益母草不同部位乙醇提取液对菜青虫变态的影响

赵玉敏，马 艳

(通化师范学院 生命科学学院，吉林 通化 134002)

益母草(Leonurusartemisia(Laur.)S. Y. Hu F)为唇形科,益母草属植物,夏季开花.其干燥地上部分为常用中药,生用或熬膏用.一年或二年生草本,高可达1m.茎单一,直立.叶片3全裂,裂片长圆状菱形.轮伞花序腋生;花冠紫红色或淡紫红色.小坚果长圆形.花期8～9月;果期9～10月.生于山野荒地、田埂、草地等,全国大部分地区均有分布.在夏季生长茂盛,花未全开时采摘.食用功效：益母草可全草入药,味辛苦、凉.活血、祛淤、调经、消水.治疗妇女月经不调,胎漏难产,胞衣不下,产后血晕,瘀血腹痛,崩中漏下,尿血、泻血,痈肿疮疡[1-3]. 有效成分为益母草素,益母草含益母草碱、水苏碱、益母草定、益母草宁等多种生物碱及苯甲酸、氯化钾等.菜青虫[4](PierisrapaeL.)为菜粉蝶幼虫,属鳞翅目,粉蝶科.寄主植物有十字花科、菊科、旋花科、百合科、茄科、藜科、苋科等9科35种,主要危害十字花科蔬菜,尤以芥蓝、甘蓝、花椰菜等受害比较严重.菜粉蝶分布在全国各地,药材中以板蓝根受害严重,幼虫将叶片吃成缺刻和孔洞,危害严重时全叶被吃光,仅剩叶脉和叶柄,使板蓝根产量下降.菜粉蝶属完全变态发育,分受精卵、菜粉蝶幼虫、蛹、虫四个阶段.

以往研究的植物源杀虫剂,多是喷洒后害虫触杀或胃毒死亡,这对昆虫物种保存很不利.而本实验利用长白山地区益母草不同部位乙醇提取液促使菜青虫快速变态,从而减少了作物的损失,又保存了物种.

1 材料与方法

1.1 材料

益母草采自通化白鸡腰国家森林公园,供试菜青虫(3龄幼虫,大小均匀),采自通化师范学院生命科学学院的实验田里,供试蔬菜为十字花科蔬菜甘蓝.

本实验U10(103)因素及水平设计如表1所示.

表1 本实验U10(103)因素及水平设计

1.2 药液制备方法

将益母草洗净晾干,称取根、茎、叶各10 g,放入研钵中捣碎,分别加入100ml 95%的乙醇溶液,于(23±2)℃恒温振荡提取8 h.再将提取液的滤液减压浓缩,放入少量95%的乙醇溶液溶解后,以蒸馏水定容,根、茎、叶提取液均制备成质量浓度为9.1、10.0、11.1、12.5、14.3、16.9、20.0、25.0、33.3、50.0mg/ml(表1)药液后,置于3～5℃冰箱中备用.

1.3 益母草不同部位乙醇提取液对菜青虫变态影响的测定

采用浸液法进行非选择性变态率的测定方法.以往实验采用叶碟法测定,本实验为了更接近自然条件,利于生产实践中对病虫害防治,我们对实验方法加以改进,采用浸液法进行非选择性变态率的测定.将新鲜平整的甘蓝叶片洗净,放在制备好的不同浓度的根、茎、叶供试药剂中浸渍5s后取出,用圆形打孔器打成直径为2cm的叶碟,取出于实验室内阴干后,置入直径为9cm的底部铺有滤纸保湿的培养皿中,实验进行时,取龄期较整齐的3龄菜青虫幼虫供试.试虫实验前在自然状态下饥饿4h.每个培养皿内放入3个相同浓度处理的叶碟,接入试虫,试虫取食24h后,取出残余叶碟,添加三片新鲜的药剂处理后的叶碟继续进行实验.每处理重复10次，30%乙醇处理作为对照,各处理随机排列.置于T=(25±1)℃;RH=(75±5)%;14 L:10 D光照培养箱饲养,分别于接入菜青虫的7d和9d统计计算变态率,变态率计算公式为：变态率(%)=(处理组变态数-对照组变态数)/处理组变态数×100%.

