荧光光谱法测定奋乃静

王 虹 王 军 唐佩佩

奋乃静（Perphenazine）为吩噻嗪类的哌嗪衍生物，广泛用于精神分裂症或其他精神病性障碍、以及呕吐、严重焦虑等症状。在急性中毒案件中，常涉及到对奋乃静的快速检验。目前测定奋乃静的常用方法主要有高效液相色谱法①周建玉、唐素芳：《HPLC法测定奋乃静及奋乃静片有关物质方法的建立》，《中国药物应用与监测》2010年第7期。、紫外-可见分光光度法②国家药典委员会：《中华人民共和国药典(二部)》，化学工业出版社2005年版，第328-329页。、流动注射分光光度法③吕辉雄等：《奋乃静的流动注射分光光度分析》，《分析实验室》2003年第3期。、流动注射化学发光法④弋景峰等：《奋乃静药物的流动注射化学发光测定方法的建立》，《西安交通大学学报》2006年第5期。、荷移分光光度法⑤于丽丽、盛喆、李华侃：《基于氯冉酸的荷移反应分光光度法测定奋乃静》，《理化检验》2011年第47期。、毛细管电泳-安培检测法⑥张兰、何聿、倪碧莲等：《乃静和氟奋乃静的毛细管电泳柱端喷壁式安培检测》，《分析化学》2005年第3期。、荧光分光光度法⑦李美芳、邱颖、李玉兰：《荧光分光光度法测定奋乃静片的含量》，《中国药业》2008年第23期。等。本文探讨了盐酸-乙醇溶液作为提取剂的提取工艺、优化了荧光光谱法测定奋乃静的试验条件，提高了分析灵敏度、降低了检出限，可用于药物奋乃静片剂的痕量检测。

一、试验部分

（一）仪器与试剂

Cary Eclipse型荧光分光光度计；JL-120型超声波清洗器；HH-2型数显恒温水浴锅。

奋乃静对照品（中国药品生物制品检定所）；

奋乃静片剂：上海朝晖药业有限公司（产品批号1206F07）、江苏黄河药业股份有限公司（产品批号 20050818）；

盐酸为优级纯，其余试剂均为分析纯，试验用水为去离子水。

盐酸-乙醇溶液：取95%乙醇500mL，加盐酸10mL，加去离子水至1000mL，摇匀，即得盐酸-乙醇溶液。

奋乃静对照品储备溶液：称取奋乃静对照品0.0084g，置于50mL小烧杯，加10mL盐酸-乙醇溶液溶解，移入100mL棕色容量瓶中，用盐酸-乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，配成84mg•L-1对照品储备液，于4℃冰箱放置，备用。

（二）仪器工作条件

激发波长（λex）为270nm,发射波长（λem）为375nm；激发和发射狭缝均为10nm；激发单色器滤光片波长范围为250-295nm，发射单色器滤光片波长范围为250-395nm；PMT为600V，测试温度为室温。

（三）试验方法

取奋乃静片10粒（标示量2mg／粒），除去糖衣，研细，混匀。准确称取试样细粉适量于小烧杯中，加盐酸-乙醇溶液10mL，超声溶解，过滤，将滤渣用20mL盐酸-乙醇溶液分4次提取，所得滤液置水浴锅上挥至剩余 15mL，冷却，转移到 50mL的棕色容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。使用时移取2.5mL于50mL的棕色容量瓶中用水定容，摇匀，得到样品溶液，同时做空白试验。

二、结果与讨论

（一）波长的选择

取奋乃静质量浓度为25.2mg•L-1的对照品溶液，分别进行激发光谱和发射光谱扫描。试验结果表明：最大激发波长（λex）为270nm，最大发射波长（λem）为375nm。

为提高检测灵敏度，优化了仪器测试条件，将仪器激发单色器滤光片波长范围设为250-295nm，发射单色器滤光片波长范围设为250-395nm。

（二）溶剂的选择

奋乃静在水中几乎不溶，在乙醇、稀盐酸中溶解，试验比较了盐酸-乙醇溶液、0.1mol/L盐酸溶液、95%乙醇溶液作为溶剂的提取效果。结果表明：选择盐酸-乙醇溶液作为溶剂提取效果最好，95%乙醇溶液次之，试验选用盐酸-乙醇溶液作为溶剂。

（三）提取方式的选择

试验考察了采取水浴处理试样和不采用水浴处理试样两种提取方式对测试结果的影响，分别称取批号1206F07和20050818奋乃静试样适量（相当于2mg奋乃静），按试验方法测试，结果见表1。由表1可见，采用水浴挥发乙醇所测样品的测定结果明显高于不挥发乙醇的测定结果，可能因为在紫外激发波长下，一定浓度的乙醇对奋乃静产生荧光猝灭影响①②刘莹等：《253.7nm光辐照乙醇溶液荧光光谱分析》，《南京理工大学学报》2003年第6期。，为减少乙醇溶剂对测试结果的影响，试验选择水浴处理试样。

（表1两种提取方式的比较(n=5)）

（四）干扰试验

按试验方法，对0.10mg·L-1奋乃静对照品溶液进行干扰试验，当相对误差小于±5.0%时，下列离子和物质不干扰测定：100倍的Pb2+、Ni2+、Ca2+、Cd2+、Ba2+，200倍的Al3+、Fe3+、Zn2+、Mg2+、Na+、K+，400倍的蔗糖、可溶性淀粉。

（五）工作曲线和检出限

分别移取0.00mL，0.05mL，0.10mL，0.25mL，0.50mL，1.00mL，2.00mL奋乃静对照品贮备液置于50mL容量瓶中，加水定容到刻度，摇匀，得到奋乃静对照品系列溶液，在选定的仪器工作条件下，对奋乃静对照品溶液系列进行测定，绘制标准曲线，奋乃静质量浓度在0.084～3.36 mg·L-1范围内与荧光强度呈线性关系，其线性回归方程为y=209.69x+11.27，相关系数为0.9989。对空白溶液平行测定11次，检出限3s/k（其中s为11次空白的标准偏差，k为线性回归方程的斜率）计算为0.6μg·L-1。

（六）稳定性试验

按试验方法，分别对奋乃静对照品溶液、奋乃静试样溶液进行测定，结果表明：在室温下避光放置24小时以上，其荧光强度相对稳定，说明该体系具有较好的稳定性。

（七）2.7方法的精密度

称取批号20050818奋乃静试样5份，按试验方法进行测定，测得试样中奋乃静含量的平均值为1.40mg•L-1，相对标准偏差为1.9%。

（八）样品分析

分别称取批号1206F07和20050818奋乃静试样适量（相当于1mg奋乃静），按试验方法进行测定，同时进行加标回收试验，结果见表2。

（表2样品分析结果（n=5））

试验结果表明：本方法操作简便、灵敏度高、检出限低、分析结果准确，可用于奋乃静的药物检测。