天津市奶牛结核病净化工程

，，，，，，，，

（1.天津市动物疫病预防控制中心，天津 300402；2.天津市武清区动物疫病预防控制中心，天津301700；3.天津市宝坻区动物疫病预防控制中心，天津 301600；4.天津农学院，天津 300210）

天津市奶牛结核病净化工程

刘建文1，任景江1，徐继鹏2，何振伯3，孙 涛1，李 洁1，刘 莹1，马文芝4，王志成1

（1.天津市动物疫病预防控制中心，天津 300402；2.天津市武清区动物疫病预防控制中心，天津301700；3.天津市宝坻区动物疫病预防控制中心，天津 301600；4.天津农学院，天津 300210）

为完成奶牛结核病净化工程，天津市引进了γ-干扰素检测新技术，结合传统的检测、扑杀、消毒、检疫、流调、监管等技术措施，制定了奶牛结核病净化技术规范。根据本市奶牛结核病防治实际情况，制定了全市奶牛结核病净化项目实施方案，确定了科学的可行的以区县为单位分区实施的净化技术路线。通过4年的努力，全市共完成奶牛结核病检测71.3万头次，检出阳性牛170头，且阳性牛呈逐年下降趋势，2013年无阳性牛检出。至2013年底，全市所有农业区县均达到农业部颁布的奶牛结核病净化标准，并通过市畜牧兽医局组织的考核验收。本文对项目实施过程及成功经验进行了分析和探讨，以期为其它地区开展奶牛结核病净化工作提供参考。

奶牛；结核病；净化；探讨

牛结核病（Bovine Tuberculosis，BTB）是由结核分枝杆菌引起的一种人畜共患慢性传染病，以病牛贫血、消瘦、体虚乏力、精神萎靡不振和生产力下降为主要特征［1］。该病在世界各国广泛分布，世界动物卫生组织（OIE）将其列为B类动物疫病，我国也将其列为二类动物疫病。在家畜中，奶牛最易感，其次是水牛和黄牛。由于奶牛和人类关系密切，特别是牛乳及其制品消费日益广泛，奶牛结核病严重威胁着人类健康。据国外学者研究报道，世界上结核病人中约有15%是通过饮用结核病牛奶而感染的［2］。杨醉宇等［3］也通过试验发现，9.5%的结核病牛是由人分枝杆菌感染，而结核病人中有10.6%为牛分枝杆菌感染。据报道，我国于1985年和1987年开展了两次全国奶牛抽样调查，发现牛结核病的患病率分别为5.83%和5.43%，感染率也相当高［4］。世界卫生组织专家委员会早在1960年就明确提出在牛群中消除结核病的理念［5，6］。

鉴于我国奶牛养殖业蓬勃发展，而且奶牛养殖存在规模化集中饲养的特点，人接触病牛流产物，饮用感染牛的生乳或乳制品均可被感染，所以开展奶牛结核病净化工作势在必行［7］。

近年来，天津市对奶牛结核病防控工作非常重视。市畜牧兽医局于2010年专门制定了“天津市奶牛结核病净化工程方案”，并明确详细可行的净化措施和技术路线，同时制定了“天津市奶牛结核病净化考核标准及验收办法”。在净化过程中，为了克服现行的国家奶牛结核病检测标准PPD变态反应试验中存在的非特异性高和操作耗时费力等缺点，市动物疫病预防控制中心引进了当前在欧盟和美国等已经得到了广泛应用的γ-干扰素检测技术［8-11］，通过与传统的检测、扑杀、消毒、检疫、流调、监管等技术集成，制定了天津市地方标准《奶牛结核病净化技术规范》，为在全市完成奶牛结核病净化任务提供了可靠的技术支撑。

1 技术路线

按照农业部《牛结核病防治技术规范》，结合天津市具体实际，我市奶牛结核病净化工作采取以区县为单位分区管理。依据奶牛结核病阳性率不同分为四个区域，分别为未控制区（阳性率＞0.5%）、控制区（阳性率＜0.5%）、稳定控制区（阳性率＜0.1%）和净化区（阳性率＜0.05%）。鉴于我市近年来奶牛结核病报告的阳性率＜0.1%，为科学开展净化工作，我市净化方案按三个区域划分为控制区、稳定控制区和净化区，然后根据各区具体情况分步推进。检测技术路线见图1。

对于市内跨区调运和外埠引进的奶牛，强化调运检疫和监督制度，同时加强生鲜乳销售监管，确保出售的生鲜乳均来自经检测无结核病的奶牛。通过采取严格的检疫措施，切断一切可能的结核病传入途径，确保净化效果。检疫技术路线见图2。

