常压蒸制和高压蒸制对酒黄精化学成分的影响研究

王永禄，王丽瑶，朱欣佚，王栋

（1.东南大学医学院，江苏南京210009；2.安徽农业大学生命科学学院，安徽合肥230036；3南京工业大学药学院，江苏南京211816）

常压蒸制和高压蒸制对酒黄精化学成分的影响研究

王永禄1，3，王丽瑶2Δ，朱欣佚1，王栋3

（1.东南大学医学院，江苏南京210009；2.安徽农业大学生命科学学院，安徽合肥230036；3南京工业大学药学院，江苏南京211816）

目的比较常压蒸制和高压蒸制对酒黄精化学成分的影响，为优选酒黄精的简易炮制方法提供参考依据。方法采用高效液相色谱法建立黄精及其炮制品的特征图谱，比较黄精生品以及炮制前后化学成分的变化。结果与黄精生品相比，常压蒸制和高压蒸制酒黄精后，化学成分均发生改变，既有新成分产生，也存在已有成分的消失；常压蒸制与高压蒸制酒黄精品间的化学成分差异明显。结论酒黄精经蒸制后化学成分发生明显变化；高压酒蒸黄精可达到传统蒸制的要求，且节省时间，操作简单。

黄精；常压蒸制；高压蒸制；化学成分；高效液相色谱法

中药黄精为百合科植物黄精（Polygonatum sibircum Red.）、滇黄精（Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.）或多花黄精（Polygonatum cyrtonerna Hua）的干燥根茎，具有补气养阴、健脾、润肺、益肾的功效［1］。现代药理学研究表明，黄精具有抗疲劳、抗氧化及抗抑郁等作用［3-4］。黄精中的化学成分复杂，含有甾体皂苷、三萜皂苷、醌类、木脂素、多糖等多种成分［5-7］。黄精生品可刺激咽喉，导致口舌麻木，故需炮制后入药，以消除其刺激性，同时增强其补脾润肺益肾的作用［2］。黄精的炮制工艺主要以《中国药典》（2010版）收载的酒黄精为主。目前，有研究黄精炮制前后多糖、小分子糖、5-羟甲基糠醛等成分含量的变化以及采用气相色谱法分析其挥发性成分［8-9］，缺乏对其整体化学成分的综合分析研究［10-13］。本研究采用常压及高压蒸制酒黄精，采用HPLC-DAD法对黄精炮制前后化学成分的变化进行比较分析，以期为优选黄精的简易炮制工艺提供科学的参考。

1 材料与方法

1.1 仪器 Agillent 1200型高效液相色谱仪（二极管阵列检测器、四元泵、柱温箱、化学工作站）；Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6mm，5μm）；LDZX-40B I型压力蒸汽灭菌箱（上海申安医疗器械厂）；DHG-9053A型电热鼓风干燥箱（上海精密实验设备有限公司）；KQ3200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；R-210型旋转蒸发仪（瑞士Buchi实验室仪器公司）。

1.2 试剂 乙腈（色谱纯，Merck公司）；水为超纯水，其他试剂均为分析纯，黄酒（绍兴县第三酒厂）。

1.3 方法

1.3.1 样品的采集及炮制加工：黄精药材采于2013年11月安徽黄山，经王丽瑶老师鉴定，安徽农业大学中药资源教研室陈琳琳副教授复核，为百合科植物黄精Polygonatum sibircum Red.的干燥根茎。参考已有文献，对黄精进行常压及高压蒸制的炮制加工［12-13］。

1.3.2 常压蒸制酒黄精：取鲜黄精，除去芦头、须根及泥沙，清蒸1 h，干燥后加黄酒（每100 g加黄酒20 g计），闷润至酒吸尽，然后置蒸锅中蒸制25 h，取出，70℃烘箱内干燥，放凉，切厚片，即得常压酒蒸黄精炮制品。

1.3.3 高压蒸制酒黄精：取鲜黄精，除去芦头、须根及泥沙，清蒸1 h，干燥后加黄酒（每100 g加黄酒20 g计），闷润至酒吸尽，高压（0.15Mpa）蒸制6 h，取出，70℃烘箱内干燥，放凉，切厚片，即得高压酒蒸黄精炮制品。由上述方法制得的2种黄精炮制品从里到外乌黑发亮，质地柔软，无刺激性，糖性浓烈，口感好，符合《中国药典》中对酒蒸黄精的要求。

1.3.4 供试品溶液的制备：取生黄精药材并按“1.3.2”和“1.3.3”项下方法制得的黄精炮制品，粉碎，过40目筛，取上述样品粉末各2 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入70%的乙醇40mL，称定重量，超声提取30min，放冷，再称定重量，用70%的乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，减压回收溶剂，残渣加甲醇使溶解，转移至5 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）过滤，取续滤液作为供试品溶液。

2 结果

2.1 检测波长的选择 分别考察210 nm、245 nm、400 nm黄精样品的HPLC色谱图，其中210 nm色谱图中化合物的信息最为丰富，因此选择210 nm为检测波长。色谱图见图1。

