PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达及其临床意义

管建云李军扩

PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达及其临床意义

管建云①李军扩②

目的：探讨PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达与其发生﹑发展的关系及其临床意义。方法：应用免疫组化法检测62例膀胱尿路上皮细胞癌和23例正常膀胱黏膜标本中PTEN的表达情况，分析其表达与膀胱癌的发生，病理分级及临床分期的关系。结果：PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌组织和正常膀胱黏膜组织中的阳性表达率分别是100%和46.77%，比较差异有统计学意义（P＜0.05）；且膀胱癌细胞分化越差，临床分期越高，PTEN阳性表达率越低，比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：膀胱尿路上皮细胞癌的发生﹑发展与PTEN的表达缺失有关。检测其表达情况对膀胱癌的预后判断及治疗选择可能具有重要价值。

膀胱； 尿路上皮细胞癌； PTEN蛋白； 临床意义

膀胱癌是泌尿外科中最常见的肿瘤，发病率逐年升高，其中90%以上为移行细胞癌，其特点为多中心性﹑易复发性及复发后恶性程度增加。从分子水平进行研究其特性，有可能对其临床治疗发挥积极作用。本研究采用免疫组化方法分别检测膀胱尿路上皮细胞癌和正常膀胱黏膜组织中PTEN蛋白的表达，分析其与膀胱癌发生发展及临床病理之间的关系，探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本组膀胱尿路上皮细胞癌62例，包括男48例，女14例，年龄34～78岁，平均（57.8±6.1）岁。按WHO病理分级分期标准，Ⅲ级16例，Ⅱ级24例，Ⅰ级22例。Ta～T1期37例，T2～T4期25例。23例正常膀胱组织取自其他膀胱手术患者，包括男17例，女6例；年龄26～72岁，平均（55.3±7.5）岁。

1.2 试剂及方法 即用型兔抗人PTEN多克隆抗体，DAB显色试剂盒及SP试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。所有标本经4%福尔马林液固定，石蜡包埋，4 μm薄切片，分别作HE及免疫组化染色。采用免疫组织化学SP法，操作按试剂盒说明书进行。用已知阳性片作阳性对照；用PBS代替一抗，作阴性对照。

1.3 结果判断 PTEN阳性细胞为胞浆或细胞核着色，呈橘黄色或棕黄色，根据视野中阳性细胞占全部同类细胞总数的比例及染色强度综合判定。按着色强度分：不着色计为0分，浅黄色计为1分，棕黄色计为2分，棕褐色计为3分。再将阳性细胞按比例评定：阳性细胞数＜10%计为0分；10%～40%计为1分；41%～70%计为2分；＞70%计为3分。将两种评分相加，3～6分为阳性（+）；0～2分为阴性（-）。

1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0软件进行统计学分析，率的比较采用 χ2检验，小样本资料采用Fisher精确概率检验法，α=0.05为检验水准。

2 结果

2.1 PTEN蛋白在膀胱癌组织和正常膀胱黏膜组织中的表达 PTEN蛋白表达主要于细胞质中，阳性为黄色﹑棕黄色颗粒，胞核可见少量表达。在62例膀胱癌组织标本中有29例呈PTEN蛋白阳性表达，阳性表达率为46.7%；在23例正常膀胱组织中PTEN蛋白均为阳性表达，阳性表达率为100%。PTEN蛋白的阳性表达率在膀胱癌组织中明显低于正常膀胱组织，比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 PTEN蛋白的阳性表达与膀胱癌临床病理特征之间的关系 16例Ⅲ级膀胱移行细胞癌标本中PTEN蛋白阳性表达率为25.00%（4例），24例Ⅱ级膀胱移行细胞癌标本中PTEN蛋白阳性表达率为37.50%（9例），22例Ⅰ级膀胱移行细胞癌标本中PTEN蛋白阳性表达率为72.73%（16例），比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。Ta～T1中PTEN蛋白的阳性表达率为64.86%（24例），T2～T4中PTEN蛋白的阳性表达率为20.00%（5例），比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

PTEN基因是一个高度保守的抑癌基因，在人类位于10号染色体q23.3区，有9个外显子和8个内含子。其编码产物为一个含有403个氨基酸的多肽链。PTEN蛋白具有双特异性磷酸酶（酪氨酸磷酸酶和脂质磷酸酶）活性，通过作用于细胞信号转导途径中多种信号分子[1]，脱去PI3K/PIP2/PIP3/AKT﹑MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）﹑FAK（聚集粘连激酶）等多种关键激酶的磷酸根，降低其磷酸化水平，使其活性减弱，阻断细胞信号转导通路。参与调节细胞的正常生长和发育，抑制细胞转化，并作用于细胞周期蛋白参与细胞周期的调控，促进细胞凋亡，从而负性调控肿瘤发生﹑发展，侵袭和转移[2-4]。PTEN基因突变或表达缺失导致其双特异性磷酸酶失去活性，失去对细胞周期的负性调控作用，细胞将不依赖细胞周期蛋白的调控而无限增殖，最终导致肿瘤的发生。