图1 天津市奶牛结核病净化检测技术路线图

图2 天津市奶牛结核病净化检疫技术路线图

2 净化措施

按照中华人民共和国国家标准《动物结核病诊断技术》（GB/T19645－2002）和农业部《牛结核病防治技术规范》，参照牛结核病防治相关文献［12-14］，结合天津市具体情况，主要采取了以下净化技术措施。

2.1 检测

检测方法主要采用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验，每年上下半年各检测一次（犊牛应于20日龄时进行第一次检测，100～120日龄时进行第二次检测）。第一年度全市存栏奶牛均按100%比例检测，第二年度已进入稳定控制区的区县按50%的比例抽检，未进入稳定控制区的区县仍按100%比例检测；第三年度拟进入净化区的区县上半年按50%抽检，下半年按10%抽监。已进入净化区的区县按10%抽检。

2.2 可疑和阳性牛处理

PPD皮内变态反应检测阳性牛和可疑牛要立即隔离，限制其移动，应用γ－干扰素检测技术复检。复检结果为阳性的，则按阳性牛处理；若仍为可疑，再复检，结果仍为可疑者，视同阳性牛处理。可疑牛确诊阴性的，勿马上混群，隔离1个月后再检测阴性方可混群。对于确诊的阳性奶牛，应立即采取扑杀、焚烧、深埋等无害化处理措施，并按程序做好扑杀记录，并及时上报扑杀结果。检出阳性牛的牛群应进行反复检测，每次间隔3个月，发现阳性牛及时处理。

2.3 消毒处理

奶牛群如检出的阳性牛，实施处理措施后，对可能污染的场所、车辆、用具、物品进行严格消毒。对阴性场或假定健康场坚持经常性消毒，饲养场及牛舍出入口处设置消毒池，定期更换消毒药。牛舍内的全部用具应定期消毒，产房每周进行一次大消毒，分娩室在临产牛生产前及分娩后各进行一次消毒。

2.4 检疫监督

本市区域内跨区县调运奶牛，输出区县严格执行产地检疫规程，查验奶牛健康检测合格证书，对检疫合格且具有健康检测合格证的奶牛出具产地检疫证明。从外埠引进奶牛及其精液胚胎，要严格执行检疫审批制度。跨省调运奶牛必须经指定通道进入，并接受动物卫生监督机构检查和消毒。从外埠引入的奶牛，经隔离观察和结核病检测合格后方可混群饲养。

2.5 防疫监管

动物卫生监督机构负责监督奶牛饲养场（户）履行动物防疫法律法规规定的检测、消毒、无害化处理、建立防疫档案、加施畜禽标识、疫情报告、申报检疫等义务。生鲜乳收购站必须凭奶牛健康证明收购鲜奶，不得收购经检测不符合健康标准或者未经检疫合格的奶牛生产的生鲜乳。

2.6 流行病学调查

在检测或检疫过程中发现阳性牛时，要立即开展紧急流行病学调查，追根查源，消灭疫源。

2.7 人员防护

从事奶牛养殖生产、诊疗检疫的人员应每年进行健康检查，发现患有结核病或其他人畜共患病的员工应立即调离岗位，进行场外治疗。新员工入职前必须经健康检查，确认无结核病与其他传染病的方可录用。在奶牛结核病检疫净化过程中，技术人员应按要求做好必要的个人防护。

2.8 技术培训

本项目引进了先进的牛结核病检测新技术γ－干扰素检测技术。为了促进新技术在我市示范推广，市动物疫病预防控制中心外聘专家，专门举办了奶牛结核病γ－干扰素检测技术培训班。另外，虽然PPD变态反应试验技术要求不太高，但是结果判定要求以皮皱厚度的增加值为依据，不同人操作易造成人为误差。为此，市级和区县级动物疫病预防控制中心均多次聘请有经验的专家开展不同形式的技术培训。同时，我们还重点对基层兽医技术人员和奶牛场技术人员进行了针对性的防疫技术培训，以提高其对动物疫病危害的认识和防控水平，督促其按要求做好各项防疫工作，自觉落实各项防控措施。

3 净化成效

在各级动物疫病防控人员的共同努力下，天津市已于2013年底完成了奶牛结核病净化任务，检测情况详见表1。4年期间，全市共检测奶牛结核病71.3万头次，检出阳性牛170头。其中，2010年检测奶牛207781头次，检出阳性牛91头；2011年检测奶牛200205头次，检出阳性牛76头；2012年检测奶牛185601头次，检出阳性牛3头；2013年检测奶牛120021头次，无阳性牛检出。所有阳性牛均按要求进行了扑杀和无害化处理，并向养殖场户发放了扑杀补贴。在净化工作有序推进的基础上，市畜牧兽医局组织专家组，按照“天津市奶牛结核病净化考核标准及验收办法”对申请达标区县进行了考核验收。2011年，塘沽、东丽、津南三个区达到净化标准，并通过市畜牧兽医局组织的考核验收；2012年，西青、北辰和大港也顺利达标验收；2013年，其他区县也陆续达到净化标准。至2013年底，全市所有奶牛养殖区县均达到净化标准并通过考核验收。

