新疆石河子地区对猪圆环病毒2型抗体水平的检测与分析

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（1．石河子大学动物科技学院，新疆石河子　832003；2．新疆生产建设兵团第八师石河子总场北泉镇兽医站，新疆石河子　832012）

新疆石河子地区对猪圆环病毒2型抗体水平的检测与分析

王礼伟1，贾义平1，屈勇刚1，王苇1，梁晏2，杨蓓1

（1．石河子大学动物科技学院，新疆石河子832003；2．新疆生产建设兵团第八师石河子总场北泉镇兽医站，新疆石河子832012）

为了解新疆石河子周边猪场猪圆环病毒2型（PCV）免疫抗体整体水平，并制定合理有效的免疫程序，采集石河子周边13个养殖场共726份猪的血清，采用间接ELISA（酶联免疫吸附试验）试剂盒进行分析。检测结果表明，整体猪群阳性率整体水平为98.08%，猪场的抗体水平均在80%以上，抗体水平为100%的猪场占猪场总数的61.54%。同时，种公猪、母猪、育肥猪、种公猪的抗体的整体水平均达到95%以上，而育肥猪抗体水平最低，为95.15%。该结果能够进一步了解石河子周边地区猪场圆环病毒抗体的免疫整体水平，为制定合理的治疗措施和免疫程序提供参考。

圆环病毒2型；ELISA；抗体水平；阳性率

猪圆环病毒感染是由圆环病毒2型（PCV-2）所引起一种传染病。PCV2感染猪后可引发仔猪断奶后多系统衰弱综合症、皮炎和肾病综合症、增生性坏死间质肺炎和繁殖障碍等疾病[1]。1997年加拿大和新西兰学者初次发现这种疾病，目前已经遍布世界养猪国家和地区，并造成了巨大经济损失，引起了国际兽医界的高度重视。我国于2001年首次分离到这种病毒，现已在我国猪群中广泛流行。由于该病除了自身带来的严重危害外，还导致猪群产生严重的免疫抑制，造成继发或并发性的临床问题，给养殖户带来了严重困扰和巨大经济损失[2]。

近年来，随着我国的养殖业朝着规模化的方向发展，新疆石河子地区的养猪行业水平也有了极大提升。但是，在常见的传染病防治上，仍然有很多问题，严重制约着当地养殖行业的发展。为进一步了解石河子地区圆环病毒的感染情况，为该病流行病学调查、监控提供初步的数据以及为养殖户提供合理的免疫程序，本试验采用间接ELISA的检测方法，对采集的血清进行抗体检测、分析，希望对该病的防制提供一定的参考与帮助。

1　材料和方法

1.1材料

1.1.1样品来源。2013年10月至2014年1月期间，采集石河子辖区内13个已经免疫过PCV2型疫苗的猪场（母猪存栏量在400头及以上的2个、100头～400头的猪场7个、100头以下的4个）不同类别的猪群血清共726份。其中，种公猪血清110份、母猪血清254份、保育猪血清227份、仔猪血清135份。通过前腔或耳源静脉进行采血，血液静置一段时间后收集析出的血清，将盛有血清的EP管放置于-20℃冰箱中保存备用。

1.1.2主要试剂和仪器。猪圆环病毒ELISA抗体检测试剂盒（购自武汉科前生物制品有限责任公司，批号：130906）、5ml兽用一次性采血盛血器，自动酶标仪、恒温培养箱、平板震荡仪等。

1.2方法

1.2.1样品检测。根据试剂盒上的操作步骤，先对待检血清进行一定比例的稀释，再将抗原包被板进行洗涤。将刚才稀释好的血清样品按照对应的顺序加入到洗涤好的抗原包被板中，同时按照要求设定阴阳对照组各2孔，在震荡仪上震荡均匀后，置于37℃的温箱中温浴30min。然后，弃去抗原包被板中的混合液，对抗原包被板进行再次的洗涤数次，并在吸水纸上用力拍干后，每孔再次加入羊抗猪酶标二抗，同样进行37℃温浴30min后，随后弃掉混合液，再次对抗原包被板进行洗涤拍干。将洗涤拍干好的抗原包被板中每孔加入底物A、底物B后震荡混匀后，室温避光显色10min，最后，每孔加入终止液。在10min内，用酶标仪在630nm的波长下对样品的OD值进行测定，根据所测OD值的大小，进行样品抗体水平的判断。

1.2.2结果判定。试验成立的前提条件是阳性对照孔平均OD630的值≥0.7，阴性对照孔平均OD630的值＜0.3。根据酶标仪测定OD值的大小，若样品OD630值>0.42，判定为抗体阳性；样品OD630值介于0.38到0.42之间，判定为可疑；样品OD630值<0.38，判定为抗体阴性。

1.2.3统计分析。利用offce办公软件对试验所测数据进行统计并分析。

2　结果

2.1猪场圆环病毒免疫抗体ELISA检测结果

表1　13个已免疫猪场圆环病毒免疫抗体ELISA检测结果

由表1可知，A～M这13个猪场之间的抗体水平整体水平较好，但是也存在一定的差异，抗体阳性率最高的可达到100%，抗体水平最低的猪场阳性率为80.00%，抗体水平达到100%以上的有8个，占13个猪场的61.54%，说明当地猪场对该病的重视，整体效果良好。经过初步统计，石河子周边地区抗体阳性率水平为98.08%，抗体的均值为3.49。同时，通过变异系数的情况，各个猪场抗体水平的离散程度也有一定的区别，其中，H猪场的变异系数最小，仅为0.15，数据的整体水平比较平稳，而G猪场的变异系数较大，为0.62，抗体水平也低为80.00%，需要引起重视。

