GC-MS法研究深裂竹根七挥发性成分

林奇泗，杨冬芝，牟杰

（徐州医学院药学院，江苏徐州221004）

GC-MS法研究深裂竹根七挥发性成分

林奇泗，杨冬芝，牟杰

（徐州医学院药学院，江苏徐州221004）

分析深裂竹根七的挥发性成分。分别用索氏提取器和水蒸气蒸馏装置提取深裂竹根七，并对提取物用GCMS联用仪进行测定，峰面积归一化法测定各成分的相对含量。从深裂竹根七水蒸气蒸馏提取物中鉴定了11种组分，占总峰面积的78.6%；从深裂竹根七索氏提取物提取物中鉴定了10种组分，占总峰面积的69.0%。两种提取方法得到的挥发性成分主成分有一定不同，本研究为深裂竹根七的综合开发提供了参考依据。

深裂竹根七；气质联用；挥发性组分

深裂竹根七（Disporopsis perryi（Hua）Diels），又名黄脚鸡、十样错等，为百合科（Liliaceae）竹根七属（Disporopsis）植物[1]，是一种民间常用的中药，其根具有养阴润肺、生津止渴等功效。多用于虚汗多咳、产后虚弱、月经不调等症，有的还用于感冒扁桃体炎、眼结膜炎等症[2]。

目前对深裂竹根七的化学成分研究仅限于初步的探讨，如《现代本草纲目》只记载深裂竹根七包含甘露糖、果糖等单糖及多糖成分[3]。Yang QX等阐述了深裂竹根七中所含有的几种主要以甾体皂苷为主的化合物[4]。张素英对深裂竹根七根的化学成分进行了研究[5]，从中确定了3种成分，分别是β-胡萝卜苷，△2-（25R）-螺甾-3β-醇，（25R）-5β-螺甾-3β-醇。但对于深裂竹根七挥发性组分的研究较为滞后。

本研究分别用索氏提取器和挥发油提取器对深裂竹根七挥发性成分进行提取，并计算各组分峰保留指数[6-7]，为深裂竹根七成分研究提供实验依据。

1 仪器与材料

QP5050A气质联用仪：日本SHIMADZU公司；HH-2数显恒温水浴锅：浙江省嘉兴市俊思仪器设备厂；HH-3数显恒温油浴锅：江苏金坛市江南仪器厂；SC-97自动三重纯水蒸馏器：上海亚荣生化仪器厂；BS110电子天平：德国Sartorius公司；PE-52AA型旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂；SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵：河南省太康县科教仪器厂。

邻苯二甲基-2甲基丙基酯、棕榈酸、棕榈酸甲酯、亚油酸乙酯、9，12-十八碳二烯酸、硬脂酸、棕榈酸乙酯、C16-C30正构烷烃对照品（纯度质量分数＞98.0%，购自上海阿拉丁试剂公司），无水硫酸钠（分析纯，天津大茂化学试剂厂），实验用水为实验室自制三重蒸馏水，正己酸、正己烷均为分析纯，购自山东禹王实业有限公司。

深裂竹根七（Disporopsis pernyi（Hua）Diels）药材于2011年8月采自贵州省松桃县，经沈阳药科大学中药学院贾景明教授鉴定，用水洗去浮土，再用去离子水冲洗2、3次，于40℃条件下烘干，粉碎过二号筛，密闭存放。

2 方法

2.1 提取与分析方法的考察

2.1.1 提取溶剂的考察

称取深裂竹根七粗粉约5 g，精密称定，共5份，分别加入20倍溶剂，溶剂依次为石油醚、乙醚、丙酮、正己烷和乙酸乙酯，采用索氏提取法在80℃的水浴锅中提取8 h，计算得率，结果见图1。

图1 溶剂考察Fig.1 The investigation of the solvents

由图1可知，石油醚提取所得的浸膏量比其他溶剂提取得到的浸膏量大，故采用石油醚作为提取溶剂较好。

2.1.2 色谱柱的选择

气相色谱分析过程中，毛细管柱固定相的种类对成分的分离有较大的影响。实验中比较了PEG-20M、OV-1701和HP-5三种色谱柱。结果表明，采用HP-5非极性毛细管色谱柱，能够实现对深裂竹根七中的脂肪酸和挥发油等低极性成分较好地分离，色谱峰数目较多，出峰时间合适，能够满足实验需要。

2.2 提取方法

2.2.1 索氏提取器法

取20 g深裂竹根七粗粉，加入石油醚200mL，用索氏提取器提取8 h。将所得提取液分别旋转蒸发浓缩至近干，再加入石油醚定容至1.0mL，用无水硫酸钠干燥后密封保存，即得供试品溶液1。