4 分析与讨论

天津市奶牛结核病净化工作的顺利完成，不但得益于奶牛养殖的普遍规模化和标准化，而且得益于项目实施过程中强有力的组织保障、法律保障、技术保障、体系保障，以及农业部领导、专家、基层机构、防疫队伍和养殖业主的强力支持，现总结经验如下。

表1 天津市奶牛结核病净化检测情况

4.1 科学决策，有力协调，分工明确，执行到位

市级和区县级均成立了奶牛结核病净化工作领导小组、专家组及专项工作组，加强奶牛结核病净化工作的领导和组织实施，明确目标和任务，把责任落实到部门、人员，确保了工作有计划按步骤开展。天津市奶牛结核病净化项目涉及全市12个有农业的区县和市农垦集团，包括所有的奶牛养殖小区和场（户），净化团队包括奶牛结核病净化工作领导小组、专家组和专项工作组，职能部门包括畜牧兽医管理部门、动物疫病预防控制机构、动物卫生监督机构和基层畜牧兽医站。在如此庞大的团队中，净化工作能有条不紊顺利开展，主要归结以下几点：一是市畜牧兽医局作为净化工作领导决策机构，宏观统筹，组织协调项目稳步推进；二是市和区县两级疫病预防控制中心部署缜密，组织有力，指导到位；三是动物卫生监督机构通过加强养殖和调运环节的防疫监管，保证了净化工作的成效。

4.2 完善的法律制度并有力执行为项目实施奠定了坚实的法律基础

《中华人民共和国动物防疫法》是奶牛结核病净化工作的根本法律，农业部和天津市颁布的《动物检疫管理办法》《天津市动物防疫条例》《乳品质量安全监督管理条例》和《动物疫情报告管理办法》是我市奶牛结核病净化工作的法律文本。为推进我市奶牛结核病净化工作的开展，市级和区县级兽医主管部门每年均制定具体的奶牛结核病净化工作实施方案，并以正式文件下达，为净化工作目标的完成奠定了坚实的法定基础。

4.3 科学的技术规范和标准体系为项目开展提供了理论指导

引入牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测技术，通过优化条件建立牛结核病单克隆抗体夹心ELISA检测方法的标准化规程，制定γ-干扰素检测技术规范；参照中华人民共和国国家标准《动物结核病诊断技术（GB/T19645－2002）》，通过优化试验条件制定适于奶牛结核病检疫的PPD变态反应试验技术规范；以新型检测技术为载体，通过检疫与扑杀相结合的技术策略，构建奶牛结核病净化集成技术平台，制定奶牛结核病净化技术规范。上述规范的制定，完善了项目实施的技术标准体系，为我市奶牛结核病净化工作的开展提供理论指导，同时为国内其他省市开展该项工作提供重要的参考资料。

4.4 农业部领导和国内知名专家的支持和指导为项目开展提供了强大后盾

项目开展之初，由于我市是在全国率先开展此项工作而经验不足，市局和市疫控中心领导多次就结核病净化工作向农业部领导汇报并征求意见。农业部有关领导在对我们的项目给予充分肯定的同时，也提出了许多建设性的建议。此外，为了提升检测技术水平，我们查阅了大量国内外文献，虚心向中国农业科学院哈尔滨兽医研究所和华中农业大学等国内知名专家请教，获得了宝贵的理论知识和经验心得，为项目的顺利完成提供了有力的技术支持。

4.5 区县领导的支持和基层兽医工作者的努力是项目完成的有力保障

区县兽医部门领导对奶牛结核病净化工作高度重视，由局长亲自挂帅，主任、所长等亲自组织，围绕市级部署，制定完善的净化方案，集中技术骨干组成了净化工作专家组和行动小组，通过积极宣传和多方位培训的形式，充分调动奶牛养殖业主的积极性，科学组织开展净化工作，为项目的顺利完成提供了有力保障。

