HER2基因在新疆维汉民族胃癌中的表达及其对预后的影响

孙 毅，赵化荣，张 华，毛 睿，郑 超，艾斯克尔·吐拉洪，包永星

(新疆医科大学第一附属医院，乌鲁木齐830000)

目前，手术仍然是根治胃癌的最有效方法;然而由于胃癌早期缺乏特异性临床表现，确诊时约40%患者为进展期(1年生存率5%～15%)，根治术后复发转移率为40%～60%。因此，寻找胃癌特定分子靶点，为有效治疗提供分子基础是临床的迫切需求。关于人表皮生长因子受体2(HER2)基因与肿瘤关系，大量研究集中于乳腺癌，与胃癌的关系研究较少。本文就HER2在新疆维汉民族间胃癌中的表达差异以及对其预后影响进行研究，为相关分子靶向药物治疗胃癌提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择新疆医科大学第一附属医院2002年1月～2010年12月手术切除或活检的胃癌组织标本160例，男130例、女30例，年龄27～85岁、平均58.3岁;其中汉族108例，维吾尔族(维族)52例。患者均符合以下标准:①胃癌均在术前被相关检查明确诊断并明确有无转移，包括实验室检查、胸片、上消化道内镜检查、病理活检以及腹盆腔CT;②胃癌术前未行新辅助治疗;③胃癌均经过影像学检查评估分期;④有完整的临床及随访资料。160例中排除围手术期死亡的胃癌患者。本研究开始之前获得研究单位伦理委员会批准，遵循赫尔辛基宣言(2000年版)以及相关的法规，患者对本研究知情同意。

1.2 方法

1.2.1 HER2免疫组化染色 石蜡切片脱蜡、水化，PBS冲洗3×3 min，高温高压抗原修复;加3%过氧化氢溶液，室温下孵育10 min，以阻断内源性过氧化物酶。PBS冲洗3×3 min，加第一抗体，室温下孵育60 min;PBS冲洗3×5 min，加聚合物增强剂(试剂A)，室温下孵育20 min;PBS冲洗3×3 min，加酶标抗鼠聚合物(试剂B)，室温下孵育30 min;PBS冲洗3×3 min，加新配制的DAB显色液，显微镜下观察3～10 min，阳性显色为棕色。自来水冲洗，苏木素复染，0.1%盐酸分化，自来水冲洗，PBS冲洗返蓝;梯度乙醇脱水干燥，中性树脂封片。

1.2.2 HER2染色阳性判读和评分标准 胃癌标本类型分为手术标本及活检标本，其评价指标如下:①手术标本无反应或＜10%肿瘤细胞膜染色，活检标本任何肿瘤细胞无膜染色，评分为0(阴性);②手术标本≥10%肿瘤细胞微弱或隐约可见膜染色、仅有部分细胞膜染色，活检标本肿瘤细胞团微弱或隐约可见膜染色(不管着色的肿瘤细胞占整个组织的百分比)，评分为1(阴性);③手术标本≥10%肿瘤细胞有弱到中度的基底侧膜、侧膜或完全性膜染色，活检标本肿瘤细胞团有弱到中度的基底侧膜、侧膜或完全性膜染色，评分为2+;④手术标本≥10%肿瘤细胞基底侧膜、侧膜或完全性膜强染色，活检标本肿瘤细胞的基底侧膜、侧膜或完全性膜强染色，评分为3+(阳性)。评分为2+的病例为不确定病例，需进一步行荧光原位杂交(FISH)检测，如FISH阳性，判断为HER2阳性;如FISH阴性，判断为HER2阴性。

1.2.3 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件，具有不同临床病理特点胃癌患者的HER2表达差异比较采用χ2检验或Fisher精确概率法。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 维汉民族胃癌患者HER2基因表达阳性率HER2基因表达总阳性率为10.00%(16/160)。维族HER2基因表达阳性率为15.38%(8/52)，汉族HER2基因表达阳性率为7.41%(8/108)。见表1。

