对乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔体内的药代动力学研究

顾晓东，常金花，刘 沛，刘翠哲

(河北省中药研究与开发重点实验室，承德医学院中药研究所，河北承德 067000)

对乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔体内的药代动力学研究

顾晓东，常金花，刘 沛，刘翠哲△

(河北省中药研究与开发重点实验室，承德医学院中药研究所，河北承德 067000)

目的:研究肌肉注射对乙酰氨基酚琥珀酸酯在健康家兔体内的药代动力学。方法:采用RP-HPLC法测定6只成年健康家兔肌肉注射对乙酰氨基酚琥珀酸酯后不同时间点血浆中对乙酰氨基酚的浓度，应用DAS 2.0药动学软件处理血药浓度数据，拟合对乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔体内吸收模型，绘制药时曲线，计算药代动力学参数。结果:对乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔体内代谢符合一级吸收二室模型(权重系数=1/ C2)，主要药动学参数:Tmax=0.25h、Cmax=95.44mg/L、t1/2(α)=0.73h、t1/2(β)=2.70h、AUC=82.44mg/L*h、Vd=45.65L/kg。结论:与肌肉注射对乙酰氨基酚相比，家兔肌肉注射乙酰氨基酚琥珀酸酯的Tmax、t1/2(β)均缩短，表明乙酰氨基酚琥珀酸酯在体内起效迅速且消除较快。

对乙酰氨基酚琥珀酸酯;药代动力学;高效液相色谱法

对乙酰氨基酚为乙酰苯胺类解热镇痛药，通过抑制下丘脑体温调节中枢前列腺素合成酶减少前列腺素PEG1的合成和释放，导致外周血管扩张、出汗而发挥解热作用，是全世界应用最广泛的解热镇痛类药物[1-2]。对乙酰氨基酚易溶于有机溶剂、微溶于水，临床上对乙酰氨基酚注射剂常用乙醇、丙二醇等有机溶剂做溶媒，但有机溶剂刺激性大且不利于吸收[3-4]。本课题组的前期研究利用对乙酰氨基酚与琥珀酸酐反应，合成前药对乙酰氨基酚琥珀酸酯，在对乙酰氨基酚的分子结构中引入一个羧基，使之能够与碳酸氢钠形成钠盐，从而具有良好的水溶性。本研究观察了该前体药物在家兔体内的药代动力学，以评价它的体内代谢行为。

1 实验材料

1.1 仪器设备 岛津SHIMADZU LC-2010C HT(CLASSVP 6.13multi)高效液相色谱系统(岛津国际贸易上海有限公司);800B离心机(上海安亭科学仪器厂);GT16-3型高速台式离心机(北京时代北利离心机有限公司);旋涡混合器(ZH-2，天津药典标准仪器厂);氮吹仪(北京同泰联科技发展有限公司);恒温水浴锅(上海爱朗仪器有限公司)。

1.2 试剂与药品 甲醇(色谱纯，天津协和昊鹏色谱科技有限公司);冰醋酸(天津科密欧化学试剂厂);三蒸水(实验室自制);肝素钠(河北赛瑞科技有限公司);对乙酰氨基酚对照品(0716-200112，中国药品生物制品检定所);对乙酰氨基酚琥珀酸酯(实验室自制);碳酸氢钠(河北赛瑞科技有限公司)。

1.3 实验动物 2.2-2.5kg健康家兔6只，雌雄各半，购于河北省药品检验所动物房，合格证号2229601123。

2 方法与结果

2.1 血浆中对乙酰氨基酚含量测定方法

2.1.1 色谱条件[5]:色谱柱:Kromasil C18柱(4.6mm×150 mm，5μm);柱温:20℃;流动相:甲醇-1%冰醋酸=12:88(v/v);检测波长:244nm;流速:1.0ml/min;进样量:20μl。

2.1.2 血样处理:采集的血样置于肝素化离心管中，5000r/min离心10min，精密吸取上清液1ml于试管中，精密加入甲醇2ml，涡旋混合1min，置高速离心机中，5000r/ min离心10min，精密吸取上清液1ml，50℃水浴，氮气流吹干，残留物精密加入甲醇0.5ml，涡旋混合1min，复溶，12000r/min离心10min，取上清液，即得[6-7]。

2.1.3 线性范围考察:精密称定对乙酰氨基酚对照品适量，用蒸馏水配制成浓度分别为1.5、3.0、6.0、15、30、60、150、300、450μg/ml的对乙酰氨基酚对照品储备液，分别精密吸取空白血浆(未给药家兔血浆)0.5ml与上述对照品储备液0.5ml，漩涡混合后按2.1.2(从精密吸取上清液1ml后开始)的方法处理，分别进样，以峰面积为纵坐标(Y)、浓度为横坐标(X)绘制标准曲线，并计算回归方程，回归方程为Y=40471X-2278.8，r=0.9997，线性范围是0.5-150μg/ml。

