川芎中阿魏酸超高压提取工艺的优化

侯丽丽+陈洪海+张守勤+

摘要：优化川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．）中阿魏酸的常温超高压提取条件，应用高效液相色谱法测定提取液中的阿魏酸含量，以阿魏酸提取率为评价指标进行Ｌ９（３４）正交试验。结果表明，常温超高压提取川芎中阿魏酸的最优工艺为乙醇体积分数７０％，压力３００ ＭＰａ，固液比１∶５０（ｍ∶Ｖ，ｇ∶ｍＬ），时间３．０ ｍｉｎ，提取１次。超高压提取技术作为一种新的提取方法，提取川芎中阿魏酸稳定、可行。

关键词：川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．）；阿魏酸；超高压；提取

中图分类号：Ｒ２８４．2；R282文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０14）09－2133-03

Ｏｐｔｉｍｉｚing Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｉng Ｆｅｒｕｌｉｃ Ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．

ｂｙ Ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ

ＨＯＵ Ｌｉ－ｌｉ１，ＣＨＥＮ Ｈｏｎｇ－ｈａｉ２， ＺＨＡＮＧ Ｓｈｏｕ－ｑｉｎ３

（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｊｉｌｉｎ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００６２，Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００１２， Ｃｈｉｎａ；３．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｊｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００２５，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍal Ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ （ＵＰＥ） ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ extracting ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Lｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ. ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｂｙ Ｌ９（３４） ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ using ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｉｎｄｅｘ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍal ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ with ７０％ ｅｔｈａｎｏｌ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｅｓｓｕｒｅ of ３００ ＭＰａ， ｓｏｌｉｄ／ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ of １∶５０（ｍ∶Ｖ， ｇ∶ｍＬ）， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ for ３．０ ｍｉｎ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｆｏｒ １ ｔｉｍｅｓ． ＵＰＥ ｉｓ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Lｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．； ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ； uｌｔｒａ－ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ

川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．） 为伞形科植物，其干燥根茎为常用的活血化瘀中药，始载于《神农本草经》，味辛、微苦、性温，有活血化瘀、理气止痛、降压、扩张血管、抗血栓、镇静及解痉等作用。常用于头痛、肋痛、胀痛、风湿痹痛及心脑血管等疾病的治疗［１，２］。由于其独特的药用价值，引起了药学研究者的广泛关注，成为中草药研究的热点。对川芎化学成分的研究始于２０世纪３０年代［３］。随着现代分析手段的进步以及波谱学的发展，对川芎的化学成分有了较为完善的了解。川芎主要含有内酯、酚（酸）性成分及含氮化合物。

超高压常温提取技术是新兴的提取技术，具有高效、节能、保护提取物生物活性等优点。目前已经被应用于提取多种中药的有效成分，如人参［４，５］、西洋参［６］、荔枝皮［７］、龙眼皮［８］、蜂胶［９］、绿茶［１０－１２］等。本试验主要研究川芎中阿魏酸的超高压最优提取工艺，为川芎有效成分的研究提供一定的依据。

１材料与方法

１．１试验材料与仪器

川芎（吉林修正药业集团股份有限公司）；阿魏酸标准品（江西本草天工科技有限责任公司）；甲醇、冰乙酸均为色谱纯；其他试剂均为分析纯。

ＬＣ２０型高效液相色谱仪［岛津国际贸易（上海）有限公司］；ＤＬ７００型超高压设备（上海大隆机器厂）。

１．２试验方法

１．２．１色谱条件色谱柱，Ｃ１８（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ）；流动相，冰醋酸－甲醇－水（１∶６５∶３４）；检测波长，３１３ ｎｍ；流速，０．４ ｍＬ／ｍｉｎ；柱温，４０ ℃。

１．２．２标准曲线的绘制精确称取阿魏酸标准品３．８ ｇ置于１００ ｍＬ容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得阿魏酸标准溶液（０．０３８ ｍｇ／ｍＬ）。吸取该对照品溶液２、４、６、８、１０ μＬ，分别注入高效液相色谱仪，测得峰面积，以对照品为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线（图１）。得到的回归方程为Ｙ＝７５２ １８５．３Ｘ－３７５ ９，ｒ２＝ ０．９９９ ９。阿魏酸标准品液相色谱图见图２。

