杨梅凋萎病综合防治技术试验

任海英，戚行江，梁森苗，郑锡良

杨梅凋萎病综合防治技术试验

任海英，戚行江*，梁森苗，郑锡良

（浙江省农业科学院 园艺研究所，浙江 杭州 310021）

通过伤口涂抹剂、硫酸亚铁、生物制剂、植物油助剂及综合防治技术对杨梅凋萎病的防治效果进行了研究。结果表明，修剪伤口涂抹苯醚甲环唑和咪鲜胺农药膏剂等能有效防止病菌的侵入，防效均为100%。0.1%～0.4%的硫酸亚铁溶液对杨梅凋萎病的预防作用较好，防效45%～88%，其中0.4%的硫酸亚铁溶液防效最好。好快、申嗪霉素和井冈·蜡芽菌3种生物制剂对杨梅凋萎病均有一定预防作用，防效48%～55%，其中好快预防效果最好。植物油助剂怀农特能增强咪鲜胺和苯醚甲环唑在盆栽试验中对杨梅凋萎病的预防和防治效果。经过3年针对性农药的合理使用，2年的综合防治，瑞安、天台和仙居的3个杨梅果园中凋萎病都得到有效控制，防效89.9%～96.1%。表明该文研究的综合防治技术能有效防治杨梅凋萎病。

杨梅凋萎病；伤口涂抹剂；七水硫酸亚铁；生物制剂；植物油助剂；综合防治技术

杨梅（Myrica rubra）是我国南方特有的珍稀水果，果实甜酸适口，风味独特，逐步成为浙江省的特色主产水果。凋萎病是近年来为害杨梅产业的主要病害，首先引起杨梅部分嫩梢干枯，然后整株树的嫩梢干枯数量逐渐增多，一般3～5年整株死亡［1-2］。凋萎病发生后影响杨梅树体对氮、钙等营养元素的吸收和传递［3-4］，根际菌根活力降低［5］。凋萎病发病速度快，传染力强，如不及时控制传播，必将严重威胁到杨梅产业的可持续发展。

杨梅凋萎病的病原菌为异色拟盘多毛孢（Pestalotiopsis versicolor）和小孢拟盘多毛孢（P. microspora）［2］，主要定殖于杨梅枝干及嫩枝韧皮部［2］，具有很强的环境适应力［6-7］。 拟盘多毛孢属真菌还能寄生于杨梅叶片引起叶斑病［8-9］。拟盘多毛孢主要是以内生菌的形式存在，但也是重要的植物病原菌，引起多种植物病害，如茶轮斑病、枇杷灰斑病、咖啡轮斑病、 苹果叶斑病等［10-15］。 随着近年来杨梅产业商业化栽培模式的扩大，农药在病害防治中发挥着重要作用，但可能由于栽培模式和环境的改变，致使拟盘多毛孢这种本来不是主要病原菌的真菌引起杨梅致命的病害。

针对拟盘多毛孢的病原研究较多，但有关拟盘多毛孢病害防治技术方面的研究则不多。曾报道采用50%多菌灵·施保功可湿性粉剂 （1.00 kg· hm-2）和68%多菌灵·代森锰锌可湿性粉剂（2.50 kg·hm-2）能有效防治枇杷叶斑病，防效分别可达93.27%和80.34%［16］。但枇杷叶斑病是叶部病害，而杨梅凋萎病病菌定殖于枝条的韧皮部内，所以防治方法不能全盘套用。梅农管理杨梅果园习惯多选择多菌灵、福美砷、链霉素、甲基托布津和代森锰锌等，在春梢、夏梢、秋梢等萌发生长期用药，都无法有效控制凋萎病的发生。目前生产尚无防控该病的有效方法，原因是上述果农习惯使用的农药对该病原菌的室内毒力效果较差，苯醚甲环唑、咪鲜胺等5种农药虽然室内抑菌效果较好，但果园内在春梢、夏梢和秋梢3个阶段的单纯喷雾用药方法对该病害防效不理想［17］。

