7种杀菌剂对家蚕的急性毒性评价

吕铭潇，张 骞

（1.山东服装职业学院，山东 泰安 271000；2.山东农业大学 植物保护学院，山东 泰安 271018）

家蚕(Bombyx moriL.) 在我国已有5 000多年的饲养史，是我国农业生态环境系统中重要的经济昆虫。家蚕是我国农药登记中所列环境生态的非靶标生物之一，同时也是对农药十分敏感的生物。在实际生产中因农药中毒而造成蚕茧质量下降、产量下降、甚至颗粒无收的事件时有发生[1-4]。近年来，随着生态农业的逐渐兴起，有关农药对家蚕急性毒性评价的研究也越来越多[5-7]，同时试验条件和方法也在不断改进[8-10]。随着新农药及其混剂的迅速增长，及时评价这些药剂对养蚕业的潜在风险，对保障蚕业生产的稳定与发展十分重要。

农药对家蚕的安全性需要考虑农药急性毒性、安全用药间隔期、慢性毒性和传染性等几个方面，本文从农药对家蚕急性毒性方面入手，研究几种特异性杀菌剂的急性毒性。这些特异性杀虫剂具有专一的靶标，这种特性也往往会被误解为其只作用于病菌，而对非靶标生物的影响较小。本研究根据中华人民共和国国务院颁布的“农药管理条例”的规定，遵照国家环境保护局颁布的“化学农药环境安全评价试验准则”的要求[11]，测定了7种药剂对家蚕的急性毒性，为农药环境毒性评价、农药的登记注册和桑树病虫害防治合理用药提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 供试家蚕和桑树品种

家蚕品种为菁松·皓月，购自山东广通蚕种集团有限公司。供试桑树为处于桑叶盛产期的6年生桑树。

1.2 供试药剂

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂：50%嘧菌酯水分散粒剂(Azoxystrobin, 50% WG )，三唑类杀菌剂：20%戊菌唑水剂（Penconazole, 20%AS），400 g/L苯醚甲环唑悬浮剂（Difenoconazole, 400 g/L SC），20%氟硅唑可湿性粉剂（Flusilazole, 20%WP）；三唑类杀菌剂：12.5%氟环唑悬浮剂（Epoxiconazole, 12.5% SC），甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂：50% 醚菌酯水分散粒剂（Kresoxim-methyl, 50%WG），10%己唑醇悬浮剂（Hexaconazole, 10%SC）。

1.3 试验方法

采用国家《化学农药环境安全评价试验准则》推荐的食下毒叶法[11-13]，并略作改动。在预试明确药剂有效浓度范围的基础上，将药剂用水稀释成5～7个系列浓度，从桑树上采集第2、3片健康的叶片，擦干净叶面上的尘土等杂物，用不同浓度的药液定量浸渍桑叶，以10 mL药液浸渍5 g桑叶，并且尽量使药液均匀浸在桑叶上，浸叶时间应控制为10 s。自然晾干后放入直径15 cm培养皿内，每皿接入20头家蚕2龄第2天幼虫（3个重复共计60头）。以清水浸桑叶为空白对照组，如果有助溶剂还需要做溶剂对照。处理后的试虫置于26 ℃恒温养虫室内（保持相对湿度80%±5%），连续喂食染毒桑叶96 h，分别于24 h、48 h及96 h检查死亡、存活家蚕头数，并连续观察记录存活个体中毒症状。对照组死亡率小于10%的试验为有效试验。

1.4 毒性评价依据

计算死亡率、校正死亡率，用SPSS12.0统计分析软件进行数据处理，求出各药剂对家蚕的LC5O值及95%置信限：依据中华人民共和国国家环境保护总局《化学农药环境安全评价试验准则》，农药对家蚕96 h的急性毒性按LC50的大小划分为4个等级：低毒性(LC5O＞200 mg/L)；中等毒性(20 mg/L＜LC5O≤200 mg/L)；高毒性(0.5 mg/L＜LC5O≤20 mg/L)；剧毒（LC5O≤0.5 mg /L）。