１．２．３超高压提取方法将处理好的原料与溶剂混合后，用塑料袋封好放入高压容器内，在常温、适当压力下保持一定时间后卸压取出，离心，取上清液备用。

１．２．４回流提取方法参照文献［１３］精确称取川芎样品２．０ ｇ，按１∶８（m∶V，g∶ｍＬ）的固液比加入７０％乙醇，提取２次，每次１．５ ｈ，提取液离心，取上清液备用。

１．２．５测定方法精确吸取待测液１０ μＬ，注入高效液相色谱仪测定峰面积，由标准曲线计算其含量。

阿魏酸提取率（ｍｇ／ｇ）＝■×■

式中，Ｓ为峰面积；Ｖ为定容体积（ｍＬ）；ｖ为进样量（μＬ）；ｗ为样品质量（ｇ）。

１．３单因素试验

通过试验分别确定常温超高压提取的溶媒乙醇体积分数、提取压力、溶剂用量、提取时间对川芎阿魏酸提取率的影响。①精确称取１．０ ｇ样品粉末６份，按固液比１∶５０，分别加入体积分数为２０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９５％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ压力下保压２．０ ｍｉｎ，取出后离心，取上清液；②精确称取１．０ ｇ样品粉末４份，按固液比１∶４０加入体积分数６０％的乙醇溶液，分别在１００、２００、３００、４００ ＭＰａ下保压２．０ ｍｉｎ，取出后离心，取上清液；③精确称取１．０ ｇ样品粉末４份，分别按固液比１∶２０、１∶４０、１∶６０、１∶８０加入体积分数６０％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ压力下保压２．０ ｍｉｎ，取出后离心，取上清液；④精确称取１．０ ｇ样品粉末４份，按固液比１∶４０加入体积分数６０％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ下分别保压１．０、２．０、３．０、４．０ ｍｉｎ，取出后离心，取上清液。

各试验根据提取液的不同，稀释到一定的体积，超滤膜过滤后测定阿魏酸提取率。

１．４正交试验

根据单因素试验结果，正交试验主要考察提取压力、乙醇体积分数、提取时间、固液比４个因素对超高压提取工艺的影响，每个因素取３个水平，以阿魏酸提取率为考察指标，采用Ｌ９（３４）进行正交试验，筛选最佳工艺。正交试验因素和水平见表1。

２结果与分析

２．１单因素试验结果

２．１．１乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响从图３可以看出，乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响比较明显，随着乙醇体积分数的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇体积分数为７０％、８０％时提取率较高，当乙醇体积分数高于８０％时阿魏酸提取率下降。因此，选择乙醇体积分数为６０％～８０％作为阿魏酸的提取溶剂。

２．１．２提取压力对川芎阿魏酸提取率的影响从图４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，随着提取压力的增大川芎阿魏酸提取率也随之升高，当提取压力超过３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率变化不明显。可能在３００ ＭＰａ压力下川芎细胞壁已被破坏，溶剂在压力作用下已完全进入细胞内，并将有效成分基本溶出，所以加大压力提取率变化不大。因此，选择压力２００～４００ ＭＰａ为宜。

２．１．３固液比对川芎阿魏酸提取率的影响从图５可以看出，随着固液比的变化，川芎阿魏酸提取率逐渐升高，在固液比为１∶４０后，阿魏酸提取率变化缓慢，基本影响不大，说明在４０倍乙醇用量时，阿魏酸已经基本被溶解出来。因此，选择固液比为１∶４０为最佳。

２．１．４提取时间对川芎阿魏酸提取率的影响通过试验发现，随着提取时间的延长，阿魏酸的提取率基本没有变化，提取时间对其基本无影响。高压提取过程中当压力升高，溶剂在压力下进入到细胞内部，溶解有效成分，当压力在瞬间消失后，在压力差的作用下细胞膨胀爆炸，有效成分被溶出，因此提取时间长短对阿魏酸提取率影响不大。

２．２正交试验结果

由表２可以看出，根据极差分析，影响川芎阿魏酸提取率的主次因素为Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响最大，其次是提取压力和固液比，提取时间的影响最小，得到的最优组合为Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高压提取最优条件为提取压力３００ ＭＰａ、体积分数７０％乙醇溶液、提取时间３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３验证试验

