球孢白僵菌对韭蛆的室内生物测定和田间效果评价

周仙红　马韬　庄乾营等

摘要：研究了市售150亿孢子/g球孢白僵菌颗粒剂对韭蛆的室内和田间防治效果。室内生测结果表明，随着白僵菌孢子浓度的增大，韭蛆的累计校正死亡率逐渐升高，LT50逐渐减小，1×109个/mL浓度处理累计校正死亡率可达81%。田间药效结果显示，666.7m2用300 g球孢白僵菌颗粒剂防治效果显著优于毒死蜱，其药后7 d防治效果为81.15%；药后21 d虫口减退率为74.47%，防虫效果为85.19%，同时对韭菜的保苗效果为79.37%，与清水对照组的保苗效果一致。

关键词：球孢白僵菌；韭蛆；生物防治；防治效果

中图分类号：S476文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）07-0117-04

AbstractThe control effects of Beauveria bassiana（granules at the concentration of 15 billion spores per gram） against Bradysia odoriphaga were studied both by indoor bioassay and field trial. The indoor bioassay results showed that the cumulative corrected mortality of Bradysia odoriphaga increased gradually and the LT50 decreased with the increase of Beauveria bassiana spore concentration. At the concentration of 1×109 spores per milliliter， the cumulative corrected mortality was 81%. The field trial results showed that the control effect of Beauveria bassiana with the dosage of 300 g granules per 666.7m2 was significantly superior to chlorpyifos. The control effect was 81.15% after applying for 7 days.The population decline rate and the insecticidal effect were 74.47% and 85.19% respectively after applying for 21 days. Meanwhile， the protected seedling rate of Chinese chive was 79.37%， which was similar to that of fresh water group.

Key wordsBeauveria bassiana； Bradysia odoriphaga； Biological control； Control effect

韭菜迟眼蕈蚊（Bradysia odoriphaga）幼虫俗称韭蛆，是韭菜等百合科蔬菜的首要害虫，在我国发生普遍，发生面积达90%。韭蛆世代重叠严重，种群增长迅速，生活在地下，成虫能飞，难以防治。

目前生产上以化学防治为主[1，2]，农民见虫喷药，且盲目加大药量，不少菜农甚至使用甲基对硫磷（1605）、甲拌磷（3911）等禁用的高毒农药。由于长期单一使用化学农药灌根防治，使该虫产生抗药性更加难防，过度施药导致韭菜农药残留超标严重，“毒韭菜”常常造成人畜中毒和环境污染的恶果，已引起全社会的高度关注。化学防治不仅污染环境，与人们要求绿色环保的愿望背道而驰，同时还使害虫天敌的种群和数量大为减少，最终致使地下害虫的危害日趋严重。目前正在加强对低毒、高效的化学农药的筛选[1，2]。但由于韭蛆生活在地下，单纯的化学防治往往不能有效地控制韭蛆的危害，迫切需要加强生物防治技术研究。

球孢白僵菌（Beauveria bassiana）是一种具有杀虫潜力的微生物，具有高选择性、绿色环保、安全可靠的特点，可有效保护害虫天敌，从而整体提高田间防治效果。其杀虫机理独特，不产生抗药性；可反复侵染，长期持效，特别是韭蛆生长的土壤环境提供了适宜球孢白僵菌生长与繁殖的环境，从根本上解决了多年来化学农药，特别是有机磷农药带来的农药残留和食品安全问题。目前，在用白僵菌防治地下害虫的研究中，报道较多的是对蛴螬的防治，土壤中施用球孢白僵菌，可连续三年防治外来金龟子（Hoplochelus manginalis）[3]。但是对韭蛆的生防真菌的报道不多，因此本试验测定了球孢白僵菌对韭蛆的室内毒力，同时测定了田间药效，为生防真菌应用于韭菜生产提供数据支持。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1试验药剂江西天人生态股份有限公司生产的150亿孢子/g球孢白僵菌颗粒剂。