表2　4种猪群圆环病毒免疫抗体ELISA检测结果

2.2不同猪群的抗体水平

通过表2的数据分析可知，不同猪群之间的抗体整体水平良好，均值为98.08%，其中，种公猪和母猪的抗体水平最高，均为100.00%，其次仔猪的97.78%和育肥猪的95.15%，试验说明仔猪和育肥猪的抗体水平相对偏低，需要及时的补免，加强断奶后抗体的水平。

3　讨论

3.1整体猪群抗体阳性率结果分析

通过对石河子13个猪场血清中圆环病毒抗体的检测，试验结果表明，该地区养殖户对猪圆环病毒的防控比较重视，抗体整体水平较高，一般以上的猪场的抗体水平高达100.00%，即使最低的猪场水平也达到了80.00%，相对于河南、湖南等多个地区免疫抗体的平均水平而言，石河子猪场圆环病毒抗体水平总体水平较高，免疫程序取得了良好的结果[3-4]。但是，个别猪场的仍然不容乐观，应当引起我们从业人员的高度重视，鉴于该病严重的危害性，我们应该加强控制力度，及时的做好预防措施及对不合理的免疫程序进行调整[5]。

3.2不同类别猪群抗体阳性率结果分析

通过对种公猪、母猪、保育猪及仔猪的抗体水平的检测，我们发现各类猪群整体的水平较高，抗体水平的均值高达98.08%。其中，种公猪和母猪的免疫抗体水平都为100.00%，这可能是和这两种猪群的免疫系统发育完善，免疫能力较强或多次免疫的结果有关，能够抵抗圆环病毒的感染。而仔猪和育肥猪的抗体分别为97.78%、95.15%，其中仔猪和育肥猪的抗体相对较低，可能的是母源抗体的不足，机体免疫系统发育不足等因素有关，这种情况的出现和宋永奇等对河南地区的部分猪场检测结果相一致[6]。针对母源抗体不足的情况，我们可以通过ELISA对不同日龄的仔猪进行细化检测，当发现仔猪抗体水平不足时候，及时地对仔猪进行首免，或者二免，维持抗体在一定合理的范围。当然，由于本次试验采集的样本数目的限制，仍然有很多不确定影响因素待于进一步研究[7]。

根据本次对石河子周边地区13个已经免疫的猪场抗体检测结果进行分析，我们初步得到猪圆环病毒抗体水平的概况。通过分析，可以看出该地区整体抗体水平相对良好。但是，鉴于我国各地猪群普遍存在PCV2的感染情况，建议相关从业人员对该病的流行引起高度的重视，加强饲养管理水平，提高卫生消毒意识，提高猪群机体自身免疫抗体水平，做到防患于未然[8]。

[1]陈溥言.兽医传染病学[M].5版．北京：中国农业出版社，2006：231-233．

[2]DupoutK，NielsensO，BaekboP，etal．Genomic analysisofPCV2isolatesfromDanisharchivesandacurrentPMWScase-controlsupportsashiftingenotypeswith time[J]．VetMicrbiol，2008，128（1/2）：56-64．

[3]胡慧，王亚宾，陈丽颖，等．河南地区猪圆环病毒2型感染的血清流行病学调查[J]．畜牧与兽医，2010，42（10）：71-73．

[4]卢寄军，王祝荣，张进.湖南省猪圆环病毒2型流行病学调查[J]．中国动物检疫，2012，29（2）：42-43．

[5]孟纪萍，王建梅，武晓虎，等．猪圆环病毒2型和猪瘟病毒抗体检测和分析[J]．中国动物检疫，2012，29（12）：39-40．

[6]宋永奇，李荣誉，申艳敏，等．猪场母猪和仔猪圆环病毒2型感染情况调查[J]．中国畜牧兽医，2012．39（4）：200-203．

[7]王忠田，杨汉春，郭鑫．猪圆环病毒研究进展[J]．中国兽医杂志，2004．40（3）：33-35．

[8]韩雪，蔡林，倪建强，等．2009年我国猪群圆环病毒2型感染情况调查[J]．中国兽医学报，2012，32（7）：941-944．

Surveillance of Porcine Circovirus-2 Antibody in Shihezi Area in Xinjiang

WangLiwei1，JiaYiping1，QuYonggang1，WangWei1，LiangYan2，YangBei1
（1.CollegeofAnimalScience&Technology，ShiheziUniversity，Shihezi，Xinjiang832003；2.BeiquanTownVeterinaryStation，EighthAgriculturalDivisionofXinjiangProductionandConstructionCorps，Shihezi，Xinjiang832003）

Inordertounderstandtheimmuneantibodylevelsofporcinecircovirus-2（PCV2）inpigfarmssurroundingShihezi，Xinjiangandmakereasonableandeffectiveimmunizationprograms，726serumsampleswerecollectedfrom13farmsandtestedforantibodyusingindirectELISA（enzyme-linkedimmunosorbentassay）kit.The resultsshowedthattheoverallpositiverateinpigswas98.08%andtheantibodylevelsofallthefarmsweremorethan 80%；thefarmswith100%antibodylevelaccountedfor61.54%ofallfarms.Theoverallantibodylevelsinboars，sows，fatteningpigs，pigletswereallover95%；thefatteningpigshadthelowestantibodylevelofonly95.15%.The resultswereusefultounderstandtheimmuneantibodylevelofporcinecircovirusinShiheziregionandtoprovidereferencesinworkingoutreasonablecontrolmeasuresandimmunizationprograms.

porcinecircovirus2（PCV2）；ELISA；antibodylevels；positiverate

S855.3

B< class="emphasis_bold">文章编号：文章编号：

文章编号：1005-944X（2014）08-0049-03

屈勇刚