李得瑞,罗映虹,周冀衡,张一扬,陆 坤,卢 鑫
(1. 湖南农业大学烟草研究院,湖南 长沙410128;2. 文山州烟草公司砚山县分公司,云南 文山州663100)
烟草是中国的一种重要经济作物[1],而施肥是烟草栽培中的一项重要的技术。在目前的栽培技术中,施肥技术对烤烟的影响最大,其中氮是影响烟叶品质的主要元素,直接关系到烤烟的产量和质量[2-5]。烤烟是喜硝态氮的植物,国外的烤烟生产中一般提倡使用无机氮肥,并且要求硝态氮的比例超过50%[6]。国内研究也表明,烤烟的产量和品质随硝态氮使用比例的增加而增加[7-8]。左天觉[6]报道,施用硝态氮比施用铵态氮能获得更加高产、优质的烤烟。但也有研究认为,与硝态氮相比,有机氮和铵态氮是更好的氮源[9],随着铵态氮比例的增加,烤烟产量、产值和含糖量都有所增加[10],总氮、生物碱、有机酸和酚类物质含量减少[11]。李贵生等[12]认为,铵态氮有利于增加氨基酸含量,但这一作用在100%供应铵态氮时反而下降。朱祝军等[13]研究认为强光照时,硝态氮处理的叶绿素含量要显著高于铵态氮处理,弱光照下则相反。不同的研究结果得出的结论有一些矛盾之处,试验研究施用不同氮肥形态,考察烤烟前期的主要生理指标的变化和钾肥的利用率,以期为生产上提高烟叶品质,特别是上部叶钾含量提供理论支持。
用深21.2 cm、内径14.7 cm、容积约为3.5 L 的圆柱形陶瓷桶盛放营养液。以Hoagland 全素营养液为基础改进营养液,各元素质量浓度为(mg/L):N 100 mg/L,P 50 mg/L,K 200 mg/L,Ca 150 mg/L,Mg 40 mg/L,Fe 5 mg/L,Mn 0.5 mg/L,Cu 0.02 mg/L,Zn 0.05 mg/L,Mo 0.05 mg/L,B 0.5 mg/L,Cl 0.27 mg/L。供试烤烟品种为云87,经搓种后浸种24 h,露白的种子转入经15%次氯酸钠溶液消毒并已填充基质的育苗盘中,上覆少许基质,采用漂浮育苗技术育苗。选取健壮的6~7 叶龄的烤烟幼苗进行移栽,团棵期以前(移栽后30 d 左右)每7 d 更换一次营养液,每隔2 d 用稀硫酸或稀氢氧化钠溶液调节pH值到6.5;团棵期后每5 d 更换一次营养液,每隔1 d 调节一次pH 值,全生育期每天用空气泵通气约1 h。团棵前全部采用氮素质量浓度为100 mg/L 的营养液配方,硝铵比为7∶3;团棵后选取长势基本一致的健壮烟株,设5个处理,采用硝铵比分别为T1(2∶8)、T2(3.5∶6.5)、T3(5∶5)、T4(6.5∶3.5)、T5(8∶2)的营养液继续进行水培,3 次重复。除氮以外的其他元素质量浓度及栽培管理措施同团棵前。试验在温室大棚进行,烟草生长期温度和光照与自然条件一致。
于团棵期处理后的第7、14、21、28、35 天取一个鲜烟叶测叶绿素、硝酸还原酶、根系活力;另取一个样杀青测钾。根系活力采用TTC 浸提比色法测定[14]。叶绿素含量的测定:取新鲜烟株叶片,洗净去掉中脉。然后称取0.1 g 样品,用丙酮与无水酒精1∶1 混合溶液浸泡,定容至10 mL,置于无光恒温30℃条件下,直至叶片变白。用721 分光光度计分别测定645、663 nm 处的吸光值,以混合液为空白对照[14]。硝酸还原酶活性的测定采用活体法,最后用分光光度计测定520 nm 处吸光值,具体方法参照文献[15]。全钾采用火焰光度计测定。
采用Microsoft Excel 2010 和SPSS 20.0 软件统计分析。
