桂产藿香蓟乙醇提取物镇痛作用研究

唐秀能++韦红棉（等）

[摘要] 目的 观察桂产藿香蓟乙醇提取物的镇痛作用，探讨其作用机制。 方法 各自分别取60只合格昆明小鼠，随机分为空白对照组、阿司匹林组（0.4 g/kg）、桂产藿香蓟乙醇提取物高、中、低剂量组，每组各12只。采用热板法、扭体法和甩尾法来观察桂产藿香蓟乙醇提取物的镇痛作用，并测定热板法小鼠血清丙二醛（MDA）、前列腺素E2（PGE2）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性。 结果 ①与空白对照组比较，桂产藿香蓟乙醇提取物能显著提高热板法小鼠热刺激痛阈，在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期，差异均有统计学意义（P < 0.05 或P < 0.01），显著降低小鼠血清MDA和PGE2含量，提高SOD活性，差异有统计学意义（P < 0.05 或P < 0.01）。②与空白对照组比较，桂产藿香蓟乙醇提取物均可显著减少醋酸致痛时小鼠扭体反应的次数，差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01），其中桂产藿香蓟乙醇提取物高、中和低剂量组（6.0、3.0、1.5 g/kg）扭体抑制率分别为45.45%、35.65%和15.66%。③无论是与空白对照组比较还是与本组给药前比较，桂产藿香蓟乙醇提取物在给药后30、60、90、120 min能显著延长小鼠甩尾反应潜伏期，差异有统计学意义（P < 0.05 或P < 0.01）。 结论 桂产藿香蓟乙醇提取物具有显著的镇痛作用，其机制之一可能与减少炎症介质释放、清除氧自由基有关。

[关键词] 桂产藿香蓟乙醇提取物；镇痛；机制

[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2014）01（b）-0020-04

Study on analgesic effects of ethanol extract of Ageratum conyzoides.L. from Guangxi

TANG Xiuneng WEI Hongmian▲ LU Cuilin ZHOU Zhipin LI Jianzhe LIU Guanda

Ruikang Hospital Affiliated to Guangxi University of Chinese Medicine， Guangxi Zhuang Autonomous Region， Nanning 530011， China

[Abstract] Objective To observe analgesic effects of ethanol extract of Ageratum conyzoides.L. from Guangxi and to explore its analgesic mechanisms. Methods 60 Kunming mice were selected individually in hot-plate method， body-torsion method and swinging-tail method， all of them were divided into blank control group， Aspirin group （0.4 g/kg）， Ageratum conyzoides.L. low dosage group， medium dosage group， high dosage group with 12 rats in each group. Hot-plate method， body-torsion method and swinging-tail method were used respectively to investigate the analgesic effects of ethanol extract of Ageratum conyzoides.L. from Guangxi， and then， the contents of malondialdehyde （MAD） and prostaglandin E2 （PGE2） and the activity of superoxide dismutase （SOD） in hot-plate mice serum were measured. Results ①Compared with blank control group， thermal stimulation threshold in hot-plate mice was enhanced by the ethanol extract of Ageratum conyzoides.L. from Guangxi， the latency time of the mice's licking at 30， 60， 90， 120 min respectively were prolonged， the differences were statistically significant（P < 0.05 or P < 0.01）. Meanwhile， MDA and PGE2 productions were reduced and SOD level in mice serum enhanced， the differences were statistically significant （P < 0.05 or P < 0.01）. ②Compared with model control group， mouse twisting munbers were remarkably reduced by Ageratum conyzoides.L. from Guangxi， the differences were statistically significant （P < 0.05 or P < 0.01）. Body twisting inhibition rate in high， medium and low dosage group （6.0， 3.0， 1.5 g/kg） were 45.45%， 35.65% and 15.66% respectively. ③Not only compared with blank control group but also compared with former dose in each group， the latency of the tail flick response in the mice at 30， 60， 90， 120 min were prolonged respectively after given the ethanol extract of Ageratum conyzoides.L. from Guangxi， the differences were statistically significant （P < 0.05 or P < 0.01）. Conclusion The ethanol extract of Ageratum conyzoides.L. from Guangxi has significantly analgesic effects， one of its analgesic mechanisms may be relate to its ability of scavenging oxygen free radicals and reducing the release of inflammatory cytokines.

[Key words] Ethanol extract of Ageratum conyzoides.L.； Analgesic； Mechanism

藿香蓟属于菊科植物藿香蓟，又名胜红蓟、白花草、白花臭草、消炎草等，属一年生草本植物，多以全草或叶及嫩茎入药，传统药用功效为清热解毒、止血、止痛等，在亚洲、非洲、南美洲等地均广泛使用[1-2]。我国多分布于广东、广西、云南、贵州、四川、江西、福建等地，民间常用于治感冒发热、咽喉肿痛、疗疮湿疹、外伤出血、烧烫伤等[3]。本研究采用野生于广西田间荒地的桂产藿香蓟进行镇痛作用研究，旨在探讨其镇痛作用及机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 健康昆明种小鼠：体重（20±2）g；SPF级。动物许可证号：SCXK桂2009-0002，广西医科大学医学实验动物中心提供。

1.1.2 桂产藿香蓟乙醇提取物的制备 桂产藿香蓟地上部分阴干后粉碎，精确称取2 kg，加20倍量95%乙醇浸泡1 h后加热回流提取1 h，置冷后过滤，留置第1次滤液；药渣加10倍量95%乙醇，加热回流提取1 h，置冷后过滤，留置第2次滤液。合并2次滤液，减压回收乙醇，提取液减压浓缩，再分别配成实验所需的相应浓度的桂产藿香蓟乙醇提取物[4]。

