内蒙古地区猪圆环病毒Ⅱ型感染的血清学调查

薛江东　马德慧　刘锴　杨明霞　姚春雨

摘 要：本实验应用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法对内蒙古地区部分未经PCV-2免疫的猪场猪只780份血样进行抗体阳性检测，结果显示，不同猪场均有PCV-2感染，PCV-2抗体平均阳性率为38.6%（301/780），经产母猪阳性率为38.3%（51/133），后备母猪阳性率为38.7%（46/119）， 种公猪阳性感染率为23.5%（8/34），哺乳仔猪阳性率为42.8%（80/187）， 断奶仔猪阳性率为40.9%（70/171），育肥猪阳性率为33.8%（46/136）。结果表明，内蒙古地区养猪场普遍存在猪圆环病毒II型（PCV-2）感染。

关键词：猪圆环病毒2型；内蒙古；ELISA；抗体检测

Abstract： 780 serum samples from Inner mongolia were collected and detected for antibodies against PCV2 by ELISA.The results showed that the positive samples were detected in all pig farms. The average positive rate of the antibodies against PCV-2 was 38.6%（301/780）， the positive rates of sow， replacement gilt， boar， suckling pig， weaning pig and finishing pig were 38.3%（51/133）， 38.7%（46/119）， 23.5%（8/34）， 42.8%（80/187）， 40.9%（70/171）， 33.8%（46/136）， respectively. The results indicated that PCV-2 prevalence was relatively severe in pig herds in Inner Mongolia.

Key words： procine circovirus Type II； Inner Mongolia； ELISA； antibody testing

猪圆环病毒（Porcine circovirus， PCV）属于圆环病毒科圆环病毒属，是一种二十面体对称、无囊膜、环状单股DNA病毒[1]。 PCV可分为PCV-1和PCV-2两个基因型。PCV-1是从PK-15细胞系上得到的分离株，无致病性[2]；PCV-2具有致病性，能引起断奶仔猪发生多系统衰竭综合征（Post-weaning multisystemic wasting syndrome， PMWS）[3]。我国学者先后通过血清学调查及PCR方法证实PCV-2在国内猪场的存在[4，5]。

PCV-2多为隐性感染，主要侵害机体的免疫系统，导致感染猪免疫抑制，降低对其他病原体的抵抗力，从而继发其他病毒和细菌性疾病，给养猪业造成巨大的经济损失。目前国内部分省市和地区均对PCV-2进行了血清学调查，并显示PCV-2呈普遍感染。本试验利用ELISA方法，对内蒙古地区的猪血清进行了PCV-2抗体检测，以调查内蒙古地区PCV-2的流行情况。

1 材料与方法

1.1 待检血清来源

血样分别采自内蒙古呼和浩特市、锡林郭勒盟等10个地区共20个猪场，通过前腔静脉或耳静脉采集未免疫PCV-2疫苗的种猪和各龄段猪静脉血共780份，分离血清后置于冰箱-20℃保存待用。

1.2 主要试剂和仪器

猪圆环病毒Ⅱ型抗体酶联免疫检测试剂盒（PCV-Ⅱ Antibody ELISA kit）购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，生产批号： PCV20100629E。离心机，37℃恒温箱，自动洗板机（well wash 4MK2，芬兰），酶标仪（Anthos2010，奥地利），微量移液器（Gilson，法国）稀释用96孔细胞培养板。

1.3 PCV-2抗体ELISA检测

具体操作程序和结果判定均按试剂盒说明书进行。

1.4 统计分析

数据运用SPSS 13.0软件进行统计分析。

2 结果

2.1 不同猪群感染PCV-2的情况

通过对内蒙古地区20个猪场共780份血清进行PCV-2抗体ELISA检测，共检出阳性血清301份，总阳性率为38.6%，其中，哺乳仔猪血样共187份，阳性血清80份，检出的阳性率最高，为42.8%，种公猪34份血样中只有8个血样为阳性，检出率最低，为23.5%，具体结果见表1。

2.2 不同猪场猪血清PCV-2抗体检出率

本次检测血清来自内蒙古地区共20个猪场，每个猪场均有PCV-2感染，检出率为100%，其中，兴安盟71个样本中检出45份阳生血清，阳性率达到63.4%，相对其他地区最高，巴彦淖尔市78个血样中有27份为阳性，阳性率为30.7%，相对其他地区为最低，其他地区见表2。

3 讨论

对PCV-2感染血清学调查的前提是未免疫PCV-2疫苗。目前，我国对PCV-2的预防多依赖进口疫苗，造价极高，国产PCV-2疫苗尚处于研制期，部分“国产”疫苗也无切实有效的免疫效果，一般猪场选择不注射疫苗以控制成本的增加，因此，通过对血清中PCV-2抗体的检测即可了解PCV-2在猪群中感染的情况，以便切断传染源净化猪群。

PCV-2在我国普遍存在，多数省、市和自治区均有人做了血清学调查和病毒核酸的检测，有的地区相当严重，李超等对安徽各地PCV-2抗体进行检测，其中皖南地区的PCV-2感染率高达91.5%[6]；曹正等用PCR方法调查江苏省部分地区PCV-2感染情况，结果显示淮安地区部分猪场PCV-2感染率达到91.67%[7]，如此高的感染率将对养猪业造成巨大损失。