按正交试验最优工艺条件重复验证提取３ 次，川芎阿魏酸的提取率依次为０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均为０．５２３ ｍｇ／ｇ。说明最优工艺稳定、可行。

２．４与回流提取方法对比试验

取相同重量的川芎样品，分别按回流提取和超高压提取的最优工艺，得到２种提取液。通过测定２种提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，无显著差异（表４）。从表４可以看出，超高压提取与回流提取相比，具有提取时间短、提取次数少、不需要加热，节省能源并避免加热对成分的破坏。但是从溶剂用量上超高压提取方法较回流提取要多。

３小结

根据正交试验结果，结合节约能源等综合考虑，确定常温超高压提取川芎阿魏酸的最优工艺为提取溶剂体积分数７０％乙醇溶液、提取压力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取时间３．０ ｍｉｎ。在最优工艺下，通过测定阿魏酸提取率为０．５２３ ｍｇ／ｇ。与回流提取方法相比较，超高压提取技术具有常温不加热、提取时间短、杂质少、稳定性高、节约能源等优点，作为一种新型的提取工艺，其应用前景广阔。

参考文献：

［１］ 范宋玲，张建军，熊带水，等．川芎微波提取工艺优选［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１１，１７（１８）：４６－４８．

［２］ 王玥，杜守颖，吴清，等.川芎中阿魏酸的闪式提取工艺研究［Ｊ］． 北京中医药大学学报，２０１２，３５（８）： ５５９－５６２．

［３］ 余昕，朱烨，张春，等．不同干燥方法对川芎不同部位阿魏酸含量的影响［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１２，１８（６）：１００－１０３．

［４］ ＣＨＥＮ Ｒ Ｚ， ＭＥＮＧ Ｆ Ｌ， ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｎ ｙｉｅｌｄｓ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｆｒｏｍ ｇｉｎｓｅｎｇ［Ｊ］． Ｓｅｐ Ｐｕｒｉｆｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２００９，６６（2）：３４０－３４６．

［５］ 陈瑞战，张守勤，王长征．常温超高压提取人参皂苷［Ｊ］．化工学报，２００５，５６（５）：９１１－９１４．

［６］ 陈瑞战，张守勤，王长征，等．超高压提取西洋参皂苷工艺研究［Ｊ］．农业工程学报，２００５，２１（５）：１５０－１５４．

［７］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｂ， ＺＨＡＯ Ｍ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ uｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ ｏｒ hｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅ eｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ fｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Lｉｔｃｈｉ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Ｊ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇ，２００９，３２（6）：８２８－８４３．

［８］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｅ， ＹＩ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｍ ｙｉｅｌｄ， ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Innovative Food Science & Emerging Technologies，２００９，１０（2）：１５５－１５９．

［９］ ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ＸＩ Ｊ， ＷＡＮＧ Ｃ Ｚ． Ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ flａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｐｒｏｐｏｌｉｓ［Ｊ］． Ｊ Ｃｈｅｍ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，８０（1）：５０－５４．

［１０］ ＸＩ Ｊ．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００９，９４（1）：１０５－１０９．

［１１］ ＸＩ Ｊ， ＳＨＥＮ Ｄ Ｊ，ＺＨＡＯ Ｓ，ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２００９，３８２（1-2）：１３９－１４３．

［１２］ ＸＩ Ｊ， ＺＨＡＯ Ｓ， ＬＵ Ｂ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｃａｔｅｃｈｉｎｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｂｙ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２０１０，386（1-２）：２２９－２３１．

［１３］ 崔丽娟，刘玉明．正交试验法优选川芎中阿魏酸的提取工艺［Ｊ］． 齐鲁药事，２００５，２４（１９）：５６０－５６１．

２结果与分析

２．１单因素试验结果

２．１．１乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响从图３可以看出，乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响比较明显，随着乙醇体积分数的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇体积分数为７０％、８０％时提取率较高，当乙醇体积分数高于８０％时阿魏酸提取率下降。因此，选择乙醇体积分数为６０％～８０％作为阿魏酸的提取溶剂。

