左右，是年均价格的2～3倍，使养殖户争先提早安排当年的第一批养殖，甚至出现春节刚过就急着进行种蛙抱对产卵孵化，但是孵化率普遍较低，造成大量浪费种蛙资源现象，直接推高了养殖成本[6-12]。本研究表明水温在22～36 ℃虎纹蛙受精卵才能孵化蝌蚪，水温在24～34 ℃孵化率稳定在72%以上，水温在22 ℃以上，最好在24～34 ℃之间安排种蛙抱对产卵孵化，确保养殖成功率，提高养殖经济效益，促进虎纹蛙养殖业健康发展。

本研究是为了探明温度与虎纹蛙受精卵孵化之间的关系而设置的恒温试验，由于人工养殖虎纹蛙是在露天环境中进行的，水温随着气温的变化而变化，变化的水温对虎纹蛙受精卵孵化的影响如何，有待于进一步研究。

参考文献：

[1] ALLSTEADT J， LANG J W. Incubation temperature affects body size and energy reserves of hatchling American alligators （Alligator mississippiensis）[J]. Physiol Zool，1995，68：76-97.

[2] CONGDON J D， GIBBONS J W. Turtle Eggs： Their Ecology and Evolution. In： Gibbons， J. W. Ed. Life History and Ecology of the Slider Turtle[M]. Washington： Smithsonian Institution Press，1990.109-123.

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[4] BOBYN M L， BROOKS R J. Interclutch and interpopulation variation in the effects of incubation conditions on sex， survival， and growth of hatchling turtles（Chelydra serpentina） [J]. Zool （London），1994，233：233-257.

[5] ROOSENBURG W M， KELLEY K C. The effect of egg size and incubation temperature on growth in the turtle， Malaclemys terrrapin[J]. Herpetol，1996，30：198-204.

[6] 刘  莉，李  成，李乃兵，等.不同水温条件下中华蟾蜍蝌蚪的表型可塑性研究[J].四川动物，2006，25（2）：214-217.

[7] 王立志，李晓晨.大蟾蜍卵孵化的温度效应研究[J].河北农业大学学报，2006，29（3）：71-74.

[8] 王立志，李晓晨.温度对中国林蛙卵孵化和孵出热耐受性的影响[J].动物学杂志，2007，42（1）：121-127.

[9] 陈  雯，俞根宝，郑荣泉，等.温度对棘胸蛙胚胎发育及蝌蚪表型特征的影响[J].贵州农业科学，2010，38（1）：108-110.

[10] 符史杭.虎纹蛙在海南的濒危状况及其保护措施[D].南京：南京农业大学，2010.

[11] 符史杭.虎纹蛙三种养殖方式的经济效益比较[J].北京农业，2013（5）：168-169.

[12] 符史杭，汪继超，傅丽蓉，等.海南省人工养殖虎纹蛙的现状及其对策[J].湖北农业科学，2013，52（5）：1118-1121.

2.2  不同水温环境中孵化的蝌蚪的存活情况

将孵化出来的虎纹蛙蝌蚪在培养箱中继续培养24 h，观察60、72 h孵化箱中的蝌蚪存活情况，每个孵化箱中均有死亡蝌蚪出现（表2）。

3  小结与讨论

2011～2013年，海南省养殖的第一批虎纹蛙的市场收购价格均在20元/kg左右，是年均价格的2～3倍，使养殖户争先提早安排当年的第一批养殖，甚至出现春节刚过就急着进行种蛙抱对产卵孵化，但是孵化率普遍较低，造成大量浪费种蛙资源现象，直接推高了养殖成本[6-12]。本研究表明水温在22～36 ℃虎纹蛙受精卵才能孵化蝌蚪，水温在24～34 ℃孵化率稳定在72%以上，水温在22 ℃以上，最好在24～34 ℃之间安排种蛙抱对产卵孵化，确保养殖成功率，提高养殖经济效益，促进虎纹蛙养殖业健康发展。

本研究是为了探明温度与虎纹蛙受精卵孵化之间的关系而设置的恒温试验，由于人工养殖虎纹蛙是在露天环境中进行的，水温随着气温的变化而变化，变化的水温对虎纹蛙受精卵孵化的影响如何，有待于进一步研究。

参考文献：

[1] ALLSTEADT J， LANG J W. Incubation temperature affects body size and energy reserves of hatchling American alligators （Alligator mississippiensis）[J]. Physiol Zool，1995，68：76-97.

