林晓萍 王生华
摘要:对猪霉形体肺炎的诊断方法进行了介绍。
关键词:猪霉形体;肺炎;诊断
中图分类号:S858.3 文献标识码:B 文章编号:1007-273X(2014)02-0047-01
猪霉形体肺炎病又被称为地方流行性肺炎,俗称猪气喘病。是由猪霉形体引起的一种慢性呼吸道传染病。该病一年四季均可发生,年龄、性别、品种不同的猪易感性差异不大,密集饲养、营养不良以及环境潮湿通风不良和寒冷气候均易发病。患猪长期生长发育不良,饲料利用率低。一般情况下死亡率不高,但继发感染也会造成严重死亡,因此会造成巨大的经济损失,给养猪业发展带来严重的危害。
1 发病情况
对荆门地区多家养猪场960头40~105日龄猪调查发现,一般开始只有个别猪发病,经过抗生素的治疗后,病情多不见好转;一个星期后越来越多猪发病,共有131头,发病率为13.6%,死亡6头,死亡率为4.6%。抵抗力弱的仔猪呈急性经过,潜伏期短,症状明显,呈现张口呼吸,喘气,不愿走动。从出现症状到死亡的时间为6~8 d。试用多种抗生素治疗效果不佳,甚至病情加重。
2 临床症状
主要症状为咳嗽,清晨赶猪喂食和剧烈运动时,咳嗽最明显。咳嗽时站立不动,背拱,颈伸直,头下垂,用力咳嗽多次,严重时呈连续的痉挛性咳嗽。常出现不同程度的呼吸困难,呼吸次数增加和腹式呼吸(喘气)。食欲变化不大,病势严重时减少或完全不食。病期较长的小猪,身体消瘦而衰弱,生长发育停滞。
3 病原体的分离
采取4头病猪的各个肺叶和肺门淋巴结用塑料带装好密封,冰箱低温保存。无菌采取病肺组织剪成1~2 mm的碎块,放入液体培养基中培养。因其在液体培养物中浑浊度低,不易观察,常借助分解葡萄糖产酸使得培养基的颜色变黄来判断。初代分离经3~5 d,当pH值下降至6.8~7.0时,以20%的接种量转接培养第2代。当培养物的pH下降至6.8时,进行涂片镜检。同时将液体培养物适当稀释接种于固体培养基中,置5% CO2 37 ℃培养3~10 d,观察有无边缘整齐、中央隆起、有颗粒的微小菌落生长[1,2]。
4 病原体鉴定
对培养物进行涂片染色镜检,吸一滴培养液于载玻片上,推成薄层,干燥后用甲醛固定2~3 min,用pH 7.2的PBS将姬姆萨溶液稀释10倍,染色3 h。用pH 7.2的PBS冲洗玻片。后用丙酮脱色10s,待干燥后在油镜下观察其形态。其他血清学试验也可作为鉴定方法,如微粒凝集试验和补体结合反应等[3]。
5 生理生化试验
5.1 葡萄糖发酵试验
将霉形体培养物接种于葡萄糖培养基中,置于5% CO2 37 ℃恒温箱中培养24 h后取出观察其颜色变化。
5.2 精氨酸水解试验
将霉形体培养液接种于精氨酸培养基中,置于5% CO2 37 ℃恒温箱中培养24 h后取出观察其颜色变化。
5.3 洋地黄苷敏感试验
用于区别需要甾醇与不需要甾醇的霉形体,后者不敏感。将干燥的洋地黄苷圆纸片贴于接种了霉形体的平板中央,37 ℃培养后每天观察,前者生长