肿节风有效成分检测方法研究概述

康梦莹，马家宝，陈小媛，梁建丽，陈 勇

(广西中医药大学，广西 南宁 530002)



肿节风有效成分检测方法研究概述

康梦莹，马家宝，陈小媛，梁建丽，陈 勇*

(广西中医药大学，广西 南宁 530002)

对近年来肿节风有效成分黄酮类、香豆素类、有机酸类、皂苷类、挥发油类、多糖类等检测方法的相关文献进行分析总结，以便充分开发利用肿节风类药物资源，为肿节风及其制剂提供综合性、可量化的质量评价方法。

肿节风；有效成分；检测方法

肿节风(Sarcandraglabra)又名草珊瑚、接骨金粟兰、九节风、九节茶、九节兰、节骨茶等，为金粟兰科(Chloranthaceae)植物草珊瑚(Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai)的干燥全草[1]，是《中华人民共和国药典》2005年版一部收载的法定药材。肿节风味苦、辛，性平，归心、肝经，具有清热凉血、活血消斑、祛风通络作用，可用于治疗血热紫斑、紫癜、风湿痹痛、跌打损伤等病症[2]。现有研究表明肿节风的化学成分主要包括黄酮类(异甘草素、异甘草苷、7-O-甲基柚皮素)、香豆素类(异嗪皮啶、嗪皮啶、嗪皮苷) 、有机酸类(反丁烯二酸、绿原酸)、倍半萜类(白术内酯)以及挥发油类等，因此其药理作有也具有多样性[3]。现就近年来肿节风中各有效成分检测方法的研究情况综述如下。

1 化学成分

1.1 黄酮类

肿节风中总黄酮含量较高，其中以叶的含量最高，根其次，茎最低。黄酮类化合物是肿节风重要的有效成分，有明确的药理作用[4]，其检测方法主要以紫外分光光度法为主。

黄明菊等[5]采用紫外光谱仪、红外光谱仪以及核磁共振仪从肿节风水提物中测得落新妇苷等5个黄酮苷类化合物，以及首次测得3个葡萄糖醛酸类化合物。童家贺等[6]采用薄层色谱对乙酸乙酯提取部位进行鉴别，并结合高效液相色谱测定总黄酮含量，对药材质量进行了考查，发现不同产地肿节风药材所含成分及总黄酮含量差异较大。谭健兵等[7]以高效液相色谱法测定肿节风药材中山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷及异秦皮啶的含量，首次建立山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷与异秦皮啶的含量测定方法, 专属性较强, 为肿节风药材多指标质量标准的建立提供了依据。李可强[8]采用HPLC法测定中药材肿节风中黄酮类成分落新妇苷及柚皮苷的含量，以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相, 采用梯度洗脱，检测波长为290nm，落新妇苷及柚皮苷的平均回收率分别为97.3%、95.6%,RSD分别为2.2%、2.3%,为肿节风黄酮类有效化合物的鉴定提供了又一有效依据。

1.2 香豆素类

肿节风香豆素类成分主要为异秦皮啶,在体外活性实验中显示出一定的抑制肿瘤细胞作用。异秦皮啶是药典中肿节风主要质量标准之一。

罗奇志等[9]采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱，以乙腈-11%甲酸水溶液梯度洗脱,紫外和电喷雾质谱同时在线检测，全离子扫描模式扫描,对每一组分峰进行质谱分析，鉴定出异秦皮啶等5个化学成分，此技术无需繁琐、复杂的提取分离即能推断出大量化合物的分子量、结构信息,对认识中药化学成分的全貌有其突出优势,更有利于化合物的确认。周斌等[10]利用高效液相色谱测定肿节风不同部位中异嗪皮啶的含量，结果显示，肿节风药材根中异嗪皮啶含量较高，叶中含量较低。吴铁荣等[11]以异嗪皮啶为研究对象，建立肿节风药材中该成分与新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸的相对校正因子，利用相对校正因子计算六种成分的含量，实现一测多评。此方法操作简单，专属性及重复性好，实现了只用异嗪皮啶一种对照品同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸的含量。王菲等[12]采用硅胶柱层析, 以环己烷-乙酸乙酯溶剂系统等梯度洗脱方法，将抗肿瘤活性成分洗脱分离出来，并用核磁共振仪、质谱仪进行测定，共得13个化合物。通过获得的1H NMR与13C NMR图谱分析，首次发现了3,3'-双异秦皮定、白术内酯III等4个新化学成分。

