韩金潭, 刘群, 王赛, 康莲莲, 杨荣
(西南民族大学生命科学与技术学院, 四川 成都 610041)
藏药绿萝花对正常小鼠糖耐量影响的试验研究
韩金潭, 刘群, 王赛, 康莲莲, 杨荣
(西南民族大学生命科学与技术学院, 四川 成都 610041)
探讨藏药绿萝花的降血糖作用, 为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据. 以L9(34)正交设计试验获得绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料, 将实验动物分为空白组、高、中、低剂量绿萝花组和阳性药物组, 以尾静脉血糖值、糖耐量曲线下面积为检测指标, 研究不同剂量绿萝花对正常小鼠糖耐量影响. 实验结果: 灌胃后30min, 高剂量绿萝花血糖值(11.72 mmol/L)与中剂量绿萝花组血糖值(11.41mmol/L)显著低于空白组(P<0.05); 三个剂量绿萝花组的糖耐量曲线下面积无显著差异(P>0.05), 但都均低于空白对照组的糖耐量曲线下面积, 尤以中、高剂量绿萝花和盐酸二甲双胍片效果较明显. 研究结果表明: 绿萝花在连续服用5d后具有抑制机体对葡萄糖吸收的能力、增强机体对糖耐受的能力.
藏药绿萝花; 血糖含量; 糖耐量曲线下面积
藏药绿萝花[Scindapsus aureus(Linden ex Andre) Engl]产于西藏寒冷地带及喜马拉雅山脉区域, 为天南星科喜林芋属植物绿萝花的干燥花蕾[1]. 《藏医养身图说》记载, 藏药绿萝花主治冠心病、糖尿病、高血压、血管炎、高血脂、脉管炎等[2]. 西藏民间常将绿萝花晾干泡水饮用,作为预防和治疗高血脂、糖尿病等慢性疾病. 本研究采用水萃取法制备绿萝花干膏制剂, 将实验动物分为空白组和不同剂量的绿萝花组, 采用尾静脉血糖值、糖耐量曲线下面积作为检测指标, 研究不同剂量的绿萝花对正常小鼠糖耐量的影响, 旨在为藏药绿萝花的降血糖作用与临床合理用药提供科学依据, 现将研究结果报告如下.
1.1 实验动物
4周龄ICR雄性小鼠, 50只, 18~22g(由成都达硕有限公司提供, 批号: 0011221).
1.2 受试药物藏药绿萝花由成都国际商贸城荷花池中药材专业市场提供. 由四川省兽药监察所鉴定. 室温密封干燥保存.
1.3 主要试剂和仪器
盐酸二甲双胍片(哈尔滨同仁堂药业有限公司, 批号: 2013010431); 血糖仪(罗康全活力型血糖仪, 批号: 0508852001); 血糖试纸(罗康全活力型血糖试纸, 批号: 23464623); PH检测仪(METTLER TOLEDO, 批号: 20050281)等.
2.1 绿萝花口服液的制备
以L9(34)正交设计试验获得绿萝花水萃取干膏制剂(浸泡0.5h、20倍加水量、煎煮4次、煎煮时间1h), 所得干膏率为24.5%, 4℃冰箱保存. 将干膏换算成生药含量并配制成50%、100%、200%浓度的口服液, 4℃冰箱保存备用.
2.2 动物分组及处理
ICR雄性小鼠50只, 适应性喂养7天. 随机分为5组, 每组10只. 各组处理如下:
空白组: 常规饲养, 正常饮水, 灌服25%的葡萄糖水0.5 ml/d/只, 连续5d;
高剂量组: 常规饲养, 正常饮水, 灌胃200%浓度的绿萝花口服液0.5 ml/d/只(口服液中加入25%的葡萄糖),连续5d;
中剂量组: 常规饲养, 正常饮水, 灌胃100%浓度的绿萝花口服液0.5 ml/d/只(口服液中加入25%的葡萄糖),连续5d;
低剂量组: 常规饲养, 正常饮水, 灌胃50%浓度的绿萝花口服液0.5ml/d/只(口服液中加入25%的葡萄糖),连续5d;
阳性药物组: 常规饲养, 正常饮水, 每天灌服二甲双胍片溶液(250 mg/kg, 口服液中加入25%的葡萄糖), 连续5d.