1.1.2供试虫源试虫选自实验室用韭菜连续饲养多代的韭蛆3龄幼虫。实验室饲养条件为：T=（25±2）℃，RH=75%，L∶D=16∶8。

1.1.3试验地与种植试验选在莱芜市莱城区高庄街道办事处曹家庄村菜园内。地势平坦，肥水管理水平较好。韭菜品种为独根红。定植日期为2009年5月，种植密度为株距20 cm，行距20 cm，施药时韭菜叶片最高为18 cm。

1.2试验方法

1.2.1室内生物测定试验共设1×109、 1×108、 1×107、 1×106、1×105、 1×104个/mL 6个孢子浓度梯度的药剂处理，设置清水为空白对照。每处理30头试虫，重复3次。试验采用点滴法[4]，药后每隔3 d观察记录死亡虫数。

1.2.2田间药效试验 ①试验方法：设置3个剂量（666.7m2用量300、250、200 g），每个剂量设4个小区，每个小区面积25 m2。采用对沙均匀撒施的办法，每小区1 kg。对照药剂5%毒死蜱颗粒剂用量30 kg/hm2，设清水对照，试验期间未使用其它农药。分别统计药后3、7、14、21 d的防治效果，以药后21 d的效果计算虫口减退率、防虫效果和保苗效果。

②保苗效果调查：施药前初见被害植株时，每小区选中心区域2行各10穴（墩），每4穴作为1个单元，拔掉被害株（以叶尖黄、软、倒伏为标准）后每穴标记健株10株作为药前健苗基数；药后每次调查后即将被害株拔除，只保留健苗作为下一次的调查韭苗数，依次类推。

③防虫效果调查：在小区中心区域刨出5穴（墩）韭菜，每点挖苗20株，共计100株，统计韭菜鳞茎内外活蛆（蛹）数。

3结论与讨论

近十年来，传统化学防治韭蛆导致韭菜中毒事件频发，随着单一药剂以及高浓度大剂量药剂的使用，韭蛆逐渐产生抗药性[5]。除了化学防治技术，各个部门也加强了对韭蛆农业预防手段和物理防治技术的研发，如灯光诱杀[6]、地下滴灌[7]等，这些手段对韭蛆的防治起到一定的作用，但是不能完全控制韭蛆危害。因此，对韭蛆防治技术的研究逐步转向高效低毒植物生长调节剂、生物农药以及生物防治技术上[1，2]。新型生物农药以及植物源杀虫剂的开发逐渐引起人们的重视，郑方强[8]，王萍[9]，陈栋[10]、余向阳[11]、慕卫[12]、孙瑞红[13，14]等对生物农药、植物源杀虫剂、昆虫生长调节剂、植物次生代谢物质以及病原线虫对韭蛆的防治效果进行了研究。

韭蛆的地下为害性加大了其防治难度，白僵菌对花生蛴螬等地下害虫的防治有着比较不错的效果[15～18]。本试验结果显示，球孢白僵菌对韭蛆具有较强的毒力。室内生测结果表明，球孢白僵菌对韭蛆的累计校正死亡率最高可达81%，高于陈正州、宋龙腾等测定的白僵菌对花生蛴螬的田间药效（73.8%）和累计校正死亡率（59.7%）。鉴于其防治韭蛆的效果优于防治花生蛴螬，因此推广白僵菌用于田间防治韭蛆。本试验测定的白僵菌对韭蛆的田间防效明显高于毒死蜱。在666.7m2用量300 g的情况下，白僵菌的毒力明显高于毒死蜱。从保苗效果来看，白僵菌对韭菜的安全生产无副作用，其保苗效果与清水对照组等同。因此，通过室内生测和田间防效试验，推荐在田间使用白僵菌防治韭蛆。

参考文献：

[1]梅增霞，吴青君，张友军. 花蕾韭菜迟眼蕈蚊的生物学、生态学及其防治[J].昆虫知识，2003，40（5）：396-398.