综合防治技术一直在植物病害防治中发挥着重要作用［18-21］，所以本研究就一些伤口涂抹药剂、硫酸亚铁、生物制剂和植物油助剂对杨梅凋萎病的预防和治疗效果进行了研究，对苯醚甲环唑等5种农药的使用方法、使用时间进行改进，优化一些修剪和施肥等农业措施，集合出一套有效的杨梅凋萎病综合防治技术。

1 材料与方法

1.1 凋萎病菌分生孢子溶液制备

2个凋萎病菌菌株P.versicolor XJ27和P. microspora YS26，分别采自浙江仙居和药山的杨梅树凋萎病发病嫩梢，利用组织分离法纯化得到，科赫氏法则鉴定致病性，本实验室保存。在PDA平板上，25℃下12 h/12 h（光照/黑暗，1 000 1x）培养5 d，用无菌水洗下2个菌株的分生孢子，配成2个菌株的分生孢子混合液，XJ27和YS26分生孢子比例为1：1，总分生孢子浓度为2×105个孢子·m L-1。

1.2 凋萎病菌接种方法

选择直径为0.6～0.9 cm的1年生东魁杨梅枝条，每根枝条在离顶端5 cm处小心去除叶片1枚，在叶痕位置接种分生孢子悬浮液20μL，以接种灭菌水作为对照，棉花吸水保湿，保鲜膜轻轻缠绕固定。接种后的枝梢用适当大小塑料袋轻轻套住保湿96 h。除非特别说明，置于25～30℃温室内75%～85%相对湿度下培养。

1.3 盆栽试验用杨梅植株

长势一致的1年生嫁接东魁杨梅苗定植在黑色无纺布的美植袋内，基质由黄心土：珍珠岩：泥炭70：15：15（V/V）混合制成，另加入控释肥4 kg ·m-3（美国辛普劳公司研制生产，N 21%，P2O57%，K2O 8%，Mg 0.5%，Cu 0.05%，Fe 1.55%，Mn 0.05%，Mo 0.000 6%，Zn 0.05%）。容器苗置于玻璃温室内备用，25～30℃，相对湿度75%～85%。待成活长成2年生的杨梅容器苗时，选择长势一致的健康植株备用。

1.4 预防和治疗效果的盆栽试验

1.4.1 3种伤口涂抹药剂的使用技术

选择2年生的东魁容器苗，于2013年12月19号定植于浙江农业科学院试验基地 （杭州） 露天环境内，试验进行3个月，至3月19号结束，温度5～18℃，相对湿度38%～79%。选择1年生枝条，在距顶端5 cm左右的位置小心拉掉叶片1枚，叶片拉掉后0，2，4，6，8周后，用软毛刷小心把咪鲜胺膏剂 （发明专利申请号20140017441.2）、苯醚甲环唑膏剂 （发明专利申请号201410017807.6）或愈合5绝 （开封森诺生物科技有限公司）分别均匀涂抹至不同的叶痕位置，不涂抹药剂的设为对照，然后在涂抹药剂或不涂抹药剂的对照枝条伤口处用移液器吸取20？L的病菌孢子悬浮液，以脱脂棉吸水覆盖，保鲜膜缠绕固定。每棵杨梅苗接种3个枝条，每枝条算1次重复，每处理设3棵杨梅苗，共9次重复。

1.4.2 硫酸亚铁溶液的使用技术

预防试验。0.1%，0.2%和0.4%的硫酸亚铁溶液均匀喷雾杨梅植株，48 h后按1.2方法接种病菌分生孢子溶液。

治疗试验。按1.2方法接种病菌分生孢子溶液，48 h后使用上述硫酸亚铁溶液均匀喷雾杨梅植株。只接种病菌不喷硫酸亚铁溶液的设为对照。每棵杨梅算1次重复，每处理重复9次。

