阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注脑组织TNF-α表达的影响

董春瑶 高政

·实验研究·

阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注脑组织TNF-α表达的影响

董春瑶 高政

目的 探讨阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注后脑组织中炎性细胞肿瘤坏死因子-α (TNF-α)表达的影响。方法 将54只SD大鼠随机分为三组, 各18例, 假手术组、脑缺血再灌注组(对照组)、阿托伐他汀组(实验组)。利用线栓法制备SD大鼠脑缺血再灌注模型, 实验组于造模前14 d给予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃治疗；假手术组、对照组分别给予等容积生理盐水。免疫组织化学方法检测不同再灌注时间点TNF-α的表达。结果 对照组TNF-α阳性表达细胞数在缺血2 h再灌注2、6、24 h均明显高于假手术组(P＜0.01)；实验组较对照组TNF-α阳性表达细胞数明显减少, 再灌注2、6 h差异具有统计学意义(P＜0.05), 再灌注24 h, 差异具有统计学意义(P＜0.01)。结论 阿托伐他汀能抑制大鼠脑缺血再灌注脑组织炎性细胞TNF-α的表达。

阿托伐他汀；脑缺血；再灌注；肿瘤坏死因子-α

阿托伐他汀是他汀类药物的一种, 它除了具有强效安全的调脂、抗动脉粥样硬化的疗效外, 还有多种其他作用, 如抗炎、抗氧化等［1］。临床常用于治疗高胆固醇血症, 此外对于糖尿病导致的血管动脉硬化、急性冠状动脉综合征和急性缺血性脑血管病的治疗方面也发挥了积极的作用［2］。本研究利用大鼠脑缺血再灌注模型, 对该模型预处理阿托伐他汀药物, 探讨其对脑缺血再灌注后脑组织炎性细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 健康雄性(SD)大鼠54只, 体重180～220 g, 随机分为3组,各18例, 分别为假手术组、对照组、实验组。

1.2 方法

1.2.1 动物模型制备及给药 参照文献［3, 4］描述的大脑中动脉线栓法制作大脑中动脉脑缺血模型。实验组大鼠术前14 d开始1次/d给予阿托伐他汀混悬液10.0 mg/(kg·d)灌胃,阿托伐他汀剂量选择参考Oria de Suarez［5］和Hong［6］；假手术组和对照组给予等容积生理盐水灌胃。各组按缺血2 h再灌注2、6、24 h分别进行检测。

1.2.2 取材及SP免疫组织化学染色 不同再灌注时间点麻醉处死大鼠后断头取脑速冻, 行冠状切片、石蜡包埋、做免疫组化染色, 显微镜下观察并计数阳性细胞数。

1.3 统计学方法 采用SPSS16.0统计学软件对数据进行统计学分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

对照组TNF-α阳性表达细胞数在缺血2 h再灌注2、6、24 h均明显高于假手术组,差异具统计学意义(P＜0.01)；实验组较对照组TNF-α阳性表达细胞数明显减少, 再灌注2、6 h差异具有统计学意义(P＜0.05), 再灌注24 h, 差异具有统计学意义(P＜0.01), 详见表1, 图1。

表1 三组缺血2 h再灌注2、6、24 h的TNF-α阳性表达( x-±s)

图1 各相同再灌注时间点TNF-α表达的比较

假手术组可见少量TNF-α的阳性细胞表达；对照组、实验组在缺血2 h再灌注24 h TNF-α阳性细胞表达数达高峰；对照组和实验组与假手术组比较, TNF-α阳性细胞表达数均显著增多, 实验组与对照组比较TNF-α阳性细胞表达数减少, 再灌注24 h差异具有统计学意义(P＜0.01)。

3 讨论

近年来研究发现, 他汀类药物具有降脂和非降脂双重作用。非降脂作用包括抗炎、抗氧化和抗兴奋毒性等, 其中抗炎作用在脑缺血再灌注损伤中发挥了重要的作用。脑缺血和再灌注损伤中炎症反应的多个过程均可被阿托伐他汀所抑制［7］。研究中发现, 脑缺血再灌注会引起一系列炎症反应包括黏附分子的表达、白细胞激活和多种细胞因子的共同作用［8］。其中TNF-α在脑缺血再灌注损伤中发挥的作用日益受到人们的重视。实验数据表明, TNF-α参与了急性脑损伤过程, 阿托伐他汀可抑制脑缺血再灌注损伤过程中TNF-α的表达,从而减轻神经功能损伤［9］。阿托伐他汀减少TNF-α表达的机制可能与其减弱炎症细胞向斑块内趋化和聚集有关, 此外抑制巨噬细胞sICAM-1及MMP的表达也是减少TNF-α的重要机制［10］。

本实验采用阿托伐他汀预处理大鼠脑缺血再灌注模型,检测不同再灌注时间点大鼠脑组织中TNF-α的变化, 结果发现：阿托伐他汀治疗后脑组织与单存缺血再灌注组比较TNF-α阳性细胞表达数明显减少, 表明阿托伐他汀对炎症反应的多个过程产生抑制作用, 减少炎性因子TNF-α的表达, 从而减少神经元的缺血损伤, 起到了神经保护的作用,可见阿托伐他汀是值得推荐的脑保护剂,在临床治疗过程中发挥积极的作用。

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［6］ Hong H, Zeng JS, Kreulen DL, et al.Atorvastatin protects against cerebral infarction via inhibition of NADPH oxidase-derived superoxide in ischemic stroke.Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2006, 291(5):2210-2215.

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2014-06-27］

110041 沈阳市第一人民医院神经内三科(董春瑶)；大连医科大学附属第二医院神经内科(高政)通讯作者：高政