[2]张思佳，许艳丽，潘凤娟. 韭菜迟眼蕈蚊研究进展[J]. 安徽农学通报，2013，19（1/2）：82-84.

[3]Callot G， Vercambre B. Hyphasmata and conidial pellets： an original morphological aspect of soil colonization by Beauveria brongiartii[J]. Journal of Invertebrate Pathology，1996，68（2）：173-176.

[4]农业部.NY/T 1154.1—2006 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第1部分：触杀活性试验点滴法[S].2006.

[5]高占林，党志红，潘文亮，等. 河北省不同地区韭蛆（韭菜迟眼蕈蚊）对杀虫剂的敏感性[J]. 农药学学报， 2000， 2（4）： 88-90.

[6]郑建秋，师迎春，张芸，等. 灯光诱杀防治韭菜迟眼蕈蚊（韭蛆）[J]. 中国蔬菜， 2005（12）：60.

[7]尹怀富，王秀峰. 地下滴灌对韭蛆发生和韭菜产量的影响[J]. 山东农业科学，2006（1）：54-56.

[8]郑方强，刘忠德，裴翠花.无公害杀虫剂防治韭蛆的药效试验及苦参碱杀虫作用的研究[J].农药，2002，41（6）：26-28.

[9]王萍，秦玉川，朱栋，等.生物农药对韭菜迟眼蕈蚊的毒杀作用及田间药效[J].中国植保导刊，2011，31（5）：40-42.

[10]陈栋，张思聪，张龙. 昆虫生长调节剂和生物农药防治[J]. 植物保护，2005，31（1），82-84.

[11]余向阳，高蓉，廖海丰，等. 植物次生代谢物质对韭蛆的毒力筛选[J].江苏农业学报，2003，19（4）：228-232.

[13]慕卫，丁中，何茂华，等. 韭菜迟眼蕈蚊的生测方法及防治药剂研究[J]. 华北农学报，2002，17（S1）：12-16.

[14]孙瑞红，李爱华. 昆虫病原线虫Heterorhabditis indica LN2品系防治韭菜迟眼蕈蚊的影响因素研究[J].昆虫天敌，2004，26（4）：150-155.

[15]孙瑞红，李爱华.昆虫病原线虫H06与化学杀虫剂对韭菜迟眼蕈蚊的联合作用[J].农药学报，2007，9（1）：66-70.

[16]陈正州，薛兆银，周靖，等.球孢白僵菌防治花生田蛴螬药效试验研究[J]. 现代农业科技，2011（4），144，146.

[17]宋龙腾，于洪春，王雨薇，等.卵孢白僵菌与农药混用对蛴螬防治效果研究[J].北方园艺，2013（1）：131-134.

[18]郭书伟，魏新田，魏修山. 白僵菌的施药技术改进及对地下害虫的防治研究[J].北京农业，2007（7）：28-29.

[19]孙明海，孔德生，惠祥海，等. 白僵菌20亿/克粉剂防治花生蛴螬田间药效试验[J]. 农药科学与管理，2009，30（12）：49-50.

1.2.2田间药效试验 ①试验方法：设置3个剂量（666.7m2用量300、250、200 g），每个剂量设4个小区，每个小区面积25 m2。采用对沙均匀撒施的办法，每小区1 kg。对照药剂5%毒死蜱颗粒剂用量30 kg/hm2，设清水对照，试验期间未使用其它农药。分别统计药后3、7、14、21 d的防治效果，以药后21 d的效果计算虫口减退率、防虫效果和保苗效果。

②保苗效果调查：施药前初见被害植株时，每小区选中心区域2行各10穴（墩），每4穴作为1个单元，拔掉被害株（以叶尖黄、软、倒伏为标准）后每穴标记健株10株作为药前健苗基数；药后每次调查后即将被害株拔除，只保留健苗作为下一次的调查韭苗数，依次类推。