目前研究已证明PTEN具有明确的抑癌作用，它在多种人类肿瘤组织中表达减少或缺失[5]。PTEN的低表达或表达缺失在膀胱癌的发生发展过程中也普遍存在[6]，不但PTEN基因的丢失或灭活与膀胱癌的发生，膀胱癌的病理级别明显相关，而且与膀胱癌的进展和预后不良呈负相关[6]。检测PTEN蛋白的表达可以作为观察膀胱癌发生及预后的客观指标之一[7-8]。本研究显示，PTEN蛋白在膀胱尿路上皮细胞癌和正常膀胱组织的表达率分别为46.7%和100%，其差异有统计学意义（P＜0.05）。而且随着肿瘤细胞分化程度的降低和临床分期的增高，PTEN的阳性表达也逐渐降低，其差异均有统计学意义（P＜0.05），本研究结果与文献报道相类似。由此表明，PTEN蛋白表达降低或缺失在膀胱尿路上皮细胞癌的发生﹑发展过程中起重要的作用。

临床上，膀胱肿瘤的特点是中心性﹑易复发性，对放化疗不敏感，效果差，表浅膀胱癌治疗方法主要是膀胱部分切除术，术后局部膀胱灌注，术后易复发且恶性程度增加，浸润性癌的治疗方法主要是全膀胱切除术辅以术后放疗或化疗。对于出现转移者则无有效治疗法方。近年来从分子水平对肿瘤的发病机制已有了进一步认识，对多种肿瘤已成功开始实施靶向治疗。其特点是靶向药物特异性地选择细胞内与肿瘤发生发展相关部的一个基因片段或蛋白分子，调节细胞的生长﹑增值﹑调亡，使特异的肿瘤细胞死亡，而正常组织细胞不被会波及，具有定向性好﹑毒副作用小﹑无需最大耐受剂量即可获得较佳的临床疗效等特点，所以又被称为“生物导弹”。药物靶向治疗在一些肿瘤的治疗方面已取得了一定的疗效，然而在膀胱癌的治疗方面却无明显进展，近年来已成为广大学者研究热点之一。

研究发现，在膀胱癌中PTEN蛋白的表达缺失普遍存在，而PTEN蛋白在多条细胞信号转导通路中起重要作用。因此，它有可能成为治疗膀胱癌的重要靶点，许多学者已在致力于这方面的探索，可以相信临床上有可能通过上调PTEN蛋白的表达来治疗膀胱癌，抑制其发生﹑发展。有文献报道，甘草苷﹑姜黄素﹑吲哚美辛等均可以上调人细胞PTEN的表达[9-11]，相信随着研究的不断深入，PTEN有望成为治疗膀胱癌的靶点，更多的膀胱肿瘤患者将会从中受益。

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Expression and Significance of PTEN in Human Bladder Urothelial Cell Carcinoma/

GUAN J ian-yun， LI J un-kuo.//Medical Innovation of China，2014，11（19）：133-135

Objective： To investigate the expression of PTEN in bladder urothelial cell carcinoma， the relationship of its genesis， development and its clinical significance. Method： Expression of PTEN protein in 62 bladder urothelial cell carcinoma and 23 normal bladder tissues was analyzed by using SP immuno-histochemistry. The relationship between the expression of PTEN and the occurrence， pathologic grade and clinical stage of bladder cancer was analyzed. Result： The positive expression rate of PTEN in bladder urothelial cell carcinoma and normal bladder tissues was 100% and 46.77% respectively， the difference was statistically significant （P＜0.05）， with lower differentiation and higher stage， expression rate of PTEN run low， the differences was statistically significant （P＜0.05）. Conclusion： The expression of PTEN deficiency may be involved in the occurrence and development of the human bladder urothelial cell carcinoma. It may have significant value to test the expression of PTEN on prognosis and treatment options for bladder cancer.

Bladder； Urothelial cell carcinoma； PTEN protein； Clinical significance

10.3969/j.issn.1674-4985.2014.19.046

2014-03-06） （本文编辑：王宇）

①河南省安阳市肿瘤医院 河南科技大学四附院 河南 安阳455000

②河南省安阳市肿瘤医院

管建云

First-author’s address： Anyang Tumor Hospital， the Fourth Affiliated Hospital of He’nan University of Science and Technology， Anyang 455000， China