２．１．２提取压力对川芎阿魏酸提取率的影响从图４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，随着提取压力的增大川芎阿魏酸提取率也随之升高，当提取压力超过３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率变化不明显。可能在３００ ＭＰａ压力下川芎细胞壁已被破坏，溶剂在压力作用下已完全进入细胞内，并将有效成分基本溶出，所以加大压力提取率变化不大。因此，选择压力２００～４００ ＭＰａ为宜。

２．１．３固液比对川芎阿魏酸提取率的影响从图５可以看出，随着固液比的变化，川芎阿魏酸提取率逐渐升高，在固液比为１∶４０后，阿魏酸提取率变化缓慢，基本影响不大，说明在４０倍乙醇用量时，阿魏酸已经基本被溶解出来。因此，选择固液比为１∶４０为最佳。

２．１．４提取时间对川芎阿魏酸提取率的影响通过试验发现，随着提取时间的延长，阿魏酸的提取率基本没有变化，提取时间对其基本无影响。高压提取过程中当压力升高，溶剂在压力下进入到细胞内部，溶解有效成分，当压力在瞬间消失后，在压力差的作用下细胞膨胀爆炸，有效成分被溶出，因此提取时间长短对阿魏酸提取率影响不大。

２．２正交试验结果

由表２可以看出，根据极差分析，影响川芎阿魏酸提取率的主次因素为Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响最大，其次是提取压力和固液比，提取时间的影响最小，得到的最优组合为Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高压提取最优条件为提取压力３００ ＭＰａ、体积分数７０％乙醇溶液、提取时间３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３验证试验

按正交试验最优工艺条件重复验证提取３ 次，川芎阿魏酸的提取率依次为０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均为０．５２３ ｍｇ／ｇ。说明最优工艺稳定、可行。

２．４与回流提取方法对比试验

取相同重量的川芎样品，分别按回流提取和超高压提取的最优工艺，得到２种提取液。通过测定２种提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，无显著差异（表４）。从表４可以看出，超高压提取与回流提取相比，具有提取时间短、提取次数少、不需要加热，节省能源并避免加热对成分的破坏。但是从溶剂用量上超高压提取方法较回流提取要多。

３小结

根据正交试验结果，结合节约能源等综合考虑，确定常温超高压提取川芎阿魏酸的最优工艺为提取溶剂体积分数７０％乙醇溶液、提取压力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取时间３．０ ｍｉｎ。在最优工艺下，通过测定阿魏酸提取率为０．５２３ ｍｇ／ｇ。与回流提取方法相比较，超高压提取技术具有常温不加热、提取时间短、杂质少、稳定性高、节约能源等优点，作为一种新型的提取工艺，其应用前景广阔。

参考文献：

［１］ 范宋玲，张建军，熊带水，等．川芎微波提取工艺优选［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１１，１７（１８）：４６－４８．

［２］ 王玥，杜守颖，吴清，等.川芎中阿魏酸的闪式提取工艺研究［Ｊ］． 北京中医药大学学报，２０１２，３５（８）： ５５９－５６２．

［３］ 余昕，朱烨，张春，等．不同干燥方法对川芎不同部位阿魏酸含量的影响［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１２，１８（６）：１００－１０３．

［４］ ＣＨＥＮ Ｒ Ｚ， ＭＥＮＧ Ｆ Ｌ， ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｎ ｙｉｅｌｄｓ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｆｒｏｍ ｇｉｎｓｅｎｇ［Ｊ］． Ｓｅｐ Ｐｕｒｉｆｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２００９，６６（2）：３４０－３４６．

［５］ 陈瑞战，张守勤，王长征．常温超高压提取人参皂苷［Ｊ］．化工学报，２００５，５６（５）：９１１－９１４．

［６］ 陈瑞战，张守勤，王长征，等．超高压提取西洋参皂苷工艺研究［Ｊ］．农业工程学报，２００５，２１（５）：１５０－１５４．

［７］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｂ， ＺＨＡＯ Ｍ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ uｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ ｏｒ hｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅ eｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ fｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Lｉｔｃｈｉ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Ｊ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇ，２００９，３２（6）：８２８－８４３．

