高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定芪黄胶囊中黄芪甲苷含量研究

赵春燕

(神威药业集团有限公司，河北 灵寿 051430)



高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定芪黄胶囊中黄芪甲苷含量研究

赵春燕

(神威药业集团有限公司，河北 灵寿 051430)

目的：采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定芪黄胶囊中黄芪甲苷的含量。方法：样品的前期处理方法采取溶剂提取结合中性氧化铝的方式进行,采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，乙腈-水(30∶70)为流动相，柱温为90℃，流速为0.8mL/min，检测波长为233nm，采取外标法对峰面积进行定量。通过HPLC的检测方法与蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷含量。结果：通过采取高效液相色谱-蒸发光散射检测法，测定黄芪甲苷在芪黄胶囊中的含量在0.75～7.96μg范围内有良好的线性关系，r=0.9997，平均回收率为99.94%(RSD=0.94%)。结论：高效液相色谱-蒸发光散射检测法在对芪黄胶囊中黄芪甲苷含量测定时，具有操作准确、简便的优势，能在较短的时间内测定出芪黄胶囊中黄芪甲苷含量，可为药品质量的检测控制提供科学合理的依据。

芪黄胶囊；高效液相色谱-蒸发光散射检测法；黄芪甲苷；含量测定

芪黄胶囊主要的中草药成分由茯苓和黄芪，以及水蛭和地黄等组成[1]。临床主要功效为生津止渴，养阴益气，以及泄火清热等，治疗的主要病症是由气虚而引起的消渴证[2]。由于该中成药的组成成分较为复杂，当前，对于该中成药的药物成分的检测主要是通过测定地黄的含量来判断药物是否合格，存在一定的片面性，对其他草药含量的测定还没有建立统一的行业规范[3]。为了进一步探索测定芪黄胶囊中黄芪甲苷的含量，为临床药物检测提供更准确和简便的检测方法，根据多年药物含量检测经验，采取高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定芪黄胶囊中黄芪甲苷的含量，为该药品的质量控制提供依据。

1 检测仪器与检测试药

1.1 检测仪器

本次研究中所使用的仪器主要包括二元梯度泵，岛津高效液相色谱仪，SIL-20A自动进样器，紫外检测器；蒸发光散射检测器选用由美国奥泰科技(中国)有限公司生产的ELSD2000型号；以及由日本岛津生产的LC-solution色谱工作站和电子天平。

1.2 检测试药

由黑龙江中医药大学研制的芪黄胶囊(国家批准文号：B200306358，规格：1.5g/粒)；由中国食品药品检定研究院生产的批号为120684-200611的黄芪甲苷作为本次研究的对照品，实验中所使用的乙腈选用色谱纯；实验中所使用的水为自制的纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，乙腈-水(30∶70)为流动相，柱温为90℃，流速为0.8mL/min，检测波长为233nm，采取外标法对峰面积进行定量。

2.2 对照品溶液制备

精密称取黄芪甲苷实验所用的对照药材各1.5g，将其置于60mL棕色量瓶中，加流动相适量使上述对照药材溶解，将其摇匀，稀释至刻度，即得对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备

精密称取黄芪甲苷两种对照药材各1.5g，将其置于60mL棕色量瓶中，加流动相适量使上述对照药材溶解，将其摇匀，稀释至刻度，即得供试品溶液。

2.4 专属性试验

取黄芪甲苷对照品溶液(A)和供试品溶液(B)以及阴性空白样品溶液(C)，分别进样10μL在上述色谱条件下进行，同时记录色谱图。通过图谱可以发现(图1)，研究当中所使用的对照品与供试品之间在相对应的位置上出现了明显的色谱峰，还可以看到供试品色谱的中基线相对较为平稳，同时具有较好的分离度；在该位置上没有色谱峰出现的表明是阴性供试品。通过上述图谱可以得出高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定黄芪甲苷不受杂质对其的干扰。

2.5 线性关系考察

通过采取高效液相色谱-蒸发光散射检测法，测定黄芪甲苷在芪黄胶囊中的含量在0.75～7.96μg范围内有良好的线性关系，r=0.9997，平均回收率为99.94%(RSD=0.94%)。

图1 各溶液图谱

3 讨论

目前，随着糖尿病的发病率越来越高，采用芪黄胶囊治疗的患者也越来越多。该中成药的组成成分较为复杂，当前，对于该中成药药物成分的检测主要是通过测定地黄的含量来判断药物是否合格，存在一定的片面性，对其他草药含量的测定还没有建立统一的标准。因此，采用高效液相色谱—蒸发光散射检测法测定芪黄胶囊中黄芪甲苷的含量，对于今后对芪黄胶囊有效成分的精确测量具有重要的现实意义。

为了进一步探索测定芪黄胶囊中黄芪甲苷的含量，为临床药物检测提供更准确和简便的检测方法[4, 5]。我国2010年国家人民卫生出版社出版的《中国药典》中指出，通过采取高效液相色谱—蒸发光散射检测法可以测定出芪黄胶囊中黄芪甲苷的含量[6]。在本研究中，分别在紫外分光光度计上扫描黄芪甲苷对照品溶液，通过结果可以发现，在233nm波长的状态下，黄芪甲苷处均有较大的吸收率，因此，将检测波长选定为233nm，在该波长的检测条件下，色谱峰的形状较好，同时还能测定两个组分值。高效液相色谱-蒸发光散射检测法在对芪黄胶囊中黄芪甲苷含量测定时，具有操作准确、简便的优势，能在较短的时间内测定出芪黄胶囊中黄芪甲苷含量，可为药品检测的质量控制提供科学合理的依据。

[1] 郭志辉, 刘凤清. 高效液相色谱-蒸发光散射法测定消结安合剂中黄芪甲苷的含量[J]. 山西医药杂志:下半月版, 2009,38(14):645.

[2] 李翔, 朱臻宇, 朱东亮, 等. 高效液相色谱-蒸发光散射检测梯度洗脱法测定黄芪药材中黄芪甲苷的含量[J]. 第二军医大学学报, 2006,27(3):331-333.

[3] 李晓亮, 邵旭, 牛海军, 等. 高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定补阳还五苷酮胶囊中黄芪甲苷的含量[J]. 安徽医药, 2010,14(11):1286-1287.

[4] 徐小利, 陈晓虎, 谢静. 高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定补中益气丸(浓缩丸)中黄芪甲苷含量[J]. 中国药业, 2008,17(19):34-35.

[5] 汤淏, 崔恩忠, 唐安福, 等. 高效液相色谱-蒸发光散射法测定气血双补口服液中黄芪甲苷的含量[J]. 医学研究生学报, 2013,26(3):287-289.

[6] 王鹏, 赵承孝, 李青山, 等. 高效液相色谱-蒸发光散射测定蒙古黄芪中黄芪甲苷的含量及其提取工艺的优化[J]. 中国药物与临床, 2010,10(2):134-136.

(责任编辑：魏 晓)

2014-07-20

赵春燕(1980-)，女，神威药业集团有限公司助理工程师，研究方向为药物分析。

R284.2

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1673-2197(2014)21-0021-01