高效液相色谱法测定主产区天麻中天麻素含量

李慧慧，刘守金，方成武，徐国兵，陈庆辉

(1.安徽中医药大学药学院，安徽 合肥 230012；2.安徽省食品药品检验研究院，安徽 合肥 230051；3.安徽省天和中药材开发有限公司，安徽 合肥 231131)

高效液相色谱法测定主产区天麻中天麻素含量

李慧慧1，刘守金1，方成武1，徐国兵2，陈庆辉3

(1.安徽中医药大学药学院，安徽 合肥 230012；2.安徽省食品药品检验研究院，安徽 合肥 230051；3.安徽省天和中药材开发有限公司，安徽 合肥 231131)

目的测定全国5个主要产地天麻中天麻素含量，比较不同产地天麻质量。方法采用高效液相色谱法测定天麻中天麻素含量，采用Wondasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，检测波长220 nm，柱温25 ℃，流动相：乙腈-0.05%硫酸水溶液(3∶97)，流速0.6 mL/min。结果天麻素在0.20～3.20 μg内呈良好的线性关系，平均回收率为100.87%，RSD=2.89%(n=5)。结论5个主要产地天麻中天麻素含量有所差异。

天麻；天麻素；高效液相色谱法；含量测定

天麻为兰科天麻属植物天麻GastrodiaelataBlume.的干燥块茎，临床主要用于神经衰弱及其综合征、血管神经性头痛、经前期紧张等病证[1]，主产于四川、云南、贵州、陕西、甘肃、安徽、湖北等省。天麻素为天麻主要的活性物质之一，2010年版《中华人民共和国药典》采用高效液相色谱法测定天麻中天麻素的含量。有关天麻素的含量测定方法，已有相关文献报道[2-3]。本研究采用高效液相色谱法[4]比较贵州、安徽、四川、甘肃、云南出产的天麻中天麻素含量，为进一步评价天麻质量提供依据。

1 实验仪器与试剂

LC-15C高效液相色谱仪、SPD-15C紫外检测器、Wondasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)：岛津企业管理(中国)有限公司；天麻素对照品：成都曼斯特生物科技有限公司，批号 MUST-11122815，纯度大于99.5%；乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其他试剂为分析纯；天麻药材样品采于甘肃康县，四川江油，云南昭通，贵州大方，安徽金寨、霍山、岳西等地。原植物经安徽中医药大学中药与资源教研室刘守金教授鉴定为兰科植物天麻GastrodiaelataBlume.的块茎。

2 实验方法

2.1 对照品溶液的制备 精密称取天麻素对照品适量，加流动相制成50 μg/mL的溶液，即得。

2.2 样品溶液的制备[5-6]取天麻粉末(50目)2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇50 mL称质量，50 ℃超声40 min。放冷，称质量，用50%乙醇补足减失的质量，滤过，精密量取滤液10 mL，浓缩至近干，残渣加流动相混合溶液溶解，转移至25 mL容量瓶中。定容，摇匀，0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。

2.3 色谱条件 岛津Wondasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)；检测波长：220 nm；柱温25 ℃；流动相乙腈-0.05%磷酸水溶液(3∶97)；流速0.6 mL/min；进样量10 μL。

2.4 色谱系统适用性实验 在上述色谱条件下，主色谱峰与相邻色谱峰之间分离度大于1.5，理论塔板数大于5 000，对照品溶液连续进5针，RSD值小于2%。

2.5 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与样品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定。色谱图见图1。天麻素含量测定结果见表1。

图1 对照品(A)和样品(B)高效液相色谱图

表1 天麻药材中天麻素含量

3 讨论

3.1 不同品种天麻中天麻素含量 天麻在种内产生了许多变异，据花的颜色、花茎的颜色、块茎的形状、块茎含水量不同将天麻划分为4个类型(原变型)，即红天麻、乌天麻、绿天麻、黄天麻。在生产中栽培的主要是红天麻和乌天麻[7]。结果显示，不同品种天麻素平均含量有所差异：红天麻为0.42%，乌天麻为0.47%，绿天麻为0.36%，黄天麻为0.45%。进一步对同一品种不同产地(炮制方法同为煮透心法)进行比较，红天麻平均含量，贵州为0.29%，甘肃为0.44%，安徽为0.49%；乌天麻平均含量，云南为0.32%，四川为0.57%。结果显示同一品种不同产地的天麻含量有所差异，但还未对同一产地不同品种天麻素含量进行比较，因此天麻素含量与天麻品种是否有一定的相关性，有待于进一步实验研究。