本试验调查了内蒙古地区20个猪场PCV-2感染情况，PCV-2抗体阳性率平均为38.6%，这与其他地区调查结果相比偏低。本试验中，种公猪的感染率最低，与其他猪群有显著差异；哺乳仔猪和断奶仔猪的感染率较高，但除了种公猪外，与其他猪群在统计学上并无差异。从地域来看，本试验结果显示兴安盟感染率最高，与其他地区有显著差异；其他地区无统计学上无差别，但明显提示内蒙东部地区PCV-2感染率较西部地区严重。马德慧等2006年对内蒙古部分地区PCV-2感染的血清学调查结果显示，该地区母猪和种公猪的阳性感染率偏高，而哺乳仔猪的血清抗体均为阴性；地域上显示呼和浩特市、锡林郭勒盟猪血清抗体阳性率高，本试验与之相比，结果有明显差别，我们推测造成这样的原因可能是采集的样本量仍然有限，不能代表具体情况；此外，2006年到2010年的这几年中，内蒙古地区的PCV-2在各猪群中的感染可能产生了变化，变化的原因有待于进一步研究分析[8]。

PCV-2多为隐性感染，造成机体的免疫抑制可能导致其他传染病疫苗免疫失败而继发其他传染病，临床上PCV-2多与其他病原联合感染，最常见的是与猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus， PRRSV）。在PCV-2与猪细小病毒（Porcine parvovirus， PPV）或PCV-2与PRRSV联合感染猪体时，不仅提高了PCV-2的增殖，也促进了PCV-2相关病变的产生[9]；Hans等用PCV-2和PRRSV人工感染猪实验，发现PCV-2可加重PRRSV引起的支气管肺炎病理变化[10]，彭长凌等通过实验证实，PCV-2和PRRSV联合感染引起的病变比PRRSV单独感染要严重[11]。

对疫病进行流行病学调查目前一般采用分子生物学方法，即对病原核酸进行PCR检测，血清学调查由于受到注射疫苗后的干扰而具有局限性，在没有注射疫苗的情况下，这两种方法各有优缺点，李超等对安徽PCV-2流行情况调查同时将这两种方法进行了同步对比，检测结果的符合率为99. 37%，PCR法比ELISA法多检出一个样本，显示PCR方法似乎更灵敏些[6]。本试验仅采用血清学方法进行检测，用PCR法有可能会检出更高阳性率。

本次调查涵盖了内蒙古地区生猪养殖相对发达的所有盟市，调查结果具有较高参考价值，为建立PCV-2阴性猪场提供参考资料。（编辑：狄慧）

参考文献：

[1] Lukert P， Boer D E， Dale G F， et al.The Circoviridae. In Virus Taxonomy： Sixth report of the international committee on taxonomy of viruses[C]. New York： Springer Verlag， 1995： 166-168.

[2] Tischer I， Rasch R， Tochtermann G. Characterization of papovavirus and picomavirus-like particles in permanent pig kidney cell lines [J].Zentralblatt fuer Bakteriologie Mikrobiologie und Hygiene Series A， 1974， 226： 153-167.

[3] Allan G M， McNeilly F， Kennedy S， et al.Isolation of porcine circovirus-like viruses from pigs with a wasting disease in the USA and Europe[J].J Vet Diagn Invest，1998，10（1）：3-10.

[4] 郎洪武，张广川，吴发权，等.断奶猪多系统衰弱综合征血清抗体检测[J].中国兽医科技.2000，30（3）：3-5.

[5] 曹胜波，陈焕春，肖少波，等. 猪环状病毒2型的PCR检测方法的建立及应用[J].华中农业大学学报.2001，20（1）：53-56.

[6] 李超，魏建忠，淩英济，等. 安徽省猪圆环病毒2型感染的流行病学调查[J]. 中国微生态学杂志. 2010， 22（4）：330-336.

[7] 曹正，季伟. 江苏省规模化猪场猪圆环病毒2 型感染的流行病学调查[J]. 畜牧与兽医.2011，43（3）：85-88.

[8] 马德慧，乌日娜，杨明霞，等.内蒙古部分地区猪圆环病毒2型（PCV-2）感染的血清学调查[J].内蒙古民族大学学报（自然科学版）.2007， 22（1）：59-61.

[9] Opriessnig T， Meng XJ， Halbur PG. Porcine circovirus type 2 associated disease： update on current terminology， clinical manifestations， pathogenesis， diagnosis， and intervention strategies[J]. J Vet Diagn Invest. 2007， 19（6）：591-615.

[10] Harms PA，Sorden SD，Halbur PG，et al. Experimental reproduction of severe disease in CD/CD pigs concurrently infected with type 2 porcine circovirus and porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Vet Pathol.2001，38 （5）：528-539.

[11] 彭长凌，高崧，刘秀梵.PRRSV人工单独感染及其与PCV2人工联合感染的病理学比较[J].徐州医学院学报.2006， 26（1）：49-52.