表1 维汉民族胃癌患者免疫组化染色HER2基因表达(例)

2.2 HER2基因表达与胃癌临床病理参数的关系HER2基因表达阳性与性别、年龄、族别、肿瘤大小、肿瘤病理类型、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、神经是否受侵、淋巴管内是否有癌栓、贫血及癌胚抗原无相关性(P均＞0.05)，而与肿瘤部位、Lauren分型及分化程度相关(P均＜0.05)。HER2基因表达与临床病理参数的关系见表2。

表2 HER2表达与维汉胃癌患者临床病理参数的关系

3 讨论

HER2是人表皮生长因子受体家族的一个成员［1］，该家族属于Ⅰ型受体酪氨酸激酶，又称ErbB受体家族，是一种膜结合蛋白。该蛋白具有一个受体结合域的胞外区，一个短的跨膜区段和一个具有酪氨酸激酶受体活性的胞内区。胞外区结合不同的配体，启动细胞内的分子信号转导，最终从多个途径影响肿瘤细胞的生物活性，如细胞增殖、黏附、转移和分化等，导致肿瘤的复发和转移。HER2基因位于邻近的拓扑异构酶Ⅱa基因上，也与鸟类红细胞增多症病毒上的癌基因v-erbB有关。最近的研究表明，HER2基因在许多不同类型的人类癌症发展中起到一个关键性的作用。侵袭性乳腺癌中可检测到HER2过度表达和(或)扩增，其表达率为10%～34%，是乳腺癌化疗和内分泌治疗反应不佳的一个预测因子。HER2过度表达和(或)扩增也在结肠癌、膀胱癌、卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌、宫颈癌、头颈部癌、食管癌和胃癌中被观察到。研究表明，30%以上的人类肿瘤组织中伴有HER2基因过度表达，尤其是乳腺癌，其过表达与乳腺癌分化程度、临床分期呈正相关，且表达越高，预后越差［2］。

HER2基因研究已经被应用于胃癌及胃食管结合部癌［3］。Tanner等［4］认为，于胃食管连接部近端5 cm和远端5 cm之间(即胃食管连接部)的胃癌发生率比发生于胃部的胃癌HER2的阳性表达率高;而国内一些研究发现，HER2的阳性表达与肿瘤部位无关［5，6］。本研究提示，HER2 基因的阳性表达与肿瘤的部位有关，其阳性表达率在胃食管结合部及胃部分别为22.86%和6.40%，这与 Tanner等研究结果相似。

本研究发现，肠型胃癌比弥漫型和混合型胃癌HER2表达率高，这与国内外研究［7～9］相一致。在To-GA试验中评价曲妥珠单抗加化疗应用于HER2阳性的进展期胃癌患者中，HER2阳性表达率在胃食管腺癌、胃腺癌，肠型和弥漫型胃癌中分别是33%、21%、32%和6%。特定的组织学类型肿瘤中的癌基因可以与HER2基因的过度表达联系在一起，HER2基因激活可能与肠型胃癌特定细胞亚群的生长发育相关，而混合型、弥漫型胃癌HER2的表达率无统计学差异。HER2在肠型胃癌中的选择性表达机制复杂，不是所有的肠型胃癌中HER2都会高表达，组织分型不是HER2高表达的惟一相关因素。最近研究发现，钙黏蛋白基因突变是弥漫型胃癌的遗传标志［10］。因此HER2基因的扩增和高表达与弥漫型胃癌预后的关系有待于进一步研究。

本研究还显示，HER2表达与胃癌分化程度明显相关，高、中分化癌阳性率明显高于低分化及未分化癌［11］，提示HER2与胃高、中分化腺癌的发生有密切关系，同时HER2表达患者的无病生存期和总生存期较短［12］，容易出现远处转移，提示预后不佳［12～14］。因此，HER2基因扩增或过表达可能成为胃癌的一个重要预后预测指标。

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