3.2 不同产地天麻中天麻素含量 对云南、贵州、四川、安徽和甘肃5大产区不同产地30个样品进行含量测定，结果表明天麻素含量最高可达1.27%(安徽岳西)，最低为0.09%(贵州大方)，平均含量为0.45%，多数样品的含量集中在0.25%～0.65%之间，高于2010版《中华人民共和国药典》[8]标准(0.20%)。结果表明不同产地天麻素含量存在差异，即使同一产地，天麻素的含量也有差别，但未能显示出一定的规律性。

3.3 不同加工方法对天麻素含量的影响 既往研究[9]提示水蒸优于水煮，而本研究结果显示同一样品经水蒸加工后的含量与水煮加工的不成一定关系。如表2所示：1号、2号、5号样品两种加工方法天麻素含量相似；11号、16号样品天麻素含量水煮法大于水蒸法；而15、29号样品天麻素含量则水蒸法大于水煮法。在实地调查中发现，目前天麻产区加工并不是采用传统方法——蒸透心，而是将天麻煮至透心，再用硫磺熏，晒干。实验结果验证水煮法同样适用，因而在产地加工中使用煮法是可行的，并且较蒸法简便。

蒸透或煮透后的天麻再用硫磺熏具有外形整洁美观、色泽透明、防虫防霉、易贮存的优点。实验结果表明，安徽产天麻硫磺熏蒸的平均含量低于无硫熏蒸者，可见天麻加工过程中使用硫磺熏蒸对天麻素含量有一定影响。且谢云龙等[10]报道，硫磺熏后天麻的pH值明显降低，硫熏后天麻中二氧化硫残留量是否超过400 mg/kg的限量标准，有待进一步研究确认。

[1]吴刚,秦民坚,康继川，等.不同产地天麻质量评价[J].现代中药研究与实践,2008,27(1):40-43.

[2]肖薇,尹珉,庄志宏,等.不同产地天麻中天麻素含量的测定[J].北京中医药,2011,30(12):945-946.

[3]田野,李秀芳,杨莲,等.HPLC法对三产地天麻中天麻素的含量测定[J].云南中医学院学报,2008,31(3):6-8.

[4]鲁宏明,李慧慧,刘守金.高效液相色谱法测定安徽大别山区种植天麻中天麻素含量[J].安徽中医学院学报,2012,31(6):78-80.

[5]吴春敏,陈海滨.天麻中天麻素含量测定方法的研究[J].中国中药杂志,2004,29(12):1157-1159.

[6]余兰,陈华,娄营,等.超声提取天麻中天麻素优化工艺研究[J].安徽农业科学,2009,37(6):2556-2558.

[7]刘杰,王春霞.栽培天麻与野生天麻质量比较[J].井冈山医专学报,2004,11(4):85-86.

[8]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京:中国医药科技出版社,2010：54-55.

[9]秦俊哲,张洁,周涵.不同炮制方法对天麻素含量的影响[J].中药材,2006,29(12):1285-1287.

[10]谢云龙,雪鹏.硫磺熏对10味中药pH值的影响[J].中国现代医学杂志,2001,11(7):95-98.

DeterminationofGastrodininGastrodiaelatafromMainProductionAreasofChinabyHigh-PerformanceLiquidChromatography

LIHui-hui1,LIUShou-jin1,FANGCheng-wu1,XUGuo-bing2,CHENQing-hui3

(1.SchoolofPharmacy,AnhuiUniversityofChineseMedicine,AnhuiHefei230012,China; 2.AnhuiInstituteforFoodandDrugControl,AnhuiHefei230051,China; 3.AnhuiTienhoHerbalSourceCompany,AnhuiHefei231131,China)

ObjectiveTo determine the content of gastrodin inGastrodiaeletafrom five main production areas of China and to compare the quality ofGastrodiaelataof different origins.MethodsHigh-performance liquid chromatography was performed on a Wondasil C18column (4.6 mm × 150 mm, 5 μm) with a mobile phase of acetonitrile-0.05% sulfuric acid (3∶97) at a detection wavelength of 220 nm, a column temperature of 25 ℃, and a flow rate of 0.6 mL/min.ResultsThe content of gastrodin showed a good linear relationship with the peak area within 0.20-3.20 μg. The average recovery rate of gastrodin was 100.87%, and the relative standard deviation was 2.89% (n=5).ConclusionThe content of gastrodin varies betweenGastrodiaelatafrom the five main production areas of China.

Gastrodiaelata; gastrodin; high-performance liquid chromatography; determination

李慧慧(1989-)，女，硕士研究生

刘守金，shjinliu@sina.com

R284

A

10.3969/j.issn.2095-7246.2014.06.023

2014-04-29)