③防虫效果调查：在小区中心区域刨出5穴（墩）韭菜，每点挖苗20株，共计100株，统计韭菜鳞茎内外活蛆（蛹）数。

3结论与讨论

近十年来，传统化学防治韭蛆导致韭菜中毒事件频发，随着单一药剂以及高浓度大剂量药剂的使用，韭蛆逐渐产生抗药性[5]。除了化学防治技术，各个部门也加强了对韭蛆农业预防手段和物理防治技术的研发，如灯光诱杀[6]、地下滴灌[7]等，这些手段对韭蛆的防治起到一定的作用，但是不能完全控制韭蛆危害。因此，对韭蛆防治技术的研究逐步转向高效低毒植物生长调节剂、生物农药以及生物防治技术上[1，2]。新型生物农药以及植物源杀虫剂的开发逐渐引起人们的重视，郑方强[8]，王萍[9]，陈栋[10]、余向阳[11]、慕卫[12]、孙瑞红[13，14]等对生物农药、植物源杀虫剂、昆虫生长调节剂、植物次生代谢物质以及病原线虫对韭蛆的防治效果进行了研究。

韭蛆的地下为害性加大了其防治难度，白僵菌对花生蛴螬等地下害虫的防治有着比较不错的效果[15～18]。本试验结果显示，球孢白僵菌对韭蛆具有较强的毒力。室内生测结果表明，球孢白僵菌对韭蛆的累计校正死亡率最高可达81%，高于陈正州、宋龙腾等测定的白僵菌对花生蛴螬的田间药效（73.8%）和累计校正死亡率（59.7%）。鉴于其防治韭蛆的效果优于防治花生蛴螬，因此推广白僵菌用于田间防治韭蛆。本试验测定的白僵菌对韭蛆的田间防效明显高于毒死蜱。在666.7m2用量300 g的情况下，白僵菌的毒力明显高于毒死蜱。从保苗效果来看，白僵菌对韭菜的安全生产无副作用，其保苗效果与清水对照组等同。因此，通过室内生测和田间防效试验，推荐在田间使用白僵菌防治韭蛆。

参考文献：

[1]梅增霞，吴青君，张友军. 花蕾韭菜迟眼蕈蚊的生物学、生态学及其防治[J].昆虫知识，2003，40（5）：396-398.

[2]张思佳，许艳丽，潘凤娟. 韭菜迟眼蕈蚊研究进展[J]. 安徽农学通报，2013，19（1/2）：82-84.

[3]Callot G， Vercambre B. Hyphasmata and conidial pellets： an original morphological aspect of soil colonization by Beauveria brongiartii[J]. Journal of Invertebrate Pathology，1996，68（2）：173-176.

[4]农业部.NY/T 1154.1—2006 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第1部分：触杀活性试验点滴法[S].2006.

[5]高占林，党志红，潘文亮，等. 河北省不同地区韭蛆（韭菜迟眼蕈蚊）对杀虫剂的敏感性[J]. 农药学学报， 2000， 2（4）： 88-90.

[6]郑建秋，师迎春，张芸，等. 灯光诱杀防治韭菜迟眼蕈蚊（韭蛆）[J]. 中国蔬菜， 2005（12）：60.

[7]尹怀富，王秀峰. 地下滴灌对韭蛆发生和韭菜产量的影响[J]. 山东农业科学，2006（1）：54-56.

[8]郑方强，刘忠德，裴翠花.无公害杀虫剂防治韭蛆的药效试验及苦参碱杀虫作用的研究[J].农药，2002，41（6）：26-28.

[9]王萍，秦玉川，朱栋，等.生物农药对韭菜迟眼蕈蚊的毒杀作用及田间药效[J].中国植保导刊，2011，31（5）：40-42.