1.4.3 3 种生物制剂的使用技术

预防试验。以1 000倍的1%申嗪霉素悬浮剂（上海农乐生物制品股份有限公司，商品名称绿群悬浮剂）、2%井冈-8亿个/克蜡芽菌悬浮剂 （上海农乐生物制品股份有限公司，商品名称真灵）和好快 （山东三碘生化科技有限公司，植物防卫反应诱导因子）均匀喷雾杨梅植株，48 h后按1.2方法接种病菌分生孢子。

治疗试验。按1.2方法接种病菌分生孢子，48 h后上述生物制剂溶液均匀喷雾杨梅植株。只接种病菌不喷生物制剂溶液的设为对照。每棵杨梅算1次重复，每处理重复9次。

1.4.4 植物油助剂对农药的药效影响

选择任海英等［17］筛选出的喷雾具有较好防效的咪鲜胺 （25%乳油，江苏辉丰农化有限公司）和苯醚甲环唑药剂 （10%水分散粒剂，江苏耕耘化学有限公司），各配制1 000倍和1 500倍溶液单独使用，或者怀农特植物油助剂 （浙江农资集团金泰贸易有限公司）按1：1 000比例均匀混合到上述药剂溶液内备用。

预防试验。上述农药和助剂溶液均匀喷雾杨梅植株，48 h后按1.2方法接种病菌分生孢子。

治疗试验。按1.2方法接种病菌分生孢子，48 h后使用上述农药和助剂溶液均匀喷雾杨梅植株。只接种病菌不喷农药和助剂溶液的设为对照。每棵杨梅算1次重复，每种处理重复9次。

1.5 果园综合防治

1.5.1 试验用果园

选择瑞安、天台和仙居8～15年杨梅园，每个果园面积3～10 hm2，海拔100～400 m。凋萎病从2009年初步发现，至2010年严重的枝条发病率已达到5%。2011年开始在试验果园采用本试验室筛选的针对凋萎病菌毒力较强的5种杀菌剂（咪鲜胺、苯醚甲环唑、丙环唑、吡唑醚菌酯、异菌脲），2012-2013年全面采用综合防治技术。果园边缘地理距离不超过500 m，地形相近，采用普通管理技术的杨梅园设为对照。

1.5.2 对照果园管理技术

杀菌剂使用技术。果农习惯使用的百菌清、甲基硫菌灵、代森锰锌、多菌灵、甲基托布津等杀菌剂，在杨梅春梢抽生后1 cm左右、杨梅采摘前40 d、杨梅采摘后、秋梢抽生1 cm左右各使用1次，一般2种农药随机混合使用，相邻2次用药种类不重复。按照农药的使用说明，一般是1 000～2 000倍均匀喷雾。冬季修剪全部完成后，从修剪开始到完全结束，一般农户需要3～60 d，再统一使用石硫合剂清园。

生物制剂使用方法。果农的普通管理技术几乎不使用任何生物制剂。

肥料使用方法。果农一般是在冬季一次性施入高钾复合肥和尿素，每棵树5～10 kg。

修剪。果农修剪常常是1把剪刀在果园内连续使用，不区分健康与发病枝条随机修剪，修剪中没有任何消毒措施。病枝的修剪只剪到干枯部分。夏季大枝修剪没有任何伤口处理措施，或油漆涂抹伤口。

1.5.3 综合防治果园的管理技术

杀菌剂使用技术。选择任海英等［17］室内毒力试验具有较好抑菌效果的咪鲜胺 （25%乳油，江苏辉丰农化有限公司）800倍、苯醚甲环唑药剂（10%水分散粒剂，江苏耕耘化学有限公司）2 000倍、丙环唑 （25%乳油，98%原药江苏七洲绿色化工股份有限公司）2 000倍、50%吡唑醚菌酯（凯润） 水分散剂 （德国巴斯夫公司）1 500倍、异菌脲 （50%悬浮剂，98%原药，德国拜耳公司）1 000倍，按1/1 000比例加入好快 （植物防卫反应诱导因子）。杨梅花芽萌动期 （2月上中旬）、春梢抽生后1 cm左右、杨梅采摘后、秋梢抽生1 cm左右各使用1次，单种农药轮流使用，相邻2次用药不重复。冬季修剪时，每修剪完一棵树，及时均匀喷雾药液，包括叶片、树干、树枝和树冠地下。