2.3 检测指标
各组实验动物在第5次灌胃前禁食6h(正常饮水), 第5次灌胃前测得的各组实验动物的血糖值作为零基准血糖值, 第5次灌胃后15min、30 min、60 min、120 min血糖仪测尾静脉血糖含量, 计算糖耐量曲线下面积.
糖耐量曲线下面积计算公式[3]:
0-120min曲线下面积(AUC)(mmol/L·h)=[(BG0+BG15)×0.25/2]+[(BG15+BG30) ×0.25/2]+[(BG30+BG60) ×0.5/2]+[(BG60+BG120) ×1/2](BG分别代表糖负荷后各时间点的血糖值)
2.4 实验数据处理
3.1 小鼠血糖含量
各组小鼠血糖值的变化见表1、表2, 图1、图2.
表1 各组血糖值组内变化(mmol/L,n=10)Tab.1 The change value of the blood glucose level intra-group at each time(mmol/L,n=10)
表2 各组血糖值组间变化(mmol/L ,n=10)Tab.2 The change value of the blood glucose level inter-group at each time(mmol/L ,n=10)
图1 血糖值组内比较折线图Fig.1 The line chart of the blood glucose level intra-group at each time
图2 血糖值组间比较柱状图Fig.2 The histogram of the blood glucose level inter-group at each time
表1表明: 空白组糖耐量实验在第5次灌胃后15、30、60、120min的血糖值极显著高于0基准血糖值(P<0.01), 60min血糖值显著性高于120min的血糖值(0.01
表2表明: 0时间点各组实验动物的血糖含量无显著性差异(P>0.05); 灌胃后15min, 空白组的血糖值极显著高于高、中、低剂量绿萝花组和阳性药物组的血糖值(P<0.01); 灌胃后30min, 高、中剂量绿萝花组血糖值显著低于空白组的血糖值(P<0.05), 阳性药物组的血糖值达到极显著差异(P<0.01); 灌胃后60min, 低剂量绿萝花组的血糖值显著性低于空白组的血糖值(P<0.05), 阳性药物组的血糖值极显著低于空白组、高、中、低剂量绿萝花组的血糖值(P<0.01); 灌胃后120min, 空白组、高、中、低剂量绿萝花组之间的血糖值无显著性差异(P>0.05), 阳性药物组的血糖值极显著低于空白组、高、中、低剂量绿萝花组的血糖值(P<0.01). 结合图2, 实验结果表明: 糖耐量实验期间, 三个剂量的绿萝花在连续给药5d后的各时间点小鼠血糖含量均低于空白对照组, 说明不同剂量的药物对糖的吸收产生不同的影响, 其中高、中剂量绿萝花组作用优于低剂量绿萝花组, 阳性药物组作用尤为明显.
3.2 糖耐量曲线下面积
各组小鼠糖耐量曲线下面积统计结果见表3, 图3.
表3 每组实验动物糖耐量曲线下面积值的比较(mmol/L·h, ,n=10)Tab.3 The comparison of SBG in each group(mmol/L·h, ,n=10)
图3 各组实验动物糖耐量曲线面积值比较柱状图Fig.3 The histogram of the SBG‵s comparison in each group
表3表明: 中、低剂量绿萝花组的糖耐量曲线下面积显著性低于空白组的糖耐量曲线下面积(P<0.05),阳性药物组的糖耐量曲线下面积极显著低于空白组(P<0.01). 三个剂量绿萝花组的糖耐量曲线下面积无显著差异(P>0.05). 结合图3, 实验结果表明: 高、中、低剂量绿萝花组、阳性药物组的糖耐量曲线下面积值均小于空白对照组的糖耐量曲线下面积, 其中阳性药物组的糖耐量曲线下面积最小, 说明三个剂量绿萝花和阳性药物盐酸二甲双胍片有抑制机体吸收葡萄糖的作用, 其中以中、高剂量绿萝花和盐酸二甲双胍片效果较明显.
