ASE—SPE—HPLC—MS/MS检测水产品中阿维菌素类药物残留

周秀锦　周向阳　邵宏宏　颜建波　傅谧妮

摘要[目的]建立水产品中阿维菌素、伊维菌素、莫西菌素、爱普利诺菌素、多拉菌素5种阿维菌素类药物残留量的快速溶剂萃取-液相色谱-串联质谱（ASESPEHPLC/MS/MS） 测定方法。[方法]样品采用快速溶剂萃取，乙腈为提取液，提取液浓缩后经C18小柱净化；经SHISEIDO CAPCELL PAK C18 MG S5质谱柱分离，乙腈 2.5 mmol/L乙酸铵水（0.1%乙酸）溶液为流动相，在电喷雾电离负离子（ESI-）、多反应监测模式（ MRM ）下测定5种阿维菌素类药物残留，基质标准曲线外标法定量。[结果]5种阿维菌素类药物在2.0～50.0 μg/kg范围内线性关系良好，相关系数大于0.997，莫西菌素在5.0、10.0、20.0 μg/kg，其他4种化合物在2.0、5.0、10.0 μg/kg加标水平的平均回收率为81.7%～93.5%，相对标准偏差为7.54%～13.26%。[结论]该方法提取效率高、净化较彻底，适合水产品中阿维菌素多药物残留量的测定。

关键词快速溶剂萃取；液相色谱串联质谱；阿维菌素类药物残留

中图分类号S481+.8文献标识码A文章编号0517-6611（2014）22-07406-03

阿维菌素类药物（AVMs）是一种大环内酯双糖类化合物，是一种高效广谱的生物源性驱虫药，其结构新颖，作用机理独特，广泛应用于作物种植、动物养殖中[1]。AVMs包括阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、莫西菌素、爱普利诺菌素等，按世界卫生组织（WHO）五级分级标准，AVMs属高度化合物，对环境或生物直接造成影响，日本《肯定列表制度》规定鳗鱼中阿维菌素和多拉菌素的限量为5.0 μg/kg。阿维菌素类药物的检测方法主要有免疫化学法[2-3]、高效液相色谱法[4-6]、液相色谱-串联质谱法[7-10]等。免疫化学法由于方法繁琐且检出限达不到要求而不能应用于实际批量检测；液相色谱法检出限较高，可能造成假阴性的出现；而高效液相色谱-串联质谱法则具有较高灵敏度，能够满足水产品中对阿维菌素类药物最低检出限的要求，目前存在的问题是回收率不高。ASE技术是一种快速、简单、安全、重复性好、样品实用性强的前处理方法，该方法利用提高温度和增加压力来提高萃取的效率，使用常规的溶剂对固体或半固体样品进行萃取。笔者采用ASE和SPE技术进行样品前处理，结合液质联用技术进行检测，建立了水产品中阿维菌素、伊维菌素、莫西菌素、多拉菌素和爱普利诺菌素的检测方法，旨在为水产品中阿维菌素类药物残留的快速检测提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1试剂。三氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、丙酮、乙酸铵、甲酸均为优级纯；乙腈、甲醇均为色谱纯；硅藻土；其他试剂均为分析纯；水为超纯水。固相萃取柱：Varian C18（500 mg，6 ml），或相当者，使用前依次用15 ml甲醇和10 ml水活化。0.22 μm有机系滤膜。

1.1.2药剂。阿维菌素类药物标准品：阿维菌素，CAS.No：71751412，Lot：21204，97.0%；爱普利诺菌素，CAS.No：123997262，Lot：20516，92.5%；莫西菌素，CAS.No：113507065，Lot：20827，87.0%；伊维菌素，CAS.No：70288867，Lot：10506，96.0%；多拉菌素，CAS.No：117704253，Lot：30516，96.0%。标准储备液：准确称取阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、莫西菌素、爱普利诺菌素标准品各10.0 mg，用乙腈溶解并定容至100.0 ml，配制成100.0 mg/L，4 ℃避光保存。标准工作液：临用前根据需要用乙腈稀释成适当的标准系列工作液。

1.1.3主要仪器。高效液相色谱串联质谱仪（API4000QTRAP）、ASE200快速溶剂萃取仪（美国戴安公司）和真空固相萃取装置。