表皮生长因子和前列腺素E2在合并幽门螺杆菌感染的胃上皮内瘤变中的作用研究

徐 丹，孙圣斌，黄曼玲，张 姮，吴 杰

2000年，世界卫生组织(WHO)肿瘤新分类，将胃上皮组织形态学上具有一定异型性，在浸润前的肿瘤性改变，即胃上皮恶性肿瘤的前驱病变称为胃上皮内瘤变(gastric intraepithelial neoplasia，GIN)，取代了以往异型增生、不典型增生和原位癌等术语。根据细胞异型和结构紊乱程度分为低级别胃上皮内瘤变(low gastric intraepithelial neoplasia，LGIN)和高级别胃上皮内瘤变(high gastric intraepithelial neoplasia，HGIN) 两类，在胃癌的发生过程中胃黏膜的变化是一个由黏膜炎症、LGIN、HGIN、癌变的发展过程。LGIN和HGIN代表着胃黏膜上皮不同程度的瘤变过程[1-2]。慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤等与幽门螺杆菌(Hp)密切相关[3-4]。众所周知，表皮生长因子(EGF)和前列腺素E2(PGE2)是重要的胃黏膜保护因子。郝英霞等[5]研究发现从慢性浅表性胃炎→慢性萎缩性胃炎→胃癌，血清EGF水平逐渐升高，Hp有升高EGF的作用。而EGF和PGE2在GIN中的作用如何，目前尚不清楚，因此，本研究对EGF和PGE2在合并Hp感染的GIN中的作用进行研究。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2012年5月—2013年4月武汉市中心医院收治的胃镜下初次行黏膜钳取活检，病理诊断为LGIN的患者82例为研究对象，其中男49例，女33例；年龄32～77岁，平均53.4岁。均排除胃镜或病理诊断为上消化道溃疡、食管癌、胃癌及其他上消化道非上皮性肿瘤者。

1.2 胃镜下分型 采用2003年中华消化内镜学会大连会议制定的慢性胃炎分型分级标准,分为浅表性胃炎、糜烂性胃炎、出血性胃炎、萎缩性胃炎。同时存在多种病变时以主要病变计算。

1.3 病理诊断及炎症的病理分级 胃镜下取5块标本，胃窦2块，取自距幽门2～3 cm 的大弯和小弯；胃体2块，取自距贲门8 cm 的大弯和约距胃角近侧4 cm的小弯；胃角1块，用于组织病理学观察病理。将病理切片进行苏木素-伊红染色，诊断LGIN。按2000版WHO标准进行诊断，LGIN指结构和细胞学异常多发生于上皮下半部；细胞核紧密排列在基底，核染色质密集深染，核增大，分裂象较少，可保持一定极性；腺体结构较不规则，形态较紊乱，可出现背靠背及共壁。根据慢性炎性细胞的密集程度和浸润深度分级，轻度炎症：慢性炎性细胞较少并局限于黏膜浅层，不超过黏膜层的1/3；中度炎症：慢性炎性细胞较密集，超过黏膜层的1/3，达到2/3；重度炎症：慢性炎性细胞密集，超过黏膜层的2/3。

1.4 Hp感染的诊断 快速尿素酶法：于胃窦和胃体各钳取1小块组织，两者均为阳性结果判为Hp阳性，否则为Hp阴性。

本文要点提示——

(1)幽门螺杆菌(Hp)阳性患者血清表皮生长因子(EGF)水平高于Hp阴性患者，但前列腺素E2(PGE2)水平低于Hp阴性患者。血清EGF和PGE2在合并Hp感染的胃上皮内瘤变起一定作用。

(2)浅表性胃炎、糜烂性胃炎、出血性胃炎及萎缩性胃炎患者无论是否感染Hp其血清EGF、PGE2水平比较均无差异。

(3)无论是否感染Hp，胃炎伴低级别胃上皮内瘤变患者，随着炎症程度的加重，血清EGF水平升高，PGE2水平降低。

1.5 血清EGF及PGE2水平测定 患者均隔夜空腹10 h以上取肘静脉血6～8 ml，2 903 r/min(离心半径4 cm) 离心10 min，收集血清。将血清于-70 ℃保存，用于EGF及PGE2水平的测定。EGF检测试剂盒及PGE2检测试剂盒均为美国R&D公司生产，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法，操作按说明书进行，检测血清EGF和PGE2的水平。