1.4 设计统计分析

采用SPSS(13.0)[5]软件处理分析数据.

2 结果与分析

用浸液法进行非选择性变态率的实验方法测定了益母草根、茎、叶不同浓度的乙醇提取液对菜青虫快速变态的影响.从48h后直至5d,菜青虫进入了变态准备期,菜青虫从处理后第6d开始变态,且茎处理液处理过的菜青虫总体的变态率显著高于另两种处理,蛹长也相对变小(图1).为了快速而准确地判断出3种提取液对菜青虫快速变态影响的显著性,将表2的实验结果,采用SPSS(13.0)软件处理分析,结果见表3.

图1 不同浓度不同处理的蛹长度

处理号乙醇浸提液浓度(mg/ml )根(X1)茎(X2)叶(X3)变态率(%)根( Y1)茎( Y2)叶( Y3)7d9d7d9d7d9d150.050.050.04073971004067233.333.333.35777931005773325.025.025.06080971006073420.020.020.0476087974767516.916.916.9537393975373614.314.314.3537393935373712.512.512.5607787976070811.111.111.1477083974767910.010.010.0507387935073109.19.19.1577783935770

注:均匀设计是正交设计的一种,U10(103)表示三个因子,10个处理.

表3 益母草对菜青虫变态率影响回归分析结果

由表2可知,益母草茎部乙醇提取液较另两种提取液更促进菜青虫快速变态,并随着浓度提高变态率提高;而益母草根、叶乙醇提取液对促进菜青虫快速变态没有作用.质量浓度为25.0、33.3、50.0mg/ml时变态率最高,达100%.菜青虫取食浸渍茎部试药剂叶蝶后,爬向培养皿边缘,虫体迅速膨大,开始身体C形弯曲,后活动能力有所减退,体重逐渐下降,虫体皱缩僵直,不吃不喝,以丝缚于培养皿顶部提前化蛹.因此,对茎提取液处理统计的菜青虫变态率进行回归分析,由表3可知,7d的回归方程分析结果Y2=0.425*X2+82.028；9d的回归方程分析结果Y2=0.279*X2+91.621,差异均极显著,推测：益母草茎部乙醇提取液对菜青虫变态有显著影响.

3 结论与讨论

本实验结果表明,益母草茎部含有促进菜青虫快速变态的物质.通过回归方程分析结果(表3)可知,益母草根、茎、叶三个器官中,只有茎部乙醇提取液对菜青虫快速变态有促进作用,并随着浓度提高，变态率提高.但是当质量浓度为25.0、33.3、50.0mg/ml时变态率最高,达100%.说明，一是益母草茎中含有促进菜青虫快速变态的物

质,此物质可能是抗保幼激素(早熟素)的成分,可能是供试药剂诱发抗保幼激素(早熟素)提前释放,但是当浓度过高时,药物毒性升高,导致虫体死亡;二是茎促进菜青虫快速变态的活性物质极易被乙醇提取;三是茎中起促进菜青虫快速变态的活性物质在乙醇提取液中能保持较好的稳定性;四是根和叶的乙醇提取液对促进菜青虫快速变态效果不明显,其原因可能是根和叶中含促进菜青虫快速变态的物质较少或根和叶中促进菜青虫快速变态的活性物质不易被乙醇提取出来,导致根和叶的乙醇提取液中促进菜青虫快速变态活性物质含量少，效果不明显;另外，根和叶的毒性很大,所以使虫体致死率很高.

用有毒植物提取液对菜青虫生物特性研究多是在拒食和触杀上[6-9],关于益母草促进菜青虫快速变态的研究还未有人报道,本实验对保存物种有一定的意义.益母草茎中是何种物质促进菜青虫快速变态,以及活性物质的进一步分离、提纯、对昆虫的作用方式和毒理机制等方面还有待更深入的研究.

参考文献：

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[2]李焕杰,孟祥玉.不同溶剂及方法对益母草生物碱含量影响[J].陕西中医,2008,29(5):607-608.

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