酒当归最佳炮制工艺研究*

吴志成，杨锡仓，王明伟，窦 霞，李越峰

1 甘肃中医学院附属医院，甘肃 兰州 730020；2 甘肃中药炮制及质控工程技术研究中心；3 甘肃中医学院中药学院

酒当归最佳炮制工艺研究*

吴志成1，2，杨锡仓1，2，王明伟3，窦 霞1，2，李越峰3

1 甘肃中医学院附属医院，甘肃 兰州 730020；2 甘肃中药炮制及质控工程技术研究中心；3 甘肃中医学院中药学院

目的：建立高效液相色谱法测定酒炒当归和酒浸当归中阿魏酸的含量，筛选出最佳的酒当归临方炮制方法。方法：采用C18色谱柱，以乙腈-0.085磷酸溶液（17∶83）为流动相，检测波长为361nm，对酒当归中阿魏酸的含量进行测定。结果：酒浸当归阿魏酸含量比生当归和酒炒当归阿魏酸含量高。结论：酒浸当归临方炮制工艺最佳；用HPLC方法测定酒当归中阿魏酸的含量，操作简单，可靠，重现性好，可作为当归炮制工艺控制的有效方法。

酒炒当归；酒浸当归；炮制工艺；阿魏酸

当归为伞形科植物当归Angelica sinensis（O1iv.）Die1s的干燥根，为多年生草本植物，具有补血活血，调经止痛，润肠通便之功［1］。当归是甘肃省道地药材，中医临床应用广泛，在中医界有“十医九归”之说。当归历史上南齐有炒法，唐代有酒浸法，宋代有酒洗、酒润、米拌炒、酒拌、酒炒、醋炒等方法［2］。当归的现代炮制品分为：全当归、当归头、当归身、当归尾、酒当归、土炒当归、当归炭［3］。酒当归是当归临床应用的主流饮片之一，具有活血通经之功效［4］。总结前人关于酒当归的传统炮制方法大体上有2种，一种是酒浸当归［5］，另一种为酒炒当归，阿魏酸作为当归指标性成分之一，具有抑制血小板聚集，促进血小板解聚、抗血栓形成、解除血管平滑肌痉挛、抗氧化和自由基，提高膜稳定性以及抗炎、镇痛、增强免疫功能、利肝保湿等作用［6-7］。本研究通过HPLC法检测2种炮制品中阿魏酸的含量，以评估2种炮制方法的优劣，为其临床应用提供参考。

1 材料

1.1 仪器 LC-20AD岛津高效液相色谱仪（岛津公司提供）；工作站（岛津高效液相色谱LC工作站提供）；BSA224S标准型电子天平、CPA225D准微量天平（赛多利斯科学仪器仪器系统有限公司提供）；KQ-250高频数控超声波清洗仪器（昆山市超声仪器有限公司提供）；DJ-02型中药粉碎机（上海淀久中药机械制造有限公司提供）；HHS112型电热恒温水浴锅（江苏省医疗器械厂提供）；具塞三角瓶、容量瓶均符合玻璃仪器要求。

1.2 试药 黄酒（绍兴东江有限责任公司生产，灌装日期及批号：2010年1月10日）；当归（甘肃岷县梅川生产，批号：101107；甘肃岷县岷阳生产，批号：101023；甘肃岷县闾井生产，批号：101115）；阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号：0773-9910）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件［8］色谱柱：C18（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：乙腈-0.085磷酸溶液（17∶83）；柱温：35℃；DAD检测器，检测波长为316nm；流速为1mL/min；进样量：10.0μL。理论板数按阿魏酸计算应不低于5 000。HPLC图见图1。

图1 当归炮制品样品与对照品HPLC图

2.2 酒浸当归和酒炒当归的制备 本样品共3批，每批450g，分成3份，每份150g，其中酒炒当归、酒浸当归样品由甘肃省中药炮制与质控工程技术中心制备，酒当归样品经甘肃中医学院附属医院主任中药师杨锡仓鉴定，符合酒当归（成品性状）项下的规定，酒浸当归按照当归与酒比例10∶3浸润制备。

2.3 溶液制备

2.3.1 对照品溶液的制备［8］取阿魏酸对照品适量，精密称定，加70％甲醇置棕色容量瓶中，制成0.0124mg/mL的溶液，即得。

2.3.2 供试品溶液的制备［8］当归粉碎，过3号筛，称取粉末约0.2g精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇20mL，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放至室温，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清过0.45μm微孔滤膜，取续滤液，即得。

2.4 线性关系的考察 分别吸取“2.3.1”项下0.0124mg/mL阿魏酸对照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、14.0、16.0、18.0、20.0μL进样，以峰面积（y）对进样量（x）进行线性回归计算，得回归方程为y=3095.1x-4.1566（r=0.9999）。结果表明进样量在0.0124～0.248μg时与峰面积呈良好的线性关系。

2.5 稳定性实验 取生当归样品约0.2g，按“2.3.2”制备供试品溶液，在室温条件下，分别于0，2，4，8，12，24小时进样，在“2.1”项色谱条件下测定，峰面积基本不变。阿魏酸峰面积RSD=0.75％，表明阿魏酸在避光条件下24小时稳定性良好。