1.3 有机酸类

有机酸是目前发现的中草药抗菌消炎活性成分比较多的一类，其中反丁烯二酸及绿原酸也是目前肿节风主要的质量控制指标之一。

罗永东等[13]利用快速溶剂萃取结合液质联用技术，以正负离子全扫描模式检测肿节风药材中的化学成分，准确鉴定了反丁烯二酸及绿原酸等9种化学成分，为肿节风药材化学成分的快速筛选提供了方法。陈东鸿等[14]采用薄层色谱及高效液相色谱法对肿节风药材进行鉴定及含量测定，在中国药典2010年版一部肿节风标准的基础上，增加了肿节风中迷迭香酸、反丁烯二酸、绿原酸的薄层色谱鉴别和特征图谱，其中绿原酸与对照品相比，斑点清晰且含量较高。卢瑞枝等[15]采用高效液相色谱方法测定，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(13∶87),在流速为0.5mL/min、检测波长为327nm情况下建立测定方法，平均加样回收率为100.19%，RSD为1.47%，是肿节风有机酸类有效的测定方法。张广财等[16]采用高效液相色谱波长切换法同时测定肿节风中反丁烯二酸、异秦皮啶和落新妇苷多指标成分的含量，此实验成功实现了同时测定3种指标性成分，减少了检测时间，并且操作方便，重复性好。

1.4 倍半萜类

黎雄等[17]利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、ODS柱色谱及液相色谱等分离技术从肿节风70%乙醇提取物的正丁醇和乙酸乙酯萃取部分分离得到4个倍半萜内酯类成分。

1.5 挥发油

肿节风挥发油具有抗肿瘤活性，其中β-榄香烯是鲜肿节风挥发油的主要成分。

杨荣平等[18]采用水蒸气蒸馏法分别对肿节风的茎和叶进行提取, 将提取物的化学成分经气相色谱-质谱(GC- MS)法进行分离鉴定，用归一化法计算各组分的相对百分含量。共从肿节风茎挥发油中鉴定出29种化合物, 其含量占总挥发油的75.88%；从肿节风叶挥发油中鉴定出64种化合物, 其含量占总挥发油的87. 98%。吴素香等[19]利用TLC 鉴别及HPLC 含量测定鲜肿节风挥发油中β-榄香烯成分，可作为检测肿节风挥发油β-榄香烯的有效方法。张胜娜等[20]利用毛细管气相色谱, 选择适宜的程序升温条件对鲜肿节风挥发油进行分析, 获得了较为理想的包含特征信息的鲜肿节风挥发油GC指纹图谱。

1.6 多糖

金磊等[21]采用超声提取法制备肿节风多糖，并将在发酵条件优化方面体现出重要应用价值的响应面优化法(RSM)应用到多糖制备的工艺研究中，利用对紫外分光光度计测得的实验数据进行多元二次回归来拟合影响因素与响应值之间的函数关系，通过对回归方程的分析寻求最优工艺参数。

1.7 其它

从肿节风中分离得到的化合物还有胡萝卜苷(β- sitosteryl-D-glucoside)、β-谷甾醇和白桦脂酸(betulinic acid)等[22-24]。李先春等[25]分别用原子吸收光谱法、紫外可见分光光度法及X-射线荧光法测定了肿节风中Zn、Se、Cu、Mn、Fe 、Mg 等微量元素的含量，萃取-荧光法、萃取-光度法、原子吸收光谱法分别用于测定了肿节风中硒的含量。

2 结语

肿节风中化学成分复杂，含有有机酸类(包括绿原酸和反丁烯二酸)、黄酮类、香豆素类(异秦皮啶)、挥发油类、多糖类及其它成分等，以反丁烯二酸和异秦皮啶为主，并以异秦皮啶含量高低来评价肿节风品质的优劣，但异秦皮啶并不代表肿节风的全部成分。其有效成分检测方法主要为紫外可见分光光度法、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法、高效液相指纹图谱等。目前虽然对于肿节风有效成分分析及检测方法的研究取得了一定进展，但仍然存在不足，如国内对肿节风化学成分的研究主要集中在对其黄酮类、香豆素类及挥发油类的研究，对其它研究较少；此外，肿节风具有多种药理活性，因此有必要深入研究其它活性成分的化学结构及构效关系、定量方法，全面评价药材的质量，以便充分开发利用肿节风药用植物资源，为肿节风及其制剂提供综合的和可量化的质量评价方法。

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(责任编辑：魏 晓)

2014-03-05

康梦莹(1990-)，女，广西中医药大学硕士研究生，研究方向为药物质量标准。

陈勇(1961-)，男，广西中医药大学药学院教授，研究方向为中药质量评价与分析。

R284

A

1673-2197(2014)13-0043-02