L1CAM在胃癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系

董建华，王学松，韩文学，陈晓红，王钧芹，李 利，王元宇

（1莒县人民医院，山东 莒县 276500;2浙江省人民医院）

L1细胞黏附分子（L1CAM）是免疫球蛋白超家族中的Ⅰ型跨膜糖蛋白。L1CAM在多种肿瘤组织中表达，在肿瘤浸润的边缘和转移灶中高表达，其在肿瘤组织中的表达能促进肿瘤细胞的侵袭和迁移［1，2］。但目前关于L1CAM在胃癌方面的研究很少，仅有Kodera等［3］应用免疫组织化学检测胃癌组织中L1CAM的表达情况。为此，我们回顾了436例胃癌患者资料，并分析L1CAM与患者临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择1998年1月～2004年12月莒县人民医院手术切除的胃癌组织436份，均经术后病理证实，且患者术前未行放化疗。其中患者男311例、女125例，年龄17～91岁、中位年龄60岁;按WHO 2002年胃癌分类标准分为乳头状腺癌16例、管状腺癌326例、黏液腺癌29例、印戒细胞癌65例;高分化腺癌13例、中分化腺癌128例，低分化腺癌293例、未分化癌2例;TNM分期:Ⅰ期90例、Ⅱ期104例、Ⅲ期173例、Ⅳ期69例;胃癌淋巴分期:PN0期166例、PN1期136例、PN2期99例、PN3期35例;有远处转移61例，无远处转移375例。另取癌旁正常胃黏膜组织92份作为对照。随访起止时间为1998年1月～2008年12月，并随访5年以上。

1.2 方法

1.2.1 L1CAM组织芯片制备和免疫组织化学染色参照文献［4，5］制备 L1CAM 组织芯片及免疫组织化学染色。鼠抗人L1CAM抗体购于Abcam公司，广谱二抗试剂盒及DAB显色试剂盒均购于北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.2.2 结果判定 以细胞质和细胞核出现棕黄色颗粒为L1CAM阳性。根据染色程度和染色细胞百分率进行评定和分析［6，7］:基本不着色者为0分，着色淡者为1分，着色适中者为2分，着色深者为3分;着色细胞占计数细胞的百分率≤5%记0分，6%～25%记1分，26% ～50%记2分;≥51%记3分。将每张切片的染色程度与染色细胞百分率得分相乘为最后得分。0～1分为阴性（-），2～3分为弱阳性（+），4～6分为中等阳性（++），＞6分为强阳性（+++）。在统计分析中，将表达（-、+）划为低表达组，（++、+++）划为高表达组。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，计量资料以±s表示，比较采用配对t检验;计数资料比较采用χ2或Fisher精确概率检验。生存数据采用Kaplan-Meier分析，并绘制生存曲线，应用Logrank检验差异性，用Cox风险模型进行独立预后因素分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 L1CAM在正常胃黏膜和胃癌组织中的表达在92份正常胃黏膜中，L1CAM蛋白阴性表达70份（76.1%），弱阳性表达 22 份（23.9%）。在 436 份胃癌组织中，L1CAM蛋白高表达118份（27.1%），低表达318份（72.9%），主要在细胞质中表达。

2.2 L1CAM蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系L1CAM 低表达组年龄（58.13 ±12.03）岁，明显低于高表达组［（61.15 ±12.0）岁;t=-2.632，P=0.009］。其余见表1。

表1 L1CAM在胃癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系［例（%）］

2.3 L1CAM蛋白表达与患者预后的关系 见图1。Kaplan-Meier分析显示，L1CAM低表达患者的5年生存率（50.0%）明显高于L1CAM高表达患者（16.1%，P＜0.05）。在 TNMⅠ期中，L1CAM 高表达患者的5年生存率（60.0%）明显低于L1CAM低表达患者（87.1%，P＜0.05）;在Ⅱ期中，L1CAM 高表达患者的5年生存率（36.4%）明显低于L1CAM低表达患者（65.6%，P＜0.05）;在Ⅲ期中，L1CAM高表达患者的 5年生存率（16.9%）明显低于L1CAM低表达患者（30.4%，P＜0.05）;在Ⅳ期中，L1CAM高表达患者的5年生存率（0）与L1CAM低表达患者无显著差异（5.3%，P＞0.05）。用Cox风险模型进行独立预后因素分析，结果发现L1CAM表达、浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期是胃癌的独立预后因素（P均＜0.05）。

图1 不同TNM分期L1CAM高表达和低表达患者的生存曲线

3 讨论

L1CAM属免疫球蛋白超家族中的Ⅰ型跨膜糖蛋白，分子量为200～220 kD，首先在神经系统中被发现，之后发现在结直肠癌、胰腺癌、食管癌、肝内胆管癌、胃肠道间质瘤和胃癌组织均有表达，在肿瘤组织浸润的边缘表达显著增强［8～12］。Kodera 等［3］应用免疫组织化学检测了L1CAM在72份pT3期胃癌组织中的表达情况，结果发现L1CAM在15份胃癌组织中表达，以肠型胃癌为主。本研究中，76.1%的非肿瘤胃黏膜组织中L1CAM蛋白为阴性表达，23.9%呈弱阳性表达。在27.1%的胃癌组织中L1CAM蛋白高表达，且主要在细胞质中表达。与Kodera等［3］研究一致。

L1CAM在结直肠癌、胰腺癌、食管癌和胆管癌等组织中表达，且其在肿瘤组织的表达与临床病理特征和预后相关。L1CAM的表达与结直肠癌的分期、远处转移和复发相关［13］。L1CAM在胰腺癌组织高表达，其表达与淋巴结转移、血管侵犯、周围神经浸润和疼痛程度有关［14］。L1CAM在胆囊癌组织的表达与胆囊癌组织学分级、浸润深度、临床分期、血管和淋巴侵犯相关［15］。本研究发现，L1CAM蛋白的表达强度与肿瘤部位、肿瘤大小、Lauren分型、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移、淋巴结分期有关，提示L1CAM可能参与胃癌的发生、发展。

临床研究发现，L1CAM在结直肠癌、胰腺癌、胆囊癌和肝外胆管细胞癌中高表达，并与患者的预后密切相关［13～16］。本研究发现，L1CAM 蛋白的表达强度与预后有关。为排除肿瘤分期对预后的影响，我们对不同 TNM分期患者进一步分析发现，在TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ期中，L1CAM高表达患者的5年生存率均低于 L1CAM低表达患者;在 TNMⅣ期中，L1CAM高表达患者的5年生存率与L1CAM低表达患者无统计学差异。表明L1CAM在胃癌组织的表达与患者预后有关，并且是独立预后因素之一。

综上所述，L1CAM在胃癌组织中高表达，其表达与淋巴结转移、远处转移、TNM分期和预后显著相关。

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