张敏 聂春
摘要:为满足野生药用石斛人工栽培的需求,以金钗石斛种子为试材,从诱导培养基的选择、材料的消毒、无菌播种、培养条件及炼苗训化管理等方面总结了石斛人工育苗的关键技术。
关键词:金钗石斛;种子;人工育苗
中图分类号:S315文献标识码:B文章编号:1674—9944(2014)09—0104—01
1引言
石斛为兰科石斛属(Dendrobium Sw.)多年生草本植物,其药用历史悠久,《本草纲目》中将其列为上品,是我国久享盛名的名贵常用中药,具有药用和保健作用。我国约有63种石斛属植物,目前供作药用的石斛属植物有39种。著名的有黄草石斛、金钗石斛、铁皮石斛、霍山石斛等。石斛属植物为附生植物,生长环境独特,对小气候要求十分严格。开花多,结实少,种子细如粉尘,由于缺乏胚乳,自然条件下发芽率不及5%。自然条件下的分株繁殖力也十分低下。药用石斛多采自野生,但由于其繁殖力低下,加上长期的过度采伐利用,野生石斛已濒临灭绝。笔者以金钗石斛种子为试材,进行了种子无菌播种育苗技术的试验,探索出了一套较快捷的人工育苗技术。现将试验的关键技术总结如下。
2选择适宜的诱导培养基
由于石斛种子缺乏胚乳,营养物质缺乏,因此在自然条件下萌芽率很低。在人工条件下诱导其萌发生长,必须补充充足的营养以满足其萌发生长的需要。石斛种子的萌发以选择MS培养基为基本营养,添加蔗糖30g/L,琼脂6g/L,pH值为5.6的固体培养基较适合。
3材料的消毒及无菌播种
石斛种子以果皮绿黄色未开裂时采收最为适宜。将蒴果用0.1%洗涤液水浸泡5min,用软毛刷刷洗干净表皮,自来水冲洗10min,净化工作台上用75%酒精消毒1min,0.1%HgCl2消毒10min,无菌水冲洗4~5次,用无菌滤纸吸干水分。手术刀剖开蒴果后,用镊子将粉尘状的种子刮下均匀洒播在MS培养基上。
4培养条件管理
接种好的种子放入温度25℃暗培养室中培养20d,之后移入到光照12h/d、光照强度2000lx条件下培养。培养期间保持培养室内空气湿度70%~80%,温度稳定在25℃,室内定期用紫外灯照射杀菌。60d后种子萌芽成肉眼可见的小绿点,90d后可形成直径1mm大小的原球茎,150d后可长成长3~4cm高,具有2~4片叶,3~4条根的小苗。
5炼苗驯化管理
炼苗驯化是石斛种苗从实验室走向生产的关键环节,必须有较高的炼苗成活率,才能保证实验室大规模培养的石斛种苗应用于生产。
5.1选择适宜的炼苗基质
石斛的炼苗基质以保湿性、透气性较好的锯末或锯末加椰茸(1∶1)较适宜,锯末应先淘洗去掉粉末状的部分,与椰茸按1∶1比例混合均匀,消毒后使用。如果基质的量少,可用高压锅灭菌消毒;基质较多则用500倍福尔马林喷雾闷堆,1周后再散开敞气,2周后备用。
5.2搭建荫棚
石斛炼苗初期以散射光照为宜,且对空气湿度要求也较高,因此应选择地势平坦,半荫半阳处搭建1.5m高遮阳网荫棚,内设薄膜小拱棚保湿。
5.3瓶苗移栽
先将瓶苗移出培养室,放入室外荫凉处自然光下培养15d,再打开瓶盖,用镊子小心取出小苗,以自来水清洗干净基部琼脂。1~2h后,将小苗分成2~3株一丛栽入基质中。移栽好的小苗要浇透水分,盖上薄膜,保持棚内空气湿度85%以上,温度25~27℃,搭上荫棚,保持50%透光度。
5.4炼苗期间管理
炼苗期间要注意观察棚内的温度、湿度变化,温度不要超过30℃或低于20℃,湿度保持在85%,前期尽量少浇水,经过二周长出新根后去掉薄膜,即可浇水同时浇灌1/2MS大量营养液,约1个月后,下部长出2~3条新根,上部长出新叶即可进入大田常规化栽培管理。
参考文献:
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2000.
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