2 结果与分析

2.1 中毒症状观察

不同杀虫剂对家蚕引起的中毒症状表现出多种相似的特征（见表1），如吐液、拒食、身体扭曲呈“C”或“S”形、静卧等。但有些药剂也表现异样，如同属三唑类杀菌剂，戊菌唑有“C”形扭曲和体缩症状，而苯醚甲环唑有吐液和摆头症状。

表1 家蚕接触不同杀菌剂的中毒症状观察（96 h）

2.2 毒性评价

比较7种杀菌剂对家蚕的96 h的LC50值（见表2），按毒力大小排列依次为：苯醚甲环唑＞戊菌唑＞氟硅唑＞醚菌酯＞氟环唑＞己唑醇＞嘧菌酯。其中苯醚甲环唑对家蚕的毒性最高；毒性最小的是嘧菌酯。比较7种杀菌剂对家蚕的96 h的LC5O值，按毒力大小排列依次为：苯醚甲环唑＞戊菌唑＞氟硅唑＞醚菌酯＞氟环唑＞己唑醇＞嘧菌酯。其中苯醚甲环唑对家蚕的毒性最高；毒性最小的是嘧菌酯。

表2 7种杀菌剂对家蚕的毒性（96 h）

2.3 毒性分级及风险性评价

表3 农药对家蚕的毒性与风险性等级划分

依据中华人民共和国国家环境保护总局《化学农药环境安全评价试验准则》(表3)，在本实验室条件下，嘧菌酯、己唑醇、氟环唑对家蚕急性毒性等级划分为“低毒”，风险性等级低等；氟硅唑、醚菌酯对家蚕急性毒性等级划分为“中毒毒”，风险性等级中毒；戊菌唑、苯醚甲环唑对家蚕急性毒性等级划分为“高毒”，具有较高的风险性等级。

3 讨 论

本研究旨在明确7种不同杀菌剂品种对家蚕的毒性大小、家蚕的中毒症状以及农药对家蚕的风险性差异。同时，为化学防治桑园害虫和蚕农科学用药提供理论支持及技术指导，并对多种农药进行毒性评价，为这些农药的登记及安全使用提供必要的环境毒理学资料。

生产实践中，在桑园周边不合理的喷洒杀虫剂导致农药雾滴漂移，间接影响到家蚕的生长发育，导致蚕农经济损失严重。近些年，在加强了对农药的科学使用宣传、农药施用方法的改善以及蚕农自身经验积累后，家蚕中毒现象有所减少。杀虫剂作用于昆虫体内的靶标，导致其对昆虫的毒性较大。

但是，人们误认为杀菌剂作用于细菌、真菌等病菌内部的靶标，对昆虫毒性较小。通过本文章的数据可知，甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂嘧菌酯对家蚕“低毒”，醚菌酯对家蚕“中毒”；三唑类杀菌剂己唑醇、氟环唑对家蚕“低毒”，氟硅唑对家蚕“中毒”，戊菌唑、苯醚甲环唑对家蚕“高毒”。由此可见，不同作用机制的杀菌剂对家蚕的毒性不同，即使是同一类作用机制的杀菌剂，不同的药剂对家蚕的毒性也不同，甚至毒性差异显著。因此，在防治桑园害虫时应尽量避免使用上述杀虫剂。在桑园周边农田中防治其他作物害虫时，应选择对家蚕风险性小的药剂，并注意各药剂的安全间隔期。同时，应避免在有风天气施药，并严格控制施药方法、施药时间和施药时期。对于急性毒性低的杀菌剂能否使用在桑园及其周边，还需要从药剂残毒期、慢性毒性和传染性等方面深入研究。朱久生等[14]报道，幼蚕经微量农药处理后体重减轻，虫体开始收缩变小，一些幼虫不能吐丝结茧，大部分幼虫在吐丝过程中死于蔟格中；部分幼虫虽能正常结茧，但不能化蛹；对蛹而言，蛹体变小，有些不能发育成成虫或成虫发育不全，或在羽化前后死亡。因此，还需要继续研究药剂影响家蚕安全性的其他方面，获得足够的资料来确定此药剂是否可以在蚕区安全施用。

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