2.2 对乙酰氨基酚琥珀酸酯药代动力学研究

2.2.1 配制对乙酰氨基酚琥珀酸酯注射液:按摩尔比1:2精密称定对乙酰氨基酚琥珀酸酯与碳酸氢钠，以注射用水配制成对乙酰氨基酚琥珀酸酯浓度为50mg/ml的药液，0.22μm滤膜过滤，121℃灭菌30min。

2.2.2 给药方案与血样采集:每只家兔大腿肌肉注射对乙酰氨基酚琥珀酸酯注射液2ml，分别于给药后0.083、0.167、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12h，分别心脏穿刺采血2ml，血样处理方法见2.1.2。

2.2.3 测定血药浓度:取2.2.2中的样品，按2.1.1的色谱条件测定，以峰面积代入回归方程，标准曲线法计算血药浓度，结果见附图。

附图 对乙酰氨基酚琥珀酸酯血药浓度-时间曲线

2.2.4 计算药代动力学参数:将各采样时间点血药浓度数据经DAS(Drug And Statistics，Vision2.0)程序处理，依据相关系数r最大和AIC最小的原则选择合适的隔室模型，结果表明，对乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔体内符合一级吸收、二室模型(权重系数=1/C2)，主要药动学参数见附表。

附表 对乙酰氨基酚琥珀酸酯的主要药动学参数

3 讨论

对乙酰氨基酚琥珀酸酯经肌肉注射后，其体内代谢过程符合一级吸收二室模型。关皎等[8]的研究表明，健康家兔肌肉注射对乙酰氨基酚符合一级吸收二室模型，血药浓度达峰时间Tmax=0.87±0.17h，消除半衰期t1/2(β)=3.66±0.32h。本研究中，健康家兔肌肉注射对乙酰氨基酚琥珀酸酯后，血药浓度达峰时间为Tmax=0.25± 0.01h，消除半衰期t1/2(β) =2.70±0.12h，均短于健康家兔肌肉注射对乙酰氨基酚的Tmax和t1/2(β)。本研究结果表明，对乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔体内吸收速度和消除速度均快于对乙酰氨基酚，因此，对乙酰氨基酚琥珀酸酯有可能更快发挥药效和降低蓄积肝毒性[9]。并且，本研究中配制的对乙酰氨基酚琥珀酸酯注射液为水溶液，pH=6.5，不含有机溶剂，可避免使用有机溶剂所产生的注射疼痛和刺激性，增强用药的顺应性，有较大的应用前景。

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[8]关皎，王丹，郝乘仪，等.对乙酰氨基酚家兔体内药动学研究[J].吉林医药学院学报，2011，32(5):276-278.

[9]赵映，方渡，陈林明，等.对乙酰氨基酚的肝毒性研究进展[J].中国现代药物应用，2008，2(15):114-115.

STUDY ON THE PHARMACOKINETICS OF ACETAMINOPHEN SUCCINATE IN RABBIT

GU Xiao-dong, CHANG Jin-hua, LIU Pei, et al
(Hebei Key Laboratory of Study and Exploitation of Traditional Chinese Medicine, Institute of Chinese Materia Medica, Hebei Chengde 067000, China)

Objective:To study the pharmacokinetics of acetaminophen succinate in healthy rabbit after intramuscular injection.Methods:RP-HPLC was used to determine the acetaminophen concentration of 6 adult healthy rabbits at different time after injecting acetaminophen succinate. Then the pharmacokinetic parameters were disposed by DAS 2.0 pharmacokinetic software.Results:The concentration-time curve of acetaminophen succinate in rabbit was singlecompartment model (weight coefficient=1/C2). The main pharmacokinetic parameters was:Tmax=0.25h, Cmax=95.44mg/ L, t1/2(α)=0.73h, t1/2(β)=2.70h, AUC= 82.44 mg/L*h, Vd=45.65L/kg.Conclusions:Compared with muscular injection of acetaminophen, the Tmaxand t1/2(β) of muscular injection of acetaminophen succinate shorten obviously, which indicates that acetaminophen succinate onset quickly and remove rapidly in vivo.

Acetaminophen succinate; Pharmacokinetics; HPLC

R917

A

1004-6879(2014)01-0003-03

2013-07-12)

△ 通讯作者