肥料使用方法。冬季使用饼肥或腐熟有机肥做基肥，每棵树10～20 kg。杨梅专用全价缓释肥料（硫酸钾型） （浙江农业科学院园艺研究所开发，山东菏泽金正大生态工程有限公司加工，有机质≥30%，N 7%，P2O55%，K2O 23%）为壮果肥，每株5～10 kg。杨梅有机专用肥 （山东硕丰有机生态科技有限公司，有机质≥40%，N+P2O5+ K2O≥4%，腐殖酸≥30%，黄腐酸钾≥12%）采后肥施入，每株10 kg。

修剪。健康枝条与发病枝条分开修剪，或者先剪健康枝条再修剪发病枝条。修剪过程中1～2 h用75%酒精仔细擦拭一下剪刀。修剪病枝条时不是只剪截干枯部分，而是一直剪截到枝条的木质部、韧皮部完全表现健康的位置，伤口直径大于1 cm的涂抹伤口保护药剂。夏季大枝修剪的大伤口一定用涂抹药剂均匀仔细涂抹伤口。

生物制剂使用。500倍的1%申嗪霉素悬浮剂，500倍的2%井冈-8亿个/克蜡芽菌悬浮剂，每年1次，与基肥一起施入土壤内。

1.6 病情调查方法

1.6.1 盆栽试验调查方法

容器苗接种后30 d调查病情级数，计算病情指数。

病情指数 （DI）=［∑ （病级枝数 ×该级代表数值） ×100］/（调查总枝数×9）。

病情指数分级标准如下：0级，无叶片干枯或者掉落；1级，接种枝条上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤10%；3级，10%＜接种枝条上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤25%；5级，25%＜接种枝条上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤50%；7级，50%＜接种枝条上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤75%；9级，75%＜接种枝条上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤100%。

1.6.2 果园试验调查方法

田间发病率防效调查在12月初发病稳定后进行，采用5点取样法，在每个果园离边缘3 m的位置开始取样，每点调查3棵树，每棵树算1次重复，每处理共调查15棵树，共15次重复。

每棵树的病情指数分级标准如下：0级，整个树体无发病枝梢；1级，整个树体的发病枝梢≤10%；3级，10%＜发病枝梢占整个树体的总枝梢数≤25%；5级，25%＜发病枝梢占整个树体的总枝梢数≤50%；7级，50%＜发病枝梢占整个树体的总枝梢数≤75%；9级，75%＜发病枝梢占整个树体的总枝梢数≤100%。

1.6.3 数据分析

分别统计杨梅果园试验2011-2012年的发病情况。

病情指数/%=［∑ （各级发病株数×相对级数值）］ ×100/（调查总株数 ×9），3个试验地点的病情指数取2年的平均值，依次计算防治效果。用DPS软件的Duncan’s新复极差法分析差异显著性。

2 结果与分析

2.1 3种涂抹药剂杨梅凋萎病的防效

研究发现，在杭州冬季露天环境内，12中旬至3月中旬，温度在5～18℃、相对湿度38%～79%时，新鲜伤口不涂抹药剂，接种病菌1周后就开始有部分叶片失水，1个月后所有接种枝条全部发生叶片青枯或干枯，整个接种枝条死亡，病情指数达到100%。而在伤口上立即涂抹保护药剂，咪鲜胺膏剂、苯醚甲环唑膏剂和愈合5绝处理过的枝条均无任何枝条发病，病情指数为0，防效达100%，优于苯醚甲环唑和咪鲜胺喷雾防治效果。制造伤口后2，4，6，8周再接种凋萎病菌分生孢子溶液，无论是否涂抹伤口保护剂，均无枝条发病。

