云南产玫瑰花化学成分研究

牛德云，孟春杨，周 斌，杨玉春，胡秋芬，高雪梅

(云南民族大学民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室，云南昆明650500)

玫瑰是蔷薇科蔷薇属落叶丛生灌木，品种繁多，其花色、香、形俱美，有极高的经济价值［1-2］.玫瑰花药用价值极高，历代本草均有玫瑰花在药用方面的记载;玫瑰花具有清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、扩张血管、解毒、利胆等作用［3］.

在玫瑰花化学成分的研究方面，主要研究不同品种、产地和生长发育期玫瑰挥发油的产量和香气成分变化，玫瑰提取物及单体化合物的结构鉴定［4］.研究发现，玫瑰花提取物的主要成分有黄酮类、鞣质类、萜类、酚类等多种活性成分［5］.牛淑敏等［6］从玫瑰花中分离鉴定出 3，5，7，3'，4'- 五羟基黄酮(槲皮素)和3，4，5-三羟基苯甲酸(没食子酸)2种抗氧化活性成分，从玫瑰花中首次分离得到槲皮素，它们都具有抗溶血和抗过氧化活性.玫瑰花的精油对体外全血血小板聚集具有抑制作用［7-8］.王晓霞等［9］对云南食用玫瑰精油的化学成分进行分析，鉴定出了86种成分，其中部分成分对丰富卷烟产品的香气降低刺激性和改善余味方面均具有一定的效果，从而明确其实用性.在综合了解前人研究的基础上，本研究对云南保山的玫瑰花进行研究，为玫瑰花化学成分的研究提供更多科学信息.

1 材料与方法

1.1 样品来源

采自云南保山的玫瑰花花瓣，风干后备用.

1.2 实验仪器和试剂

MS和NMR由中国科学院昆明植物研究所代为测定.仪器为VGAUTO Spec-3000质谱仪;Bruker AM-400和DRX-500核磁共振仪;JASCO DIP-370型数字式旋光仪;Bio-Rad FTS-135型红外光谱仪;UV 210A型紫外光谱仪;安捷伦1100型高效液相色谱仪，色谱柱为Agilent公司的ZORBAX SB-C18(9.4 mm ×250 mm，5 μm)反相柱、博纳艾杰尔科技公司的Venusil HILIC(10 mm×250 mm，5 μm)色谱柱;Buchi R-210型旋转蒸发仪、V-700真空泵;EYELA CA-1111冷却水循环装置;流动相过滤装置，0.45 μm 微孔过滤膜.

100～200目、200～300目硅胶和 GF254(100 mm×100 mm)硅胶板(青岛海洋化工厂生产);MCI-gel CHP-20P材料(日本三菱化学公司);Sephadex LH-20凝胶(pharmacia 17-0710-01);5%H2SO4乙醇溶液显色剂.

1.3 提取和分离

5.0 kg保山玫瑰花干花，粉碎后用V(氯仿)∶V(甲醇)=(2∶1)溶液10 L室温浸泡3～5天，超声3次(每次30 min)，过滤，减压蒸馏回收溶剂，再用回收溶剂反复常温浸泡超声提取5～6次，合并浸膏得到650 g.浸膏用980 g(100～200目)粗硅胶拌样，烘干，用4.5 kg硅胶(100～200目)柱层析，V(氯仿)∶V(甲醇)=1∶0(Ⅰ)、20∶1(Ⅱ)、10∶1(Ⅲ)、5∶1(Ⅳ)、2∶1(Ⅴ)、0∶1(Ⅵ)作梯度洗脱剂洗脱，除去大量杂质，将浸膏分成6个部分.经TLC检测，Ⅰ部分主要成分是挥发油和脂肪酸类物质;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ有明显的主斑点;Ⅵ部分没有主斑点.粗略对比Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ部分，选定Ⅳ部分用制备和半制备型高效液相色谱进行分离.

2 结构鉴定

化合物(1):黄色粉末;1H NMR(Pyridine，400 MHz)δ:3.58-3.70(6H，m，H-2″～ 6″)，4.20(1H，m，C6″-OH)，4.27(1H，m，C2″-OH)，4.37(1H，m，C3″-OH)，5.57(1H，d，J=7.5 Hz，H-1″)，5.68(1H，m，C4″-OH)，6.40(1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-3'，5')，7.35(2H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-2'，6')，10.31(1H，s，C4'-OH)，12.94(1H，s，C5-OH).13C NMR(Pyridine，400 MHz)δ:163.67(C-2)，102.79(C-3)，181.63(C-4)，161.41(C-5)，98.77(C-6)，164.06(C-7)，93.88(C-8)，157.24(C-9)，103.66(C-10)，121.16(C-1')，128.33(C-2'，6')，115.88(C-3'，5')，161.07(C-4')，99.91(C-1″)，73.06(C-2″)，76.39(C-3″)，69.55(C-4″)，77.12(C-6″).以上数据与文献［10］对照基本一致故，鉴定化合物(1)为Kaempferol-7-O-β -D-galactopyranoside.