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[4] BOBYN M L， BROOKS R J. Interclutch and interpopulation variation in the effects of incubation conditions on sex， survival， and growth of hatchling turtles（Chelydra serpentina） [J]. Zool （London），1994，233：233-257.

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[6] 刘  莉，李  成，李乃兵，等.不同水温条件下中华蟾蜍蝌蚪的表型可塑性研究[J].四川动物，2006，25（2）：214-217.

[7] 王立志，李晓晨.大蟾蜍卵孵化的温度效应研究[J].河北农业大学学报，2006，29（3）：71-74.

[8] 王立志，李晓晨.温度对中国林蛙卵孵化和孵出热耐受性的影响[J].动物学杂志，2007，42（1）：121-127.

[9] 陈  雯，俞根宝，郑荣泉，等.温度对棘胸蛙胚胎发育及蝌蚪表型特征的影响[J].贵州农业科学，2010，38（1）：108-110.

[10] 符史杭.虎纹蛙在海南的濒危状况及其保护措施[D].南京：南京农业大学，2010.

[11] 符史杭.虎纹蛙三种养殖方式的经济效益比较[J].北京农业，2013（5）：168-169.

[12] 符史杭，汪继超，傅丽蓉，等.海南省人工养殖虎纹蛙的现状及其对策[J].湖北农业科学，2013，52（5）：1118-1121.

2.2  不同水温环境中孵化的蝌蚪的存活情况

将孵化出来的虎纹蛙蝌蚪在培养箱中继续培养24 h，观察60、72 h孵化箱中的蝌蚪存活情况，每个孵化箱中均有死亡蝌蚪出现（表2）。

3  小结与讨论

2011～2013年，海南省养殖的第一批虎纹蛙的市场收购价格均在20元/kg左右，是年均价格的2～3倍，使养殖户争先提早安排当年的第一批养殖，甚至出现春节刚过就急着进行种蛙抱对产卵孵化，但是孵化率普遍较低，造成大量浪费种蛙资源现象，直接推高了养殖成本[6-12]。本研究表明水温在22～36 ℃虎纹蛙受精卵才能孵化蝌蚪，水温在24～34 ℃孵化率稳定在72%以上，水温在22 ℃以上，最好在24～34 ℃之间安排种蛙抱对产卵孵化，确保养殖成功率，提高养殖经济效益，促进虎纹蛙养殖业健康发展。

本研究是为了探明温度与虎纹蛙受精卵孵化之间的关系而设置的恒温试验，由于人工养殖虎纹蛙是在露天环境中进行的，水温随着气温的变化而变化，变化的水温对虎纹蛙受精卵孵化的影响如何，有待于进一步研究。

参考文献：

[1] ALLSTEADT J， LANG J W. Incubation temperature affects body size and energy reserves of hatchling American alligators （Alligator mississippiensis）[J]. Physiol Zool，1995，68：76-97.

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[4] BOBYN M L， BROOKS R J. Interclutch and interpopulation variation in the effects of incubation conditions on sex， survival， and growth of hatchling turtles（Chelydra serpentina） [J]. Zool （London），1994，233：233-257.

[5] ROOSENBURG W M， KELLEY K C. The effect of egg size and incubation temperature on growth in the turtle， Malaclemys terrrapin[J]. Herpetol，1996，30：198-204.

[6] 刘  莉，李  成，李乃兵，等.不同水温条件下中华蟾蜍蝌蚪的表型可塑性研究[J].四川动物，2006，25（2）：214-217.

[7] 王立志，李晓晨.大蟾蜍卵孵化的温度效应研究[J].河北农业大学学报，2006，29（3）：71-74.

[8] 王立志，李晓晨.温度对中国林蛙卵孵化和孵出热耐受性的影响[J].动物学杂志，2007，42（1）：121-127.

[9] 陈  雯，俞根宝，郑荣泉，等.温度对棘胸蛙胚胎发育及蝌蚪表型特征的影响[J].贵州农业科学，2010，38（1）：108-110.

[10] 符史杭.虎纹蛙在海南的濒危状况及其保护措施[D].南京：南京农业大学，2010.

[11] 符史杭.虎纹蛙三种养殖方式的经济效益比较[J].北京农业，2013（5）：168-169.

[12] 符史杭，汪继超，傅丽蓉，等.海南省人工养殖虎纹蛙的现状及其对策[J].湖北农业科学，2013，52（5）：1118-1121.