PIK3CA蛋白异常表达与胃癌临床病理特征的关系

梁 敏 周新科* 刘季芳 石波云

（广州医科大学附属肿瘤医院，广东 广州 510095）

PIK3CA蛋白异常表达与胃癌临床病理特征的关系

梁 敏 周新科* 刘季芳 石波云

（广州医科大学附属肿瘤医院，广东 广州 510095）

目的探讨PIK3CA蛋白异常表达与胃癌临床病理特征的关系。方法选取人胃癌切片114例，记录TNM分期；慢性浅表性胃炎患者胃黏膜15例作为对照。应用免疫组化法检测两组中PIK3CA蛋白的表达。结果胃癌组织PIK3CA蛋白表达水平显著高于对照组（P＜0.01）；PIK3CA蛋白表达水平在N1-N2较N0有明显上升（P＜0.01）；在M1表达较M0有明显上升（P＜0.01）。结论PIK3CA蛋白表达异常可能与胃癌淋巴转移和远处转移相关，PIK3CA蛋白有望成为评价胃癌预后的指标。

PIK3CA；胃癌；免疫组化；淋巴结转移

胃癌是我国最常见的消化系统恶性肿瘤之一，每年新发病例约40多万，我国胃癌年发生率超过世界发病率的40%[1]。PIK3CA是一种原癌基因，编码磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）的催化亚基p110α。在正常情况下，PIK3CA具有调控体细胞增殖、分化、存活等功能；但其突变后导致P13K-Akt途径过度激活, 增加细胞侵袭和转移能力。目前已发现PIK3CA在结直肠癌、乳腺癌、肺癌等多种肿瘤中高度突变，与肿瘤的生长、浸润和转移密切相关[2]。相关研究显示PIK3CA mRNA和蛋白在多种胃癌细胞系中高度表达，并与肿瘤侵袭能力有关[3]。目前关于PIK3CA蛋白表达和人体胃癌标本病理特征之间的关系研究较少，故本研究观察二者之间的关系，为胃癌的治疗效果和预后的判断提供新的指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2011年6月至2013年5月在我院普外科手术切除的原发性胃癌标本114例。所有患者术前均未接受放化疗。其中男68例，女46例，年龄42～78岁，平均年龄58.6岁。收集在我院内镜中心经内镜确诊的慢性浅表性胃炎患者胃黏膜组织标本15例作为对照组，男6例，女9例，年龄38～72岁，平均年龄49.3岁。

1.2 方法

1.2.1 试剂

PIK3CA兔抗人特异性抗体购于上海研生实业有限公司，工作液浓度为1∶75。用已知PIK3CA阳性的胃癌切片作为阳性对照，用磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照。免疫组化试剂盒购于上海国源生物技术有限公司。

1.2.2 胃癌组织中PIK3CA蛋白表达的检测

采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（SP法）。标本切片置于涂有黏合剂的玻片上，65 ℃烘烤40 min，常规脱蜡、脱水；将标本浸泡于3%过氧化氢溶液中10 min。水洗后，加入依地酸盐缓冲液，98 ℃微波修复5 min后用PBS冲洗。置于10%的正常血清中10 min，加入4 ℃一抗12 h，加入生物素标记的SP复合物和二抗各30 min，PBS冲洗。用过氧化氢一二氨基联苯胺显色5 min，水洗，苏木素复染，乙醇脱水，二甲苯透明，封片观察。

1.2.3 PIK3CA蛋白表达结果判定

以细胞质中出现棕黄色颗粒为PIK3CA蛋白表达阳性。将上述切片置于Olympus显微镜下，对所测视野进行准确定位后，由摄像系统进行图象分析。每例随机选取6个完整而不重叠的视野进行分析，测定PIK3CA蛋白表达阳性颗粒的光密度，选取每张切片的均值作为代表胃癌组织PIK3CA蛋白的表达水平。

1.3 统计学方法

用SPSS 16.0统计学软件进行分析，计量资料采用F检验，计数资料采用多个率的χ2检验和确切概率法。

2 结 果

2.1 胃癌和正常组织中PIK3CA蛋白的表达

PIK3CA阳性表达产物定位于胃癌病变组织上皮细胞的胞质中，呈棕黄色或棕褐色颗粒。在胃癌组织中PIK3CA阳性表达显著高于对照组（P＜0.01）。见表1。

表1 胃癌标本和浅表性胃炎标本中PIK3CA蛋白表达水平

2.2 胃癌组中PIK3CA蛋白的表达与临床病理特征的关系PIK3CA阳性表达产物在T1-T2期胃癌组织与T3-T4期相比无明显变化（P＞0.05）；PIK3CA阳性产物在N1-N2表达较N0有明显上升（P＜0.01）；PIK3CA阳性产物在M1表达较M0有明显上升（P＜0.01）。见表2。

Abnormal Expression of PIK3CA in Relation to the Clinicopathological Features of Gastric Cancer

LIANG Min, ZHOU Xin-ke*, LIU Ji-fang, SHI Bo-yun
(The Affiliated Cancer Hospital, Guangzhou Medical University, Guangzhou 510095, China)

ObjectiveTo investigate the abnormal relationship between the expression of PIK3CA and the clinicopathological features of gastric cancer.Methods114 cases of human gastric cancer were selected and recorded TNM staging; 15 cases of chronic superficial gastritis were picked as control group. PIK3CA expression was detected by immunohistochemistry.ResultsPIK3CA protein expression in gastric cancer was significantly higher than control group(P＜0.01). PIK3CA protein expression in N1-N2has significantly increased compared with N0(P＜0.01). PIK3CA expressed in M1 has increased significantly compared with M0(P＜0.01).ConclusionsThe abnormalities of PIK3CA may be associated with gastric cancer lymph node and distant metastasis. PIK3CA protein is expected to be evaluated gastric cancer prognosis holpfully.

PIK3CA; Gastric cancer; Immunohistochemistry; Lymph node metastasis

R735.2

B

1671-8194（2014）16-0007-02

广州医科大学博士启动基金项目（编号：2012C68）；广东省教育厅科研基金项目（编号：2013KJCX0153）

*通讯作者