化合物(2):黄色粉末;1H NMR(MeOD，400 MHz)δ:8.08(2H，d，J=8.0 Hz，H-2'，6')，6.89(2H，d，J=8.0 Hz，H-3'，5')，6.36(1H，s，H-8)，6.15(1H，s，H-6);13C NMR(CD3OD)δ:177.2(C-4)，166.8(C-7)，162.4(C-9)，160.5(C-4')，158.3(C-5)，147.8(C-2)，137.0(C-3)，130.6(C-2'，6')，123.8(C-1')，116.3(C-3'，5')，104.2(C-10)，99.6(C-6)，94.7(C-8).以上数据与文献［11］对照基本一致故，鉴定化合物(2)为Kaempferol.

化合物(3):黄色粉末;1H NMR(CD3OD，400 MHz)δ:12.48(1H，s，5-OH)，7.73(1H，d，J=2.0 Hz，2'-H)，7.64(1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，6'-H)，6.87(1H，d，J=8.5 Hz，5'-H)，6.38(1H，d，J=2.0 Hz，8-H)，6.17(1H，d，J=2.0 Hz，6-H);13C NMR(CD3OD，400 MHz)δ:177.3(C-4)，163.9(C-7)，160.7(C-9)，158.2(C-5)，148.8(C-4')，148.0(C-2)，146.2(C-3')，137.2(C-3)，124.1(C-1')，121.6(C-6')，116.2(C-5')，116.0(C-2')，104.5(C-10)，99，2(C-6)，94.4(C-8).以上数据与文献［12］对照基本一致，故鉴定化合物(3)为Quercetin.

化合物(4):C16H14O7;黄褐色粉末;13C NMR(100 MHz，MeOD)δ:85.2(d，C-2)，73.6(d，C-3)，198.2(s，C-4)，164.4(s，C-5)，96.4(d，C-6)，169.3(s，C-7)，96.4(d，C-8)，165.3(q，C-9)，129.8(s，C-1')，112.3(d，C-2')，148.9(s，C-3')，148.3(s，C-4')，115.9(s，C-5')，122.2(d，C-6')，56.3(q，OMe).以上数据与文献［13］对照基本一致，故鉴定化合物(4)为Taxifolin 4'-methyl ether.

化合物(5):C15H14O6;淡黄色固体;1H NMR(MeOH)δ:5.89(1H，d，J=1.4 Hz，H-6)，6.03(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，4.56(1H，d，J=7.5 Hz，H-2)，4.00(1H，m，H-3)，2.92(1H，dd，J=4.8，16 Hz，H-4)，2.54(1H，dd，J=7.0 ，16 Hz，H-4)，6.99(1H，d，J=1.5 Hz，H-2')，6.81(1H，d，J=6.5 Hz，H-5')，6.75(1H，d，J=1.5，6.5 Hz，H-6');13C NMR(MeOH)δ:82.7(d，C-2)，68.3(d，C-3)，28.8(t，C-4)，156.9(s，C-5)，96.1(d，C-6)，157.7(s，C-7)，95.4(d，C-8)，157.2(s，C-9)，100.6(s，C-10)，132.1(s，C-1')，115.2(d，C-2')，145.6(s，C-3')，145.7(s，C-4')，115.6(d，C-5')，120.0(d，C-6').Positive FAB MS:m/z 290［M］+.以上数据与文献［14］对照基本一致，故鉴定化合物(5)为(-)-Epicatechin.

化合物(6):黄色粉末;1H NMR(CD3OD)δ:12.14(1H，s，C5-OH)，10.78(1H，s，C4'-OH)，9.58(1H，s，C7-OH)，7.30(2H，d，J 5'，6'=9.0 Hz，H-2'，6')，5.88(2H，d，J 2'，3'=9.0 Hz，H-3'，5')，5.87(2H，s，H-6，8)，5.43(2H，d，J 2，3=7.0 Hz，H-2)，3.40(1H，t，J 2，3=7.0 Hz，H-3);13C NMR(DMSO，400 MHz)δ:196.3(C-4)，166.6(C-7)，163.5(C-5)，162.9(C-9)，157.7(C-4')，128.8(C-1')，128.3(C-2'，6')，115.1(C-3'，5')，101.7(C-10)，95.8(C-6)，94.9(C-8)，78.4(C-3)，41.9(C-2).以上数据与文献［15］对照基本一致，故鉴定化合物(6)为Dihydrogenistein.

3 结语

1)通过对云南保山玫瑰花花瓣中黄酮类化学成分进行研究，从中分离得到6种黄酮类化合物.经过波谱方法的鉴定并结合有关文献确定化合物结构，分别鉴定为:Kaempferol-7-O-β-D-galactopyranoside(1)，Kaempferol(1)，Quercetin(3)，Taxifolin-4'-methyl ether(4)，(-)-Epicatechin(5)，Dihydrogenistein(6)，这些化合物均为首次从保山玫瑰花中分离得到，为进一步对云南玫瑰花资源的开发利用提供了理论依据.

2)云南保山的玫瑰花中含有黄酮类物质，但实验过程中所选取的样品为5 kg玫瑰花干花瓣，属于小样分离研究，在研究过程中出现化合物做谱分析时量不够的情况，所以下一步研究工作将致力于玫瑰花瓣的大样研究，同时对分离得出的结构新颖的黄酮类物质做药理活泩.

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