山茶油中功能性成分的测定

摘 要：目的：为了测定山茶油中的4类功能性组分的含量。方法：采用分光光度法测定茶皂素、茶多酚的含量，气相色谱法测定角鲨烯和维生素E的含量。结果：试验结果表明橄榄油包含的角鲨烯和茶皂素最多，分别为540.03mg/100g和12.26mg/g；山茶油A和山茶油B包含茶多酚最多，分别为41.21μg/g和41.63μg/g，山茶油B包含的维生素E最多，为23.93mg/100g。结论：综合比较得知山茶油茶多酚含量最高。

关键词：山茶油；功能性成分；测定

油茶籽油具有预防心脑血管疾病、抗氧化和清除自由基等功效，茶皂素是一种天然非离子型表面活性剂，广泛应用于洗涤、毛纺、针织、医药、日用化工等领域，多酚类物质是油脂主要的天然抗氧化剂，角鲨烯和维生素E均可以抑制脂质过氧化，增加机体免疫功能，预防和治疗心血管疾病。

1 方法与材料

1.1 试剂与材料

没食子酸、维生素E、角鲨烯、茶皂素、正二十六烷标准品，香草醛，福林酚。实验中选用2种产地不同的山茶油作为分析材料，名称分别为山茶油A和山茶油B，同时与优质的橄榄油和花生油相比较。

1.2 设备与仪器

日本生产的GC-2014型气相色谱仪；TU-1810SPC紫外可见分光光度计；HH-S数显恒温水浴锅；旋转蒸发仪。

1.3 实验方法

1.3.1 茶多酚的含量测定

（1）没食子酸标准曲线的制备。准确称取0.05g的没食子酸标准品，置于100mL的容量瓶中，加水定容。分别吸取没食子酸标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL的容量瓶中，加水至10mL，混匀，配成浓度不同的标准溶液。分别取1.0mL到50mL的容量瓶中。先加20mL的水，再加3mL的福林酚试剂，摇匀，在8min时间内加入12mL10%的Na2CO3溶液，加水定容，混匀。在30℃的温度下避光放置2小时，以空白液作参比，在765nm下测定吸光度，绘制标准曲线。

（2）茶多酚的测定。分别称取四种植物油样品10g，置于250mL的锥形瓶中，加140mL的甲醇，在65℃温度下冷凝回流提取90分钟，取出，放置到室温，用正己烷萃取，直至浅黄色或无色，提取液转移至50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。按上述方法测定吸光度，并与标准曲线相比较，计算茶多酚的含量。

1.3.2 茶皂素的含量测定

（1）茶皂素标准曲线的制备。准确称取茶皂素标准品0.9400g，加80%乙醇溶解定容到100mL，摇匀。分别吸取茶皂素标准溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL于10mL容量瓶中，加水定容，摇匀，配成不同浓度的标准溶液。依次取0.5mL置于10mL的冰浴的具塞试管中，再依次添加0.5mL的浓度为8%的香草醛溶液和77%的硫酸溶液5mL，充分摇匀。在60℃的水浴中加热，显色20分钟后，置于冰浴中冷却10分钟，取出，放置到室温，以空白液作参比，在545nm处测量吸光度，绘制标准曲线。

（2）茶皂素的测定。分别称取四种植物油样品5.000g置于100mL烧瓶中，加入50mL70%的乙醇溶液，于80℃回流提取2小时，提取液旋转蒸发浓缩至粘稠状，加入20mL水溶解，再加入正丁醇溶液，于分液漏斗中等体积萃取3次。合并正丁醇萃取液，浓缩至干，用70%的乙醇溶液定容至100mL，摇匀备用。按上述方法测定吸光度，并与标准曲线相比较，计算茶皂素的含量。

1.3.3 角鲨烯、维生素E的含量测定

（1）校正因子的测定。配制1.0mg/mL正二十六烷标准溶液和0.8mg/mL的角鲨烯、维生素E标准溶液。准确吸取角鲨烯和维生素E标准溶液各0.125、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL置于10mL容量瓶中，分别加入1mL内标标准溶液，用正己烷定容，按照下面的条件进行气相色谱分析，根据样品浓度与样品和峰面积之比计算校正因子。色谱柱：KB-5MS毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）；程序升温：200，1min℃→5/min℃→280，10℃；进样方式：分流进样，分流比为10：1；进样量：1μL。

（2）维生素E和角鲨烯的测定。分别称取四种植物油样品1.000g，加入0.5mL正二十六烷标准溶液，用正己烷定容至5mL，摇匀备用。按上述的方法进行气相色谱分析，计算各组分与内标物峰面积之比，计算样品中角鲨烯和维生素E含量。

2 结果分析与讨论

测定结果如下表：

样品名称 茶多酚（μg/g） 茶皂素（mg/g） 维生素 E（mg/100g） 角鲨烯（mg/100g）

山茶油A 41.21±2.15 3.85±0.40 17.41±3.87 10.10±0.94

山茶油B 41.63±2.05 3.70±0.21 23.93±4.37 0

一级压榨花生油 24.30±1.52 8.84±0.90 22.52±3.41 29.48±2.19

特级初榨橄榄油 24.56±0.87 12.26±0.80 29.48±2.19 540.03±0.26

四种植物油中茶多酚、茶皂素、维生素E、角鲨烯测定结果（n=3）

结果表明四种植物油中的茶多酚含量都比茶皂素含量低很多，而维生素E含量差距较小，特级初榨橄榄油中角鲨烯含量最高。与其他油样相比，山茶油中茶多酚的含量最高。实验所用山茶油A和山茶油B均来自油茶籽，但二者功能性成分差异较大，山茶油B的维生素E含量比山茶油A的高，并且未测出角鲨烯，这可能与山茶油产地或加工方式有关。这些研究结果对山茶油的进一步开发和利用具有重要的指导作用。

参考文献：

[1]姚东等.油茶资源与科学利用研究[J].科学出版社，2012（01）：12-23.

[2]钟彬.油茶籽油中角鲨烯含量的气相色谱法测定[J].分析试验室，2011（01）：14-16.

[3]王伟.山茶油中成分含量的测定[J].科学出版社，2012（02）：1-5.

作者简介：罗月红（1967-），女，广东清远人，本科，讲师、实验师。