糖尿病是一种由多种原因引起的临床综合症, 在中医上属于“消渴症”的范畴, 以多饮、多食、多尿、乏力、消瘦, 尿糖含量超标等为主要临床表现. 目前临床常用的降血糖的药物大多作用单一靶点. 因此寻找新型、有效、不良反应少的降血糖药物就显得十分重要. 我国应用中药以及民族药的历史十分悠久, 积累了大量临床应用经验及有效药物. 目前有关藏药绿萝花的研究报道较少, 仅限于其化学成分如挥发油、黄酮、还原糖的提取分离及其抗氧化、降血糖等药理作用研究[1,3~7]. 糖耐量降低是Ⅱ型糖尿病发展的一个中间阶段, 因此使糖耐量得到一定程度恢复是治疗糖尿病的一个重要手段, 也是评价治疗糖尿病的药物其疗效的一个重要方面; 葡萄糖耐量试验(GTT)是正常情况下,在一次性摄入大量葡萄糖后,通过体内的各种调节机制的调节,血糖浓度暂时升高,2h后恢复到正常水平,这种现象称为耐糖现象; 机体的糖耐量降低时,血糖水平难以保持这一状态, 此时血糖曲线表现为先上升后缓慢下降,在2h后仍保持在较高的水平; 通过糖耐量实验,可以了解个体对葡萄糖的负荷能力; 糖耐量试验是选糖负荷后30、60、120min 各时相分别测BG水平. 如果2h后BG仍高于空腹水平,认为糖耐量异常[8~10],.
本研究实验结果表明: 实验小鼠的尾静脉血糖测定结果表明空白组灌胃后15min左右血糖值达到峰值, 高剂量组和中剂量绿萝花组灌胃后60min左右血糖值达到峰值, 低剂量组和阳性组在灌胃后30min左右血糖值达到峰值; 三个剂量的绿萝花组在连续服用5d后的各时间点小鼠血糖含量均低于空白对照组; 三个剂量的绿萝花组和阳性药物组的糖耐量曲线下面积值均小于空白对照组的糖耐量曲线下面积, 其中阳性药物组的糖耐量曲线下面积最小. 综合以上分析表明: 绿萝花在连续服用5d后具有增强机体对糖耐受的能力、抑制机体对葡萄糖吸收的能力, 尤以高、中剂量绿萝花和阳性药物盐酸二甲双胍片效果较明显. 绿萝花为西藏民间常用的药物, 常用于预防和治疗糖尿病、高血脂等慢性疾病, 其天然特殊的地理环境生长的药物, 在糖尿病的防治方面具有进一步开发利用的前景.
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The experimental study of the effect of Scindapsus aureus on the glucose tolerance of normal rats
HAN Jin-tan, LIU Qun, WANG Sai, KANG Lian-lian, YANG Rong
(School of Life Science and Technology, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, P.R.C.)
This paper discusses the action of Scindapsus aureus in declining the blood sugar(BS), provides scientific basis for using drugs reasonably and exploiting further. The dry paste of Scindapsus aureus was obtained for research materials by L9(34) orthogonal test of water extraction technology. Experimental animals were divided into blank group, high, middle and low dose of Scindapsus aureus groups and positive drug group to study the effects of Scindapsus aureus on the glucose tolerance of normal rats with the test indexes of caudal vein blood sugar and SBG. The results showed that the BS(11.72 mmol/L) of the high dose of Scindapsus aureus group and the BS(11.41mmol/L) of the middle dose of Scindapsus aureus group were significantly lower than the blank group (P < 0.05) after 30 minutes of oral gavage; the SBG of the three doses of Scindapsus aureus groups were of no significant difference (P > 0.05), but were all lower than the SBG of the blank group, and the effects were obvious especially in the middle and high dose of Scindapsus aureus groups and metformin hydrochloride tablets group. The research results showed that Scindapsus aureus can inhibit the body’s ability to absorb glucose and ameliorate glucose tolerance after taking it 5 days continuously.
Scindapsus aureus; blood glucose content; SBG
R285,R29
A
1003-4271(2014)04-0518-05
10.3969/j.issn.1003-4271.2014.04.09
2014-04-22
刘群(1965-), 男, 汉族, 四川资中人, 博士, 副教授;E-mail:liuqun2567@163.com.
国家“十二五”科技支撑计划项目(2011BAD34B02-4); 中央高校基本科研业务费科研建设平台(11NPT03).