4.6 养殖业主的高度觉悟和良好配合是项目完成的根本

结核病净化工作的主体还是养殖场（户）。净化场的建立需要通过检测淘汰阳性牛来实现。由于财政补贴偏低，扑杀阳性牛会给养殖场（户）造成较大的经济损失。在净化过程中，绝大多数养殖场（户）都表现较高的觉悟性，积极配合开展检测净化工作，特别是以农垦集团嘉立荷奶牛场为代表的规模化养殖场，利用自身较高的技术力量和较强的经济实力，主动自行开展检测净化工作，为我市奶牛结核病净化工作全面达标做出了卓越贡献。

总之，天津市奶牛结核病净化项目的完成，在国内率先达到农业部颁布的奶牛结核病净化标准，制定完善了奶牛结核病净化技术规范，为我市其它动物疫病的净化和消灭工作打下良好基础，也为我国其他省市开展动物疫病净化工作提供了经验。

[1]王云霞.牛结核病的现状及诊断研究进展［J］.动物医学进展，2006，27（6）：38-41.

[2]Livingstone P G，Ryan T J，Hancox N G，et al. Regionalization：a strategy that will assist with bovine tuberculosis control and facilitate trade [J]. Veterinary Microbiology，2006，112：291-301.

[3]杨醉宇，刘文杰，郭社旺，等.人牛结核病互感关系的探讨［J］.畜牧兽医科技信息，2009（6）22-23.

[4]鲁俊鹏，邹潍力，林彦星，等.牛结核病诊断方法研究进展［J］.动物医学进展，2006，27（11）：25-28.

[5]甘海霞，何宝祥，刘棋.牛结核病的危害与流行情况［J］.广西畜牧兽医，2007，23（6）：286-288.

[6]王海艳，刘中学，石新华，等.牛结核病的现状与未来研究方向［J］.检验检疫科学，2007，3（11）：63-66.

[7]王淑娟，孙成友，宁晓晖，等.规模化奶牛场结核病的净化与防控［J］.中国奶牛，2013，241（1）：27-31.

[8]徐继鹏，刘建文. γ－干扰素检测技术对奶牛结核病检疫的初步应用［J］.中国动物保健，2013，15（2）：33-35.

[9]Rlche P，Winter N，Triccas J A，et al. Expression of Mycobacterium tuberculosis smegmatis：purifcation，immunogenicity and application to skin tests for tuberculosis[J]. Clin Exp Immun，1996，103（2）：226-232.

[10]刘思国，王春来，张秀华，等.牛结核病病原生态学和流行病学研究［J］.中国畜牧兽医，2005，32（3）：60-62.

[11]Smith T. A comparative study of bovine tubercle bacilli and of human bacilli from sputum [J]. Infect Immun，1998，（3）：451-511.

[12]陈淑爱，张洪安.牛结核病防控技术措施［J］.中国牛业科学，2012，38（1）：81-82.

[13]王芳，张彦昌.两种牛结核病检测方法的比较［J］.中国兽医杂志，2013，49（4）：39-40.

[14]肖开提，阿曼石丽·加孜，图尔荪·艾合麦提，等.新疆边境地区奶牛结核病流行病学调查研究［J］.中国动物检疫，2012，29（5）：53-54.

Tuberculosis Eradication in Dairy Cow in Tianjin

Liu Jianwen1，Ren Jingjiang1，Xu Jipeng2，He Zhenbo3，Sun Tao1，Li Jie1，Liu Ying1，Ma Wenzhi4，Wang Zhicheng1

Tianjin Center for Animal Disease Prevention and Control，Tianjin 300402；2.Tianjin Wuqing Center for Animal Disease Prevention and Control，Tianjin 301700；3.Tianjin Baodi Center for Animal Disease Prevention and Control，Tianjin 301600；4.Tianjin Agricultural College，Tianjin 300210 ）

In order to accomplish the dairy cow tuberculosis eradication project in Tianjin，the technology standards for bovine tuberculosis eradication in dairy cow were developed in combination with traditional technical measures，such as detection，culling，disinfection，quarantine，epidemiological investigation and supervision. The implementation schemes were worked out according to the actual bovine tuberculosis situation in Tianjin，and the scientifc and feasible technical route was determined by eradication of the disease in county（district） as a unit. During the past four years，0.713 million dairy cows were detected and 170 of them was positive，and the number of positive cows was reduced year by year. In 2013，no positive dairy cow was detected and all the counties with agriculture met the bovine tuberculosis freedom standard issued by Ministry of Agriculture and get through the examination conducted by Tianjin Animal Husbandry and Veterinary Bureau. This article analyzes and discusses the implementation process and the successful experiences，hoping to provide advices on dairy cow tuberculosis eradication.

dairy cow；Tuberculosis；cleaning；discuss

R516

：B

1005-944X（2014）08-0058-05

天津市农业科技示范推广项目，项目编号：201301020

王志成