2 结果

2.1 胃镜和病理诊断结果 82例患者初次胃镜诊断为浅表性胃炎16例、糜烂性胃炎52例、出血性胃炎9例、萎缩性胃炎5例。病理诊断为慢性炎症伴LGIN，其中轻度炎症34例、中度炎症42例、重度炎症6例。Hp阳性58例，Hp阴性24例。

2.2 Hp阳性和Hp阴性患者血清EGF及PGE2水平比较 Hp阳性患者较Hp阴性血清EGF水平升高，PGE2水平降低，差异均有统计学意义(P<0.05，见表1)。

Table1 Comparison of serum EGF and PGE2 levels in Hp positive and Hp negative patients

组别例数EGFPGE2Hp阳性581807±499118±18Hp阴性24 685±17 210±34t值1428115751P值 0003 0001

注：EGF=表皮生长因子，PGE2=前列腺素E2

2.3 Hp阳性和Hp阴性不同胃镜下分型患者血清EGF、PGE2水平比较 Hp阳性患者中浅表性胃炎12例、糜烂性胃炎38例、出血性胃炎5例、萎缩性胃炎3例。Hp阳性不同胃镜下分型患者血清EGF、PGE2水平比较，差异无统计学意义(P>0.05，见表2)。Hp阴性患者中浅表性胃炎4例、糜烂性胃炎14例、出血性胃炎4例、萎缩性胃炎2例。Hp阴性不同胃镜下分型患者血清EGF、PGE2水平比较，差异无统计学意义(P>0.05，见表3)。

2.4 Hp阳性和Hp阴性不同病理分级患者血清EGF、PGE2水平比较 Hp阳性患者中轻度炎症24例、中度炎症30例、重度炎症4例。Hp阳性不同病理分级患者血清EGF、PGE2水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)；其中与轻度炎症患者比较，中度炎症患者和重度炎症患者血清EGF水平升高、PGE2水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与中度炎症患者比较，重度炎症患者血清EGF水平升高、PGE2水平降低，差异有统计学意义(P<0.05，见表4)。

Hp阴性患者中轻度炎症10例、中度炎症12例、重度炎症2例。Hp阴性不同病理分级患者血清EGF、PGE2水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)；其中与轻度炎症患者比较，中度炎症患者和重度炎症患者血清EGF水平升高、PGE2水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与中度炎症患者比较，重度炎症患者血清EGF水平升高、PGE2水平降低，差异有统计学意义(P<0.05，见表5)。

Table2 Comparison of serum EGF and PGE2 levels in Hp positive patients with different endoscopic classifications

分型例数EGFPGE2浅表性胃炎121921±509115±14糜烂性胃炎381753±458118±20出血性胃炎51876±668114±20萎缩性胃炎31919±858134±12F值08270919P值05340438

Table3 Comparison of serum EGF and PGE2 levels in Hp negative patients with different endoscopic classifcations

分型例数EGFPGE2浅表性胃炎4704±223205±38糜烂性胃炎14668±135231±37出血性胃炎4759±96213±16萎缩性胃炎2619±226192±17F值08770799P值05460509

Table4 Comparison of serum EGF and PGE2 levels in Hp positive patients with different pathological grading

分级例数EGFPEG2轻度炎症241349±206129±18中度炎症302048±320∗112±12∗重度炎症42742±64∗△91±04∗△F值1432915520P值00000000

注：与轻度炎症比较，*P<0.05；与中度炎症比较，△P<0.05

Table5 Comparison of serum EGF and PGE2 levels in Hp negative patients with different pathological grading

分级例数EGFPEG2轻度炎症10545±114219±39中度炎症12772±44∗203±24∗重度炎症2865±106∗△197±67∗△F值1467512321P值00210038