[10]陈栋，张思聪，张龙. 昆虫生长调节剂和生物农药防治[J]. 植物保护，2005，31（1），82-84.

[11]余向阳，高蓉，廖海丰，等. 植物次生代谢物质对韭蛆的毒力筛选[J].江苏农业学报，2003，19（4）：228-232.

[13]慕卫，丁中，何茂华，等. 韭菜迟眼蕈蚊的生测方法及防治药剂研究[J]. 华北农学报，2002，17（S1）：12-16.

[14]孙瑞红，李爱华. 昆虫病原线虫Heterorhabditis indica LN2品系防治韭菜迟眼蕈蚊的影响因素研究[J].昆虫天敌，2004，26（4）：150-155.

[15]孙瑞红，李爱华.昆虫病原线虫H06与化学杀虫剂对韭菜迟眼蕈蚊的联合作用[J].农药学报，2007，9（1）：66-70.

[16]陈正州，薛兆银，周靖，等.球孢白僵菌防治花生田蛴螬药效试验研究[J]. 现代农业科技，2011（4），144，146.

[17]宋龙腾，于洪春，王雨薇，等.卵孢白僵菌与农药混用对蛴螬防治效果研究[J].北方园艺，2013（1）：131-134.

[18]郭书伟，魏新田，魏修山. 白僵菌的施药技术改进及对地下害虫的防治研究[J].北京农业，2007（7）：28-29.

[19]孙明海，孔德生，惠祥海，等. 白僵菌20亿/克粉剂防治花生蛴螬田间药效试验[J]. 农药科学与管理，2009，30（12）：49-50.

1.2.2田间药效试验 ①试验方法：设置3个剂量（666.7m2用量300、250、200 g），每个剂量设4个小区，每个小区面积25 m2。采用对沙均匀撒施的办法，每小区1 kg。对照药剂5%毒死蜱颗粒剂用量30 kg/hm2，设清水对照，试验期间未使用其它农药。分别统计药后3、7、14、21 d的防治效果，以药后21 d的效果计算虫口减退率、防虫效果和保苗效果。

②保苗效果调查：施药前初见被害植株时，每小区选中心区域2行各10穴（墩），每4穴作为1个单元，拔掉被害株（以叶尖黄、软、倒伏为标准）后每穴标记健株10株作为药前健苗基数；药后每次调查后即将被害株拔除，只保留健苗作为下一次的调查韭苗数，依次类推。

③防虫效果调查：在小区中心区域刨出5穴（墩）韭菜，每点挖苗20株，共计100株，统计韭菜鳞茎内外活蛆（蛹）数。

3结论与讨论

近十年来，传统化学防治韭蛆导致韭菜中毒事件频发，随着单一药剂以及高浓度大剂量药剂的使用，韭蛆逐渐产生抗药性[5]。除了化学防治技术，各个部门也加强了对韭蛆农业预防手段和物理防治技术的研发，如灯光诱杀[6]、地下滴灌[7]等，这些手段对韭蛆的防治起到一定的作用，但是不能完全控制韭蛆危害。因此，对韭蛆防治技术的研究逐步转向高效低毒植物生长调节剂、生物农药以及生物防治技术上[1，2]。新型生物农药以及植物源杀虫剂的开发逐渐引起人们的重视，郑方强[8]，王萍[9]，陈栋[10]、余向阳[11]、慕卫[12]、孙瑞红[13，14]等对生物农药、植物源杀虫剂、昆虫生长调节剂、植物次生代谢物质以及病原线虫对韭蛆的防治效果进行了研究。