通过对处理后各时期的叶绿素的检测发现(表1),随着硝态氮比例的增大,试验前期(7 d 内)高硝比例的处理(80%)叶绿素a 低于其他处理,叶绿素b 含量差异不显著;试验中期(14~21 d),各处理间叶绿素a 差异不显著,但随硝铵比增加,叶绿素b 的含量先增加后降低;试验后期(35 d),随硝铵比增加,叶绿素a 和叶绿素b 的含量都先增加后降低,其中硝铵比为6.5:3.5 处理的叶绿素a 和叶绿素b 的含量均最高。
表1 氮肥形态对不同时期烟叶叶绿素含量的影响 (mg/g)
对各个时期鲜烟叶的硝酸还原酶(NR)活性检测发现(表2),试验前期硝酸还原酶活性差异不显著,但中后期差异逐渐增大,以T3(硝铵比5∶5)和T4(硝铵比6.5∶3.5)处理的硝酸还原酶活性最高,35 d 时,T5(硝铵比8∶2)的硝酸还原酶活性显著高于T1(硝铵比2∶8)。
表2 氮肥形态对不同时期烟叶硝酸还原酶活性的影响
对各个时期鲜根系的根系活力进行检测(表3),发现各个时期的根系活力均以T3(硝铵比5∶5)和T4(硝铵比6.5∶3.5)处理的较高,高铵处理(T1,硝铵比2:8)和高硝处理(T5,硝铵比8∶2)都会导致根系活力的下降,但高硝处理(T5)根系活力要高于高铵处理(T1);硝铵比为5∶5 的T3 处理根系活力与硝铵比为6.5∶3.5 的T4处理在7~28 d 期间差异不显著,35 d 时T4 处理的根系活力显著高于T3 处理的。
表3 氮肥形态对不同时期烤烟根系活力(TTF)的影响[μg/(g·h)]
对各个时期杀青样的钾含量测定后发现(表4),低硝态氮比例的处理(硝铵比2∶8)钾含量始终低于其他处理,其他4个处理间差异不显著。可以发现,除T1 外,其他几个处理都能达到提钾的效果。
表4 氮肥形态对不同时期烟叶钾含量的影响 (%)
对各个时期杀青样的氯含量检测发现(表5),7 d 时各处理间差异不显著,14 d、21 d 时T3、T4 处理的氯含量显著低于T1 处理,28 d 时T4、T5 处理的氯含量显著低于T1、T2 处理;35 d 时T4 处理氯含量显著低于其他各个处理。
表5 各时期氯含量 (%)
对烟叶叶绿素含量的分析发现,随着硝铵比增高,叶绿色a 和叶绿素b 含量在7~14 d 期间各处理没有显著差异,但在第21 天时,叶绿素b 呈现上升趋势,叶绿素a 各处理差异不显著,在28~35 d 期间,叶绿素a 和叶绿素b 呈先上升,后下降的趋势,说明硝态氮比例高的处理叶绿素含量高于铵态氮比例高的处理,这与朱祝军等[13]的研究部分相似,即强光的时候,硝态氮处理的叶绿素含量要显著高于铵态氮处理,可能是试验所处的环境光照较强的缘故。对硝酸还原酶的分析发现,硝酸还原酶变化趋势与叶绿素含量相同,说明硝铵比越高,氮代谢和碳代谢同时增强,但铵态氮减少,反而对烟株生长不利,这与李贵生等[12]的研究相似,即铵态氮对烟草生长有利,烟草生长不能缺少铵态氮。同样,根系活力与叶绿素、硝酸还原酶变化趋势相同。这几项指标越高,烟株的吸收氮代谢、碳代谢能力越强,吸收水分及矿质营养元素能力越强。
钾素是烤烟的品质元素,对烤烟的燃烧性、安全性有着至关重要的影响。对杀青后烟叶中的钾以及氯的检测发现,钾的变化趋势与叶绿素、硝酸还原酶、根系活力的变化趋势相同,与氯含量的变化相反,可能是由于矿质离子所带电荷的原因造成的,硝酸根离子吸收的越多,带相同电荷的氯离子吸收受到抑制,而促进钾离子的吸收。
烟草喜硝态氮而不喜铵态氮,但铵态氮又是烟草生长必需的氮肥,硝铵比在6.5∶3.5 时能促进烟叶的碳氮代谢,提高烟叶产量;促进钾素的吸收,控制氯的含量,能够提高烟叶质量,这可为中国烟叶钾含量普遍偏低的问题提供一种解决思路。
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