［８］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｅ， ＹＩ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｍ ｙｉｅｌｄ， ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Innovative Food Science & Emerging Technologies，２００９，１０（2）：１５５－１５９．

［９］ ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ＸＩ Ｊ， ＷＡＮＧ Ｃ Ｚ． Ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ flａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｐｒｏｐｏｌｉｓ［Ｊ］． Ｊ Ｃｈｅｍ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，８０（1）：５０－５４．

［１０］ ＸＩ Ｊ．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００９，９４（1）：１０５－１０９．

［１１］ ＸＩ Ｊ， ＳＨＥＮ Ｄ Ｊ，ＺＨＡＯ Ｓ，ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２００９，３８２（1-2）：１３９－１４３．

［１２］ ＸＩ Ｊ， ＺＨＡＯ Ｓ， ＬＵ Ｂ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｃａｔｅｃｈｉｎｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｂｙ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２０１０，386（1-２）：２２９－２３１．

［１３］ 崔丽娟，刘玉明．正交试验法优选川芎中阿魏酸的提取工艺［Ｊ］． 齐鲁药事，２００５，２４（１９）：５６０－５６１．

２结果与分析

２．１单因素试验结果

２．１．１乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响从图３可以看出，乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响比较明显，随着乙醇体积分数的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇体积分数为７０％、８０％时提取率较高，当乙醇体积分数高于８０％时阿魏酸提取率下降。因此，选择乙醇体积分数为６０％～８０％作为阿魏酸的提取溶剂。

２．１．２提取压力对川芎阿魏酸提取率的影响从图４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，随着提取压力的增大川芎阿魏酸提取率也随之升高，当提取压力超过３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率变化不明显。可能在３００ ＭＰａ压力下川芎细胞壁已被破坏，溶剂在压力作用下已完全进入细胞内，并将有效成分基本溶出，所以加大压力提取率变化不大。因此，选择压力２００～４００ ＭＰａ为宜。

２．１．３固液比对川芎阿魏酸提取率的影响从图５可以看出，随着固液比的变化，川芎阿魏酸提取率逐渐升高，在固液比为１∶４０后，阿魏酸提取率变化缓慢，基本影响不大，说明在４０倍乙醇用量时，阿魏酸已经基本被溶解出来。因此，选择固液比为１∶４０为最佳。

２．１．４提取时间对川芎阿魏酸提取率的影响通过试验发现，随着提取时间的延长，阿魏酸的提取率基本没有变化，提取时间对其基本无影响。高压提取过程中当压力升高，溶剂在压力下进入到细胞内部，溶解有效成分，当压力在瞬间消失后，在压力差的作用下细胞膨胀爆炸，有效成分被溶出，因此提取时间长短对阿魏酸提取率影响不大。

２．２正交试验结果

由表２可以看出，根据极差分析，影响川芎阿魏酸提取率的主次因素为Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇体积分数对川芎阿魏酸提取率的影响最大，其次是提取压力和固液比，提取时间的影响最小，得到的最优组合为Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高压提取最优条件为提取压力３００ ＭＰａ、体积分数７０％乙醇溶液、提取时间３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３验证试验

按正交试验最优工艺条件重复验证提取３ 次，川芎阿魏酸的提取率依次为０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均为０．５２３ ｍｇ／ｇ。说明最优工艺稳定、可行。

２．４与回流提取方法对比试验

取相同重量的川芎样品，分别按回流提取和超高压提取的最优工艺，得到２种提取液。通过测定２种提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，无显著差异（表４）。从表４可以看出，超高压提取与回流提取相比，具有提取时间短、提取次数少、不需要加热，节省能源并避免加热对成分的破坏。但是从溶剂用量上超高压提取方法较回流提取要多。

３小结

根据正交试验结果，结合节约能源等综合考虑，确定常温超高压提取川芎阿魏酸的最优工艺为提取溶剂体积分数７０％乙醇溶液、提取压力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取时间３．０ ｍｉｎ。在最优工艺下，通过测定阿魏酸提取率为０．５２３ ｍｇ／ｇ。与回流提取方法相比较，超高压提取技术具有常温不加热、提取时间短、杂质少、稳定性高、节约能源等优点，作为一种新型的提取工艺，其应用前景广阔。

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