2.2 硫酸亚铁喷雾对杨梅凋萎病的防效

试验结果发现，硫酸亚铁溶液对杨梅凋萎病有一定的预防和治疗作用，且预防效果优于治疗效果，其中0.4%的硫酸亚铁溶液预防作用的防效最好，达到 （88±4.3）%，0.2%的硫酸亚铁溶液其防效也达到 （76±3.5）%，而先喷病菌分生孢子溶液再喷硫酸亚铁溶液的处理有一定治疗作用，但大大低于先喷硫酸亚铁溶液的处理，防效为11%～42%（表1）。

表1 硫酸亚铁溶液对杨梅凋萎病的预防和治疗效果

2.3 3种生物制剂对杨梅凋萎病的防效

3种生物制剂对杨梅凋萎病均有一定预防作用，防效48%～55%，其中好快预防效果最好，防效达 （55±3.5）%。但对病害的治疗作用较差，防效只有15%～27%，其中申嗪霉素防效最好，防效达 （27±2.4）%（表2），相比苯醚甲环唑和咪鲜胺防效略差。

表2 3种生物制剂对杨梅凋萎病的预防和治疗效果

2.4 怀农特对农药具有减量和增效作用

表3显示，咪鲜胺和苯醚甲环唑在盆栽试验中对杨梅凋萎病有较好的预防效果，防效79%～100%，其中苯醚甲环唑的防效优于咪鲜胺，1 000倍苯醚甲环唑溶液、1 000倍苯醚甲环唑+1 000倍怀农特溶液和1 500倍苯醚甲环唑+1 000倍怀农特溶液防效无显著性差异，分别是94%，100%和100%。咪鲜胺和苯醚甲环唑在盆栽试验中对杨梅凋萎病也有较好的治疗效果，防效54%～77%，其中苯醚甲环唑的防效也优于咪鲜胺，1 000倍苯醚甲环唑溶液+1 000倍怀农特溶液和1 500倍苯醚甲环唑+1 000倍怀农特溶液，防效分别为77%和74%，无显著性差异，优于1 000倍苯醚甲环唑溶液的防效。怀农特本身对病害的防效不显著。

表3 怀农特对农药的减量及增效作用

2.5 综合防治技术对杨梅果园凋萎病发生的有效控制

表4显示，经过3年针对性农药的合理使用及2年的综合防治，瑞安、天台和仙居的3个杨梅果园凋萎病都得到有效控制，防效89.9%～96.1%，树势健康中庸。对照果园从2009年开始发病到2013年12月底调查，3个果园85%以上的树体濒临死亡，发病率均达到100%，病情指数都超过73%。

表4 2年综合防治对杨梅果园凋萎病的防效

3 小结和讨论

在冬季杭州的露天环境内，从12中旬到3月中旬，所有枝剪伤口和叶痕位置接种病菌后都发生凋萎病死亡。浙江杨梅的主产区台州和温州等地，冬季温度较杭州更高，温差更小，相对湿度更大，所以冬季在杨梅果园内修剪的伤口和叶片脱落后的叶痕位置应成为凋萎病菌侵入的重要时间和位置。但杨梅果园的传统管理方法中，石硫合剂是冬季清园的常用药剂，对杨梅凋萎病菌的毒力效果很差［17］，加上浙江冬季温度较高，相对湿度较大，这使凋萎病菌在冬季杨梅叶片脱落和修剪伤口较多时更易侵入杨梅树体，积累致病，故冬季杨梅园内仍经常发现青枯及干枯的凋萎病树枝。所以要高度重视杨梅果园的冬季管理，采用有效的清园方法。

20世纪90年代对加强病害的冬季防治措施已受到重视［20］，但药剂选择还是以矿质肥料为主。已有研究证据表明，冬季新鲜修剪伤口是葡萄干腐病的主要侵染入口，施用药剂及时保护新鲜伤口能有效防止病菌的侵入［22-23］。杨梅实际管理中伤口的保护一直未受到应有的重视。本研究中伤口涂抹保护剂能有效保护杨梅免受凋萎病菌的侵染，建议杨梅果园管理中推广应用。