2.2.2 水蒸气蒸馏法

取20 g深裂竹根七粗粉，用水蒸气蒸馏装置提取8 h，馏出液经石油醚萃取，并定容到1.0mL，用无水硫酸钠干燥后密封保存，即得供试品溶液2。

2.3 气相色谱条件

色谱柱为HP-5石英毛细管柱（0.25μm×0.25mm× 30m）；载气为99.999%的氦气；样口温度280℃；进样量1.0μL；分流比5∶1；流速1mL/min；升温程序：在120℃下保持4mins，以10℃/min速度升温至180℃，保持10mins，以5℃/min速度升温至270℃并保持35min。

2.4 质谱条件

离子源为电子轰击（EI）离子源；离子源温度230℃；电子能量70 eV；气相色谱质谱接口温度230℃；质量扫描范围m/z33～500。

2.5 色谱峰的鉴定方法

本研究采用GC-MS法对深裂竹根七挥发性组分进行分离、分析和鉴定，通过检索NIST107谱图库，并结合保留指数和对照品，对各色谱峰进行了鉴别。各色谱峰的保留指数依据公式（1）进行计算。

式中：t′R(x)、t′R(z)、t′R(z+n)分别代表待测物质x和具有Z及Z+n个碳原子数正构烷烃的相对保留时间；n= 1，2，……

3 结果与讨论

供试品溶液1和供试品溶液2的GC-MS总离子流色谱图分别见图2，化合物的鉴定见表1。从深裂竹根七水蒸气蒸馏提取物中鉴定了11种组分，占总峰面积的78.6%；从深裂竹根七索氏提取物提取物中鉴定了10种组分，占总峰面积的69.0%。

图2 深裂竹根七不同提取物的总离子流图Fig.2 Total ion chromatogram of different extracts of Disporopsis pernyi（Hua）Diels

表1 深裂竹根七两种提取物的主要成分Table1 Major components of two extractions of Disporopsis pernyi

从结果可知，无论是水蒸气蒸馏法还是索氏提取法所提取得到的组分都并不全面。可能由于含量太低，在索氏提取法所得提取物中未检测到甲氧基丁香酚（Methoxyeugenol）和二十二烷（n-Tetracosane）；在水蒸气蒸馏法所得提取物中未见棕榈酸乙酯（Hexadecanoic acid，ethyl ester）。故提取方法对深裂竹根七提取物中挥发性组分的影响非常大。

4 结论

经过NIST107谱库比对、保留指数计算和对照品比对，最终鉴别了深裂竹根七中12种组分。在所鉴别的组分中，以脂肪酸及其酯类为主。经过提取溶剂和提取方法的筛选，在气相测定挥发性组分时，仅以谱库进行比对，所得结果不够准确，因为相似结构易产生混淆。相同化合物在相同性质的色谱柱上，保留指数较为稳定，具有参考意义。本研究为深裂竹根七的应用与产品开发提供参考。

[1]钱信忠.中国本草彩色图鉴[M].北京:人民卫生出版社,1982: 155-157

[2]王冠元,聂凤禔.深裂竹根七化学成分研究[J].中成药,2010,32 (11):1936-1938

[3]黄泰康.现代本草纲目[M].北京:中国医药科技出版社,2000:2681

[4]Yang Qingxiang,Xu Min,Zhang Yinjun,et al.Steroidal saponins from Disporopsis pernyi[J].Helv Chim Acta,2004,87(5):1248-1253

[5]张素英.深裂竹根七根化学成分的研究[D].贵州:贵州大学,2006

[6]ŠKRBIE BD.Unified retention concept-statistical treatment of Kova′ts retention index[J].Journal of Chromatography A,1997(764): 257-264

[7]徐铸德,赵如松,张晓东.由气相色谱程序升温数据计算恒温保留指数[J].色谱,1994,12(3):164-165

Analysis of the Volatile Components of Disporopsis perryi by GC-MS

LIN Qi-si，YANG Dong-zhi，MOU jie
（School of Pharmacy，Xuzhou Medical College，Xuzhou 221004，Jiangsu，China）

Analyze the volatile chemical constituents of Disporopsis perryi.The volatile chemical constituents were obtained by Naphtha extraction device and Soxhlet extraction device respectively，which were subjected to GC-MS analysis.Area normalization method was used to determine the relative content of each constituent. 11 components were identified in the steam distillation extract，representing78.6%of the total oil compositions；10 components were identified in the Soxhlet extraction device extract，representing 69.0%of the total oil compositions.There was remarkable difference of volatile components checked in the Disporopsis perryi among two extraction methods．It is helpful to provide reference data for Disporopsis perryi's comprehensive utilization.

Disporopsis perryi；GC-MS；volatile components

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.03.005

2013-07-31

江苏省教育厅课题（10KJB350005）

林奇泗（1980—），男（汉），讲师，博士，研究方向：药物分析。