图1 210 nm，245 nm和400 nm处黄精样品的高效液相色谱图Fig.1 HPLC chromatograms of Polygonati Rhizoma under 210 nm（A），245 nm（B）and 400 nm（C）

2.2 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5 μm）；流动相为乙腈-水梯度洗脱：［0～10 min，5%～10%乙腈；10～30min，10%～35%乙腈；30～45min，35%～60%乙腈；45～60min，60%～90%乙腈］；流速：1.0 mL／min；柱温：30℃；进样量：10μL；检测波长：210 nm。

2.3 黄精生品及炮制品的HPLC比较 按“2.2”项下色谱条件，分别得到黄精生品及常压蒸制酒黄精、高压蒸制酒黄精的HPLC图谱，见图2。

图2 黄精生品（A）、常压蒸制酒黄精（B）及高压蒸制酒黄精（C）的HPLC色谱叠加图Fig.2 HPLC chromatograms of raw Polygonati Rhizoma（A），normal pressure steaming Polygonati Rhizoma with rice wine（B）and high pressure steaming Polygonati Rhizoma with rice wine（C）

比较黄精炮制前后的HPLC图谱，常压蒸制酒黄精与高压蒸制酒黄精的HPLC图谱总体差异较大，而生黄精与高压蒸制酒黄精的HPLC图谱变化明显。由图2可见，黄精常压及高压酒蒸炮制品的HPLC图谱中保留时间为15.95min、18.82min、48.56min及49.45min相对应的色谱峰在生黄精HPLC图谱中缺失。而生黄精HPLC图谱中保留时间为23.23 min、25.32min及32.74 min的色谱峰在炮制品图谱中缺失。

表1 黄精生品、常压蒸制酒黄精、高压蒸制酒黄精变化明显峰的峰面积Tab.1 The peak areas of obviously changed of raw Polygonati Rhizoma，normal pressure and high pressure steaming Polygonati Rhizoma with rice wine

比较黄精炮制前后主要色谱峰峰面积的变化，常压蒸制酒黄精与高压蒸制酒黄精的HPLC色谱峰的峰面积差异较大，而生品黄精与高压蒸制酒黄精的HPLC主要色谱峰的峰面积变化明显。与生品黄精HPLC图谱中保留时间为7.05、9.72、12.06和26.85min的色谱峰峰面积比较，相应保留时间的炮制品色谱峰峰面积有大幅度的增加，说明黄精经炮制后这些化合物的含量有所增加。

3 讨论

研究通过建立高效液相色谱法综合分析黄精中的化学成分变化，比较研究生黄精及酒蒸炮制品化学成分的差异，我们发现黄精经酒蒸炮制后化学成分的组成有所变化，既有新的成分产生，也存在已有成分的消失，同时各化学成分的含量也发生了改变，这为黄精经炮制后副作用降低而疗效增加与这些化学成分的变化有关提供可靠的科学依据［13-15］。

高压蒸制酒黄精的外观色泽、质地、气味、口感等性状与常压蒸制酒黄精无差异，可以达到传统蒸制的要求，而且高压蒸制酒黄精技术可显著节省炮制时间，有效提高生产效率，且其操作相对简单，对设备要求不高，便于规模化生产，值得推广应用。

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（编校：谭玲，王冬梅）（编校：谭玲）

Effect of normal and high pressure steam ing on chem ical constituents of Polygonati Rhizoma w ith rice w ine

WANG Yong-lu1，3，WANG Li-yao2Δ，ZHU Xin-yi1，WANG Dong3

（1.Medical School of Southeast University，Nanjing 210009，China；2.College of Life Science，Anhui Agricultural University，Hefei230036，China；3.College of Pharmacy，Nanjing Technology University，Nanjing 211816，China）

ObjectiveTo study effect of normal and high pressure steaming on chemical constituents of Polygonati Rhizoma with rice wine，to provide reference for preparing Polygonati Rhizoma with rice wine.MethodsHPLC method was used to study the chemical constituents variation of characteristic chromatogram before and after processing Polygonati Rhizoma.ResultsCompared with Polygonati Rhizoma，there were appearance or disappearance of the chemical constituents found in normal and high pressure steaming Polygonati Rhizoma with rice wine.There were obvious change between the high pressure and the normal pressure steamed Polygonati Rhizoma.Conclusion The chemical constituents in Polygonati Rhizoma with rice wine could be changed after being processed.The high pressure processing technology of PolygonatiRhizomawith ricewine could meet the requirements，it could save time and is simple to operate.

Polygonati Rhizoma；normal pressure steaming；high pressure steaming；chemical constituents；HPLC

R284.1

A

1005－1678（2014）08－0173－03

安徽省自然科学基金（1208085QH168）；安徽农业大学稳定和引进人才科研项目（YJ2011－08）；江苏省博士后科研资助计划（1301012A）。

王永禄，博士后，研究方向：药物制剂，E-mail：wl_761107＠163.com；王丽瑶，通信作者，讲师，博士，研究方向：中药质量标准，E-mail：wangliyao1979＠sohu.com。