2.6 精密度实验 精密吸取浓度为0.0124mg/mL的对照品溶液，在“2.1”项色谱条件下连续测定6次，每次进样10μL，阿魏酸峰面积RSD=0.12％，结果表明精密度良好。

2.7 重复性实验 取生当归样品约0.2g，平行6份，精密称定，按“2.3.2”项制备供试品溶液，在“2.1”项色谱条件下测定，计算阿魏酸含量，其RSD=0.8％，表明重复性良好。

2.8 加样回收率实验 取已知含量的炮制品（生当归）样品共6份，称定重量，置具塞三角瓶中，精密加入定量的阿魏酸对照品，按“2.3.2”项制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液进样，在同样色谱条件下测定阿魏酸的含量，计算加样回收率平均为99.49％，结果表明本法回收率高。

2.9 样品阿魏酸含量测定 按“2.3.2”项制备供试品溶液，每一炮制品样品平行3个，取3个平行样品的平均值，不同炮制品当归中阿魏酸含量，见表1。

表1 当归各炮制品中阿魏酸含量测定结果

3 讨论

本研究显示，不同炮制方法的当归饮片所含阿魏酸含量有所不同，其中酒炒当归阿魏酸含量比生当归阿魏酸含量低，但酒浸当归阿魏酸含量比生当归和酒炒当归阿魏酸含量高，腾菲等［9］仅是对各种条件下酒炒当归中阿魏酸含量进行了测定研究，而本研究得出酒浸当归更优，酒浸当归为目前酒当归中最佳的临方炮制工艺。

本研究采用HPLC方法，对酒当归中阿魏酸的含量进行测定，精密度、重现性、稳定性良好，回收率高；操作简单、可靠，重现性好，可作为甘肃道地药材当归质量控制的有效方法。

当归采用不同方法炮制后，其活性成分之一的阿魏酸含量不同，其中酒浸当归的阿魏酸含量最高，生当归次之，酒炒当归最低。在临床应用中，用于抗血小板聚集，增强前列腺素活性，镇痛，缓解血管痉挛，治疗心脑血管疾病及白细胞减少等症时，使用酒浸当归临床疗效会更好。炮制简单方便，比酒炒当归省时省力。因此，规范甘肃道地药材当归的炮制过程，才能有效控制其质量。

［1］张永，高昌琨，严安定.甘肃当归炮制前后HPLC特征图谱及阿魏酸含量测定研究［J］.中国药房，2011，22（47）：4470-4472.

［2］龚千锋.中药炮制学［M］.北京：中国中医药出版社，2007：176-177.

［3］冯宝麟.古今中药炮制新探［M］.济南：山东科学技术出版社，1984：173.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：124-125.

［5］郁洋.当归的炮制研究［J］.中国中医药信息杂志，2006，13（6）：45-47.

［6］刘会荣.阿魏酸钠的药理作用与临床应用［J］.中国药业，2005，14（3）：78-79.

［7］欧仕益，包惠燕，蓝志东.阿魏酸及其衍生物的药理作用研究进展［J］.中药材，2001，24（3）：220-221.

［8］李成义，王延惠，魏学明，等.HPLC测定不同产地当归中阿魏酸的含量［J］.西部中医药，2012，25（1）：34-36.

［9］滕菲，张学兰，张坤.正交试验法优选酒当归的炮制工艺［J］.中华中医药学刊，2009，27（1）：215-217.

Research on the Optimal Processing Technology of DangGui Prepared with Liquor

WU Zhicheng1，2，YANG Xicang1，2，WANG Mingwei3，DOU Xia1，2，LI Yuefeng3
1 University Hospital of Gansu Traditional Chinese Medicine，Lanzhou 730020，China；2 The Center for Chinese Medicine Preparation and Quality Control Engineering Technology of Gansu Province；3 School of Traditional Chinese Materia Medica in Gansu University of Traditional Chinese Medicine

Objective：To screen the best processing method of DangGui（Angelica sinensis）prepared with liquor by establishing HPLC method for the determination of the contents of ferulic acid in liquor-roasted DangGui and liquor-soaked DangGui.Methods：C18column was adopted，the mobile phase：acetonitrile-0.085 phosphoric acid solution（17：83），detection wavelength was 361 nm.The contents of ferulic acid were detected in DangGui processed with liquor.Results：The contents of ferulic acid in liquor-soaked DangGui were higher than those in rude DangGui and liquor-roasted DangGui.Conclusion：The processing technique for liquor-soaked DangGui is the best；the contents of ferulic acid in liquor-processed DangGui are determined by HPLC，the technique is simple，reliable，reproducible，and itcould be an effective method for quality control of processed DangGui.

liquor-roasted DangGui；liquor-soaked DangGui；processing technique；ferulic acid

R283.1

A

1004-6852（2014）01-0040-03

2013-05-27

甘肃中医学院中青年基金项目（编号gsfy-09-22）

吴志成（1973—），男，副主任中药师。研究方向：中药炮制技术以及中药鉴定。