高效液相色谱-串联质谱测定梨子中苯醚甲环唑的残留

马锦陆，李宏宇，陆晓娜，杨文娟

新疆农药检定所（自治区农产品质量安全监督检验中心），乌鲁木齐 830049

高效液相色谱-串联质谱测定梨子中苯醚甲环唑的残留

马锦陆，李宏宇，陆晓娜，杨文娟

新疆农药检定所（自治区农产品质量安全监督检验中心），乌鲁木齐 830049

建立梨子中高效液相色谱-串联质谱检测苯醚甲环唑的残留方法。用乙腈提取，固相萃取柱净化，定容过膜后，用液相色谱-质谱联用仪检测。结果：苯醚甲环唑质量浓度在10～200ng/mL之间标准曲线线性良好。添加浓度在10.0～500.0mg/kg，添加回收率为88.0%～117.0%。

高效液相色谱-串联质谱；苯醚甲环唑

苯醚甲环唑（difenoconazo1e），又名恶醚唑。是三唑类杀菌剂中安全性比较高的一种，其内吸性强，杀菌谱广，是目前防治叶斑病、草莓白粉病、梨黑星病等作物抗性病害的理想杀菌剂，但由于其直接喷洒于蔬菜、水果上，通过食用进入人体，积累可能会危害健康。国内外对该药物在食品中的残留量已经做出了严格限制。因此建立一种简单、快速、准确、可靠的可用于测定苯醚甲环唑农药残留量的检测方法是很有必要的。

1 检测材料与方法

梨子中苯醚甲环唑经乙腈高速匀浆提取，上清液经固相萃取柱净化，氮气浓缩近干后用甲醇定容，过膜后用液相色谱-质谱联用仪检测。

1.1 材料与设备

苯醚甲环唑标准品：纯度1000.0μg/mL，由农业部环境质量监督检验测试中心（天津）提供；Supe1c1eanLC-NH2SPE(500mg/6mL)；甲醇：HPLC纯；乙腈：HPLC纯；甲酸：色谱纯；二氯甲烷：分析纯。

液相色谱-质谱联用仪WATERSACQUIPYUPLCTQD；高速匀浆机；高速离心机；固相萃取装置；涡流混合器；T-200型电子天平；氮吹仪；超声波清洗仪以及其它实验室常用仪器设备。

1.2 色谱条件

色谱柱：ACQUIPY-UPLCBEHC18，2.1×100 mm,1.7μm；柱温：40℃；进样量：5μL。流动相及流速见表1：

表1 流动相条件

1.3 质谱条件

离子源：电喷雾离子源ESI；扫描方式：正离子源；毛细管电压：3.0KV；锥孔电压：40V；离子源温度：120℃；脱溶剂温度：350℃；脱溶剂气流量：700L/h；锥孔气流量：50L/h；碰撞气流量：0.12 mL/min。苯醚甲环唑质谱参数：多重反应监测（MRM）如表2：

表2 苯醚甲环唑质谱参数

1.4.1 提取

准确称取20.0g梨子样品放入匀浆机中，加入40.0mL乙腈，匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5g氯化钠的100mL具塞量筒中，收集滤液30～40mL，盖上塞子，剧烈震荡1min，在室温下静止10min，使乙腈相和水相分层。

从100mL具塞量筒中准确吸取10.00mL乙腈相溶液，放人150mL烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，杯内缓缓通入空气，将乙腈蒸发近干；加入2.0mL甲醇＋二氯甲烷(1＋99)溶解残渣，盖上铝箔待净化。

1.4.2 净化

将氨基柱用4.0mL甲醇十二氯甲烷(1＋99)预淋洗，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即加入样品溶液，用15mL离心管收集洗脱液，用6mL甲醇十二氯甲烷(1＋99)洗烧杯后过柱，再用4mL甲醇十二氯甲烷(1＋99)洗烧杯过柱。空气流吹蒸发至近干，用甲醇准确定容至2.5mL。在混合器上混匀后，经0.2μm微滤膜待测。

1.5 标准曲线

苯醚甲环唑标准曲线的配制：将1000.0μg/ mL的苯醚甲环唑1mL吸取至10mL容量瓶中，用甲醇稀释至100μg/mL标准工作液；从苯醚甲环唑的标准工作液中吸取1mL置于100mL容量瓶中，用甲醇稀释为1μg/mL标准工作液，并用甲醇逐级稀释成200.0ng/mL、100.0ng/mL、50.0ng/ mL、20.0ng/mL、10.0ng/mL系列标准溶液，在上述液相色谱/质谱条件下进行测定。标样线性方程为：y＝269.37x-664.01，相关系数为：r2＝0.9991；其中x为苯醚甲环唑标准溶液浓度，y为峰面积（见图1）。

图1 不同质量浓度苯醚甲环唑的线性关系

1.6 最低检出限

在上述条件下，苯醚甲环唑的最低检出限为10.0μg/kg。

表3 添加回收率与相对标准偏差

2 结论

综上所述，苯醚甲环唑质量浓度在10～200 ng/mL之间相关系数为0.9991，标准曲线线性良好。梨子中苯醚甲环唑添加浓度在10.0～500.0 mg/kg，添加回收率为88.0%～117.0%，相对标准偏差为3.1%～5.0%。该方法测定苯醚甲环唑具有定量准确、重复性好、线性关系良好、分析速度快等特点，是测定梨子中苯醚甲环唑较为理想的方法。

[1]王远，邢丽杰．高效液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中苯醚甲环唑的残留量[J]．食品科学，2011，32(18)：296-299.

[2]王雯，梁颖．液相色谱-质谱联用检测番茄中苯醚甲环唑残留[J]．江苏农业学报，2011，27(3)：668-671.

[3]安晶晶，刘新刚．超高效液相色谱-串联质谱法测定土壤、蔬菜及水果中苯醚甲环唑和丙环唑残留[J]．农药，2009,48(7)：506-508.

马锦陆（1987年7月—），新疆农药检定所（自治区农产品质量安全监督检验中心）助理农艺师。

2014-10-18