韭蛆的地下为害性加大了其防治难度，白僵菌对花生蛴螬等地下害虫的防治有着比较不错的效果[15～18]。本试验结果显示，球孢白僵菌对韭蛆具有较强的毒力。室内生测结果表明，球孢白僵菌对韭蛆的累计校正死亡率最高可达81%，高于陈正州、宋龙腾等测定的白僵菌对花生蛴螬的田间药效（73.8%）和累计校正死亡率（59.7%）。鉴于其防治韭蛆的效果优于防治花生蛴螬，因此推广白僵菌用于田间防治韭蛆。本试验测定的白僵菌对韭蛆的田间防效明显高于毒死蜱。在666.7m2用量300 g的情况下，白僵菌的毒力明显高于毒死蜱。从保苗效果来看，白僵菌对韭菜的安全生产无副作用，其保苗效果与清水对照组等同。因此，通过室内生测和田间防效试验，推荐在田间使用白僵菌防治韭蛆。

参考文献：

[1]梅增霞，吴青君，张友军. 花蕾韭菜迟眼蕈蚊的生物学、生态学及其防治[J].昆虫知识，2003，40（5）：396-398.

[2]张思佳，许艳丽，潘凤娟. 韭菜迟眼蕈蚊研究进展[J]. 安徽农学通报，2013，19（1/2）：82-84.

[3]Callot G， Vercambre B. Hyphasmata and conidial pellets： an original morphological aspect of soil colonization by Beauveria brongiartii[J]. Journal of Invertebrate Pathology，1996，68（2）：173-176.

[4]农业部.NY/T 1154.1—2006 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第1部分：触杀活性试验点滴法[S].2006.

[5]高占林，党志红，潘文亮，等. 河北省不同地区韭蛆（韭菜迟眼蕈蚊）对杀虫剂的敏感性[J]. 农药学学报， 2000， 2（4）： 88-90.

[6]郑建秋，师迎春，张芸，等. 灯光诱杀防治韭菜迟眼蕈蚊（韭蛆）[J]. 中国蔬菜， 2005（12）：60.

[7]尹怀富，王秀峰. 地下滴灌对韭蛆发生和韭菜产量的影响[J]. 山东农业科学，2006（1）：54-56.

[8]郑方强，刘忠德，裴翠花.无公害杀虫剂防治韭蛆的药效试验及苦参碱杀虫作用的研究[J].农药，2002，41（6）：26-28.

[9]王萍，秦玉川，朱栋，等.生物农药对韭菜迟眼蕈蚊的毒杀作用及田间药效[J].中国植保导刊，2011，31（5）：40-42.

[10]陈栋，张思聪，张龙. 昆虫生长调节剂和生物农药防治[J]. 植物保护，2005，31（1），82-84.

[11]余向阳，高蓉，廖海丰，等. 植物次生代谢物质对韭蛆的毒力筛选[J].江苏农业学报，2003，19（4）：228-232.

[13]慕卫，丁中，何茂华，等. 韭菜迟眼蕈蚊的生测方法及防治药剂研究[J]. 华北农学报，2002，17（S1）：12-16.

[14]孙瑞红，李爱华. 昆虫病原线虫Heterorhabditis indica LN2品系防治韭菜迟眼蕈蚊的影响因素研究[J].昆虫天敌，2004，26（4）：150-155.

[15]孙瑞红，李爱华.昆虫病原线虫H06与化学杀虫剂对韭菜迟眼蕈蚊的联合作用[J].农药学报，2007，9（1）：66-70.

[16]陈正州，薛兆银，周靖，等.球孢白僵菌防治花生田蛴螬药效试验研究[J]. 现代农业科技，2011（4），144，146.

[17]宋龙腾，于洪春，王雨薇，等.卵孢白僵菌与农药混用对蛴螬防治效果研究[J].北方园艺，2013（1）：131-134.

[18]郭书伟，魏新田，魏修山. 白僵菌的施药技术改进及对地下害虫的防治研究[J].北京农业，2007（7）：28-29.

[19]孙明海，孔德生，惠祥海，等. 白僵菌20亿/克粉剂防治花生蛴螬田间药效试验[J]. 农药科学与管理，2009，30（12）：49-50.