注：与轻度炎症比较，*P<0.05；与中度炎症比较，△P<0.05

3 讨论

EGF是一种能刺激或抑制多种细胞增殖和分化的多肽。EGF可以刺激上皮细胞中mRNA、 DNA以及蛋白质的合成,促进黏膜上皮的增生[6-7]。在慢性萎缩性胃炎大鼠中，EGF水平明显升高，血清PGE2和胃泌素水平明显降低，同时慢性萎缩性胃炎大鼠EGF水平的升高与表皮生长因子受体(EGFR)高表达有关[8-10]。EGF和EGFR在胃癌中有很强的表达[11]。EGF基因过度表达或拷贝数增加能促进正常细胞的转化。癌旁组织或不典型增生细胞和肿瘤细胞的过渡区有EGF异常表达,肿瘤细胞分泌因子刺激肿瘤周围的细胞表达EGF,从而使周围的正常组织,细胞等逐渐向恶性表型转化[12]。

有研究显示Hp感染和高盐饮食为GIN的致病因素，这与胃癌的发病机制和肿瘤演进过程是一致的[13-14]。Hp感染可使上皮细胞增生活跃，其增殖超出正常水平1倍以上。根除Hp后，其增殖水平恢复正常。新近研究也表明Hp可通过促进上皮细胞的凋亡而刺激代偿增生过程[15-16]。本研究中，Hp阳性率达70.7%(58/82)，推测Hp可能参与GIN的发病。Hp阳性患者EGF水平高于Hp阴性患者，且随着炎症程度的加重，EGF水平逐渐上升。Hp感染引起GIN患者EGF 水平升高与胃黏膜炎症程度有一定的关系，Hp对胃黏膜的损伤，引起的炎症越重，对EGF的促分泌作用越明显。合并Hp感染GIN患者EGF参与胃黏膜炎症的发生，可能由于Hp引起局部黏膜反复炎症，刺激血清中EGF分泌增加，从而刺激胃黏膜上皮细胞的分裂、增殖，进而导致胃黏膜上皮增生产生GIN。

PGE2为目前公认的细胞保护因子，能通过抑制胃酸分泌，增加黏膜血流，使已受损的胃黏膜修复[17-18]。本研究中Hp阳性患者PGE2水平低于Hp阴性患者，随着内镜下炎症程度加重，PGE2水平逐渐下降。Hp可以引起较重的炎性反应，Hp对黏膜上皮的直接作用,使胃黏膜炎性细胞数量增加,同时产生大量的炎性递质，损伤细胞免疫功能,同时也影响胃黏膜的分泌功能,这可能是本研究所见Hp阳性GIN患者PGE2减少的原因之一。

本研究所有病例的初次胃镜诊断中，糜烂性胃炎占慢性胃炎的63.4%(52/82)，浅表性胃炎、出血性胃炎和萎缩性胃炎共占36.6%(30/82)，说明多种类型的胃炎均可能发生GIN，以糜烂性胃炎居多，但是在不同类型的胃炎中，EGF及PGE2水平没有差异。而随着炎症程度加重，EGF及PGE2水平差异显著，胃镜下分型与炎症程度的进展不是一定相伴发生，其机制需要进一步研究。

因血液中EGF水平过度升高，而主要作为局部激素的PGE2水平升高相对不足，从而引起胃黏膜上皮细胞的过度增生导致GIN。在合并Hp感染的情况下EGF参与二次打击，造成胃黏膜损害加重，存在矫枉过正现象，这种矫枉过正也可能是合并Hp感染胃炎容易发生GIN的重要机制之一。GIN患者胃黏膜慢性炎症程度与EGF分泌升高和PGE2分泌相对不足有关。血清EGF和PGE2在合并Hp感染的GIN患者胃黏膜损伤中起一定作用，为预防Hp感染造成胃黏膜损伤加重应尽早根除Hp。HGIN具备与肿瘤细胞相类似的生物学特征，有发展为肿瘤细胞的潜在趋势,临床上多采取手术或内镜下切除等方式从而达到治疗目的。而LGIN经过药物及保守治疗，部分可以逆转。因此，本研究将LGIN作为研究对象，研究EGF和PGE2在合并Hp感染的GIN患者中的作用，为GIN癌变的预防提供了参考依据。

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