硫酸亚铁对人们的生产生活发挥着重要的作用，可用于水的絮凝净化，也可用作农药防治小麦黑穗病、苹果和梨的疤痂病、果树的腐烂病，还可用做铁质强化剂、果蔬发色剂等营养增补剂，也可作为植物铁元素的补充剂，防治植物因缺铁而发生的生理性病害。10%硫酸亚铁和1%粗硫酸可有效地进行葡萄黑痘病的苗木消毒［24］，硫酸亚铁还能诱导苹果树和西瓜产生抗病性［25-26］。笔者研究发现，硫酸亚铁能抑制凋萎病菌分生孢子萌发。本文研究结果显示，硫酸亚铁溶液对杨梅凋萎病有预防和治疗作用，而且在试验浓度下对杨梅没有毒害作用，可配合农药交替使用，以减少农药的使用量。另外杨梅为无外果皮的裸果，安全问题一直备受重视，目前生产上在杨梅成熟前40 d内禁止使用任何农药，但这可能对杨梅病虫害的侵入提供机会，在杨梅果实成熟前合理使用硫酸亚铁将会既降低使用农药的风险，又达到病害预防和防治的目的。

生防菌在果树系统性病害防治中具有重要的应用意义，例如铜绿假单胞菌防治香蕉枯萎病［27］。本研究发现，生防菌对杨梅凋萎病有一定的预防和治疗作用，且本课题组研究发现，与健康树体相比，凋萎病发生严重的树体根围菌群变化较大，这提示我们可以根据根围生态的变化，开发研究对杨梅根围改善效果更好的生防制剂进行土施，增强生物制剂对杨梅健康生长的作用。

怀农特是近年来农药公司新开发的能增强药效、有一定防病杀虫效果的天然无毒植物油助剂，能降低喷雾药液的表面张力，提高农药产品在植物表面的粘附性、展着性和渗透性，减少农药的使用量，提高药效。但这类产品价格较贵，在杨梅病害防治中大面积推广可能成本较高。可适量推广，同时开发更经济和安全的农药助剂。

综合防治技术一直在植物病害防治中发挥着重要作用［18，20-21］。 本研究的综合防治技术，不但使用了通过室内毒力评价筛选出的有针对性的农药，更重要的是对化学农药的使用时间和方法进行了改进，而且强调冬季清园以及芽体萌动、枝梢抽生前使用上述农药，强调修剪完成和采果完成后马上使用农药可防止病害侵入。针对修剪过程，强调病枝和健康枝分别修剪，且注意剪刀及时消毒。筛选到的5种农药虽然杀菌机理不尽相同，但如果过量连续使用，不但会引起农药残留过高，还会引起病菌的抗药性问题。所以本文综合防治技术引进了生物制剂，有诱导植物产生抗性的好快，也有改良生态环境的申嗪霉素和蜡芽菌。综合防治技术的重点是要培养健康中庸的树势，既能抵抗病菌的侵入，又能保证一定的结果量。研究建议减少化学肥料的使用，增加杨梅有机肥及缓释肥的使用。

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［27］ 余超，肖荣凤，刘波，等.生防菌FJAT-346-PA的内生定殖特性及对香蕉枯萎病的防治效果 ［J］.植物保护学报，2010，37（6）：493-498.

（责任编辑：张瑞麟）

0528-9017（2014）12-0000-00

文献著录格式：任海英，戚行江，梁森苗，等.杨梅凋萎病综合防治技术试验 ［J］.浙江农业科学，2014（12）：0-0.

2014-08-04

浙江省重大科技专项重点农业项目 （2012C12009-5）；国家公益性行业 （农业）科研专项 （201203089）

任海英（1974–），女，副研究员，博士，研究方向果树病理学。E-mai1：renhy@mai1.zaas.ac.cn。

戚行江，男，研究员，从事果树育种、栽培及病理学研究工作。E-mai1：qixj@mai1.zaas.ac.cn。

注：感谢仙居县林业局王康强推广研究员、天台县特产技术推广站王继灿高级农艺师、临海市特产技术推广总站颜丽菊高级农艺师和朱潇婷对试验做出的帮助。