神经源性肌萎缩病理动物模型的制备

辽宁省基础医学研究所(110101)车光昇 郭源秩 宋光熠

神经源性肌萎缩常见的原因为废用、营养障碍、缺血和中毒。脊髓前角病变、神经根、神经丛、周围神经的病变等均可引起神经兴奋冲动的传导障碍，从而使部分肌纤维废用，产生废用性肌萎缩。常见的疾病有:脊椎椎骨骨质增生、椎间盘病变、脊神经肿瘤、蛛网膜炎、神经炎、神经丛病变、脊神经肿瘤、神经损伤、脊髓空洞症、运动神经元性疾病、格林-巴利综合征、脑部病变和脊髓病变等。本文试用大鼠坐骨神经双重结扎的方法复制神经源性肌萎缩动物模型。

1 材料与方法

1.1 动物 SPF级SD大鼠(体重190～210)g(辽宁长生生物技术有限公司)。实验动物许可证为辽宁省科学技术厅签发，许可证号:SCXK(辽)2010～0001。

1.2 方法 SD大鼠20只，随机分为对照组和实验组，每组10只，雌雄各半。实验组腹腔注射3%戊巴比妥钠35mg/kg，麻醉后剪开左侧臀部皮肤，纵向分离臀部肌肉，暴露并分离坐骨神经，双重结扎坐骨神经，间距1cm，缝合皮肤。对照组为假手术组，未做结扎余操作同前。饲养4周后处死，剥离大鼠双后肢皮肤，从膝关节和踝关节处剪下后小腿称重，计算左腿萎缩百分比【(右侧重量-左侧重量)÷右侧重量×100%】，取小腿肌肉做病理检查。

2 结果

实验组左侧后肢小腿大体观察明显发生萎缩，左腿萎缩百分比为(48.7±8.2)%。光镜下肌纤维直径及横截面积明显缩小。对照组左右后肢小腿无明显差异。

3 讨论

复制肌萎缩的动物模型的方法有常用模型，有尾部悬吊、肢体固定、去神经和去肌肉或肌腱、局部药物注射［1-4］，上述方法各有优缺点。肌肉萎缩的发生机理有神经营养障碍学说、神经冲动减退学说、氧化应激学说。此外，肌肉代谢的紊乱、肌肉张力与紧张性的降低以及细胞凋亡等在废用性肌肉萎缩的发生中可能都具有一定的作用，因此推测，肌肉萎缩的发生实质上是由多源性因素引起的［5］。我们采用双重结扎坐骨神经复制神经源性肌萎缩动物模型，其具有操作的可控性，符合多数神经源性肌萎缩为慢性、渐进性的病理过程。

检测指标除光镜和电镜的病理改变还可检测以下相关指标:1)过氧化指标:如丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、羟自由基(HFR)等。2)细胞凋亡指标:如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、半胱天冬酶-3(Caspase-3)等。3)神经营养指标:胰岛素样生长因子-I(IGF-I)、生长激素(GH)、神经生长因子(NGF)、神经营养素3(NT-3)等。4)神经冲动传导指标:乙酰胆碱(ACH)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase)等。

目前肌萎缩主要的防治措施为功能锻炼、适宜的电刺激、药物，如具有促进合成代谢作用的激素类药物生长素(GH)、胰岛素样生长因子I(IGFI);具有抑制氧化应激反应作用的抗氧化剂维生素E;Ca2+通道阻断剂(如nifedipin);糖皮质激素抑制剂。但治疗效果并不十分明显。

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［5］邢国刚，樊小力，宋新爱.废用性肌肉萎缩的研究［J］.国外医学物理医学与康复学分册，2000，20(4):145