廊坊市汉族女性MTHFR与MTRR基因多态性分析

李俊华，鲁衍强，马少杰*，赵玉娟，杨 琦

(1.廊坊市妇幼保健中心，河北廊坊065000;2.上海靶向分子医学研究所，上海200433;3.中国疾病预防控制中心妇幼保健中心，北京100101)

5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5，10-methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)和甲硫氨酸合成酶还原酶(5-methyltetrahydrofolate-homocysteine methyltransferase reductase，MTRR)是参与体内叶酸代谢的关键酶，其基因多态性会影响体内叶酸及同型半胱氨酸水平，与神经管畸形、复发性流产、妊娠期高血压疾病的发生密切相关，严重影响母婴健康。

本研究针对廊坊市汉族女性，开展大样本的分子流行病学调查，旨在阐明本地区人群的遗传特征，为个体化的孕期保健提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料:选取自2013年6月至2014年1月在廊坊市妇幼保健中心进行孕前与孕期检查的汉族女性，排除籍贯非本市者，入组对象共1 267 例，平均年龄(27.3 ±4.9)岁。根据知情同意原则，采集口腔黏膜细胞。

1.2 方法:利用硅胶吸附方法提取口腔黏膜细胞样本的基因组DNA。采用荧光定量PCR 技术，检测MTHFR C677T、A1298C 和MTRR A66G 的基因多态性。

1.3 统计学分析:采用SPSS19.0 软件进行统计学分析，应用HaploView4.2 软件进行SNPs 的Hardy-Weinberg 平衡、LD水平和单倍型结构分析。

2 结果

2.1 Hardy-Weinberg 平衡分析:MTHFR C677T、A1298C 和MTRR A66G 基因多态性，检验结果符合Hardy-Weinberg 遗传平衡，说明样本具有本区域群体代表性。

2.2 MTHFR 和MTRR 基因型和等位基因频率:如表1、表2所示，MTHFR C677T、A1298C 位点和MTRR A66G 位点的基因型和等位基因频率。

2.3 MTHFR C677T 和A1298C 两位点连锁情况及单倍型分析:MTHFR C677T 和A1298C 两位点组合情况见表3。单倍型分析表明，存在3 种组合:677T-1298A(58.3%)、677C-1298A(28.1%)、677C-1298C(13.6%)。两位点间存在完全连锁不平衡现象(D'=1)，与贵州布依族和苗族人群的报道类似［1］。

表1 廊坊市汉族女性MTHFR、MTRR 基因型频数和频率Table 1 MTHFR and MTRR genotype distribution and frequencies among Han women in Langfang City［n(%)］

表2 廊坊市汉族女性MTHFR、MTRR 等位基因频数和频率Table 2 MTHFR and MTRR allele frequencies among Han women in Langfang City［n(%)］

表3 MTHFR C677T 和A1298C 连锁型分布Table 3 MTHFR C677T and A1298C linkage analysis［n(%)］

3 讨论

出生缺陷是中国严重的公共卫生问题和社会问题。河北是中国出生缺陷高发省份之一，2001—2012年出生缺陷监测结果显示，出生缺陷总发生率呈逐年上升趋势，先天性心脏病、多指(趾)、总唇裂、总外耳其他畸形、先天性脑积水、神经管畸形是排名前6 位的出生缺陷种类［2］。出生缺陷的发生受环境、营养和遗传因素的共同影响。作为参与体内叶酸代谢的关键酶，MTHFR C677T 和A1298C 位点的多态性会降低酶活性，影响叶酸代谢和利用，与神经管畸形、先天性心脏病、唇腭裂、唐氏综合征等出生缺陷，以及复发性流产、妊娠期高血压等孕期疾病密切相关。

廊坊市汉族女性MTHFR C677T、A1298C 和MTRR A66G位点多态性与其他地区［3］汉族女性的频率存在差异。这种差异可能与人群对多种疾病的群体易感性有关。北方饮食习惯所致的膳食叶酸摄入不足(营养因素)在MTHFR、MTRR基因多态性(遗传因素)的作用下，更增加了神经管畸形、先天性心脏病、唇腭裂等出生缺陷的发病风险。遗传因素如何与营养因素、环境因素综合作用导致出生缺陷的发生，仍需深入研究。

［1］张婷，谢渊，李毅，等.贵州3 个民族亚甲基四氢叶酸还原酶基因的遗传多态性［J］.重庆医学，2013，42:3413-3415.

［2］李进华，张英奎，赵丽娜，等.2001～2012年河北省主要出生缺陷发生率及变化趋势分析［J］.中国妇幼保健，2013，28:4767-4771.

［3］王维鹏，鲁衍强，芮欣忆，等.湖北省汉族女性亚甲基四氢叶酸还原酶和甲硫氨酸合成酶还原酶基因多态性分布研究［J］.中国妇幼保健，2013，28:140-143.