1.1.3 药物、试剂及仪器 阿司匹林肠溶片，湖南新汇制药股份有限公司，批号121104；盐酸吗啡片，青海制药厂，批号20130317；冰醋酸、甲醇、氢氧化钾均为分析纯；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、丙二醛（MDA）试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供；GJ-8402型热板测痛仪，浙江宁海白石电子医药仪器厂。

1.2 方法

1.2.1 对小鼠热板实验的影响 将雌性小鼠放在水温调节到55℃的恒温水浴热板上，以小鼠舔后足的时间为痛阈指标。所有小鼠在给药之前均进行测痛，以痛阈值10～30 s为合格鼠。将合格小鼠60只随机分为5组：空白对照组、阿司匹林组（0.4 g/kg）、桂产藿香蓟乙醇提取物高、中、低剂量组（分别相当于生药6.0、3.0、1.5 g/kg），每组各12只。1次/d，连续灌胃给药7 d，末次给药后0.5、1、1.5、2 h各重复测定小鼠痛阈值，当痛阈值大于60 s时停止测试，按60 s记痛阈值。所有痛阈值测定结束后，立即行小鼠眼球取血，3500 r/min离心15 min，弃下层沉淀，留上清液。将上清液置于-20℃冰箱保存，随后按照试剂盒说明书的方法测定前列腺素E2（PGE2）、MDA的含量和SOD活性[5]。

1.2.2 对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响 另取一批小鼠60只，体重（20±2）g，雌雄各半，分组及给药同“1.2.1”项下。末次给药后1 h，每只小鼠腹部注射0.6%醋酸溶液0.2 mL，立即记录注射后15 min内各组小鼠的扭体反应次数，并计算扭体抑制率[6-7]。扭体抑制率（%）=[（空白对照组小鼠扭体均数-给药组小鼠扭体均数）/空白对照组小鼠扭体均数]×100%。

1.2.3 对甩尾法实验的影响 另取一批小鼠，将小鼠尾尖3 cm渗入（48.0±0.5）℃恒温水中，以小鼠第1次甩尾反应时间作为痛阈指标，所有小鼠在给药之前均进行测痛，以痛阈值10～30 s为合格鼠，共60只。随后分组及给药同“1.2.1项下”。末次给药后1 h，测定小鼠痛阈值，当痛阈值大于60 s时停止测试，按60 s记痛阈值[8]。

1.3 统计学方法

采用统计软件SPSS 13.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 桂产藿香蓟乙醇提取物对小鼠热板实验的影响

与空白对照组比较，阿司匹林组、桂产藿香蓟乙醇提取物高剂量组、中剂量组在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期（P < 0.05 或P < 0.01），桂产藿香蓟乙醇提取物低剂量组有延长的趋势，但差异无统计学意义（P > 0.05）。本组给药前后比较，桂产藿香蓟乙醇提取物高剂量组、中剂量组在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期（P < 0.05或P < 0.01），桂产藿香蓟乙醇提取物低剂量组有延长的趋势，但差异无统计学意义（P > 0.05）。见表1。

2.2 桂产藿香蓟乙醇提取物对小鼠血清PGE2、MDA含量及SOD活性的影响

与空白对照组比较，阿司匹林组、桂产藿香蓟乙醇提取物对小鼠血清PGE2、MDA含量及SOD活性具有显著的影响。阿司匹林组、桂产藿香蓟乙醇提取物高剂量组、中剂量组均能显著降低小鼠血清PGE2、MDA含量，明显提高小鼠血清SOD活性（P < 0.05 或P < 0.01）。见表2。

2.3 桂产藿香蓟乙醇提取物对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响

与空白对照组比较，阿司匹林组、桂产藿香蓟乙醇提取物高剂量组、中剂量组均可显著减少醋酸致痛时小鼠扭体反应的次数（P < 0.05或P < 0.01），桂产藿香蓟乙醇提取物低剂量组有减少醋酸致痛时小鼠扭体反应的次数的趋势，差异无统计学意义（P > 0.05）。见表3。

2.4 桂产藿香蓟乙醇提取物对小鼠甩尾反应的影响

与空白对照组比较，阿司匹林组、桂产藿香蓟乙醇提取物对小鼠甩尾反应具有显著影响。阿司匹林组、桂产藿香蓟乙醇提取物高剂量组、中剂量组在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠甩尾反应潜伏期（P < 0.05或P < 0.01），桂产藿香蓟乙醇提取物低剂量组有延长的趋势，但差异无统计学意义（P > 0.05）。组内给药前后比较，桂产藿香蓟乙醇提取物高剂量组、中剂量组在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠甩尾反应潜伏期（P < 0.05或P < 0.01），桂产藿香蓟乙醇提取物低剂量组有延长的趋势，但差异无统计学意义（P > 0.05）。见表4。

3 讨论

热板法和甩尾法是两种较为典型的物理刺激致痛模型，扭体法致痛模型中较为典型的化学刺激模型。本实验采用物理刺激致痛模型和化学刺激致痛模型的方法来观察桂产藿香蓟乙醇提取物对实验小鼠的镇痛作用，结果显示，桂产藿香蓟乙醇提取物能显著提高热板法小鼠热刺激痛阈，在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期和小鼠甩尾反应潜伏期，能显著减少醋酸致痛时小鼠扭体反应的次数，统计学结果比较具有显著性差异。说明桂产藿香蓟乙醇具有明显的镇痛作用。

产生疼痛的主要原因大多由PGE2、白三烯和氧自由基过多引起[9]。PGE2是一种非常重要致痛介质，可直接作用于神经末梢引起疼痛，下调痛觉感受器的痛阈值，提高其对其他致痛因子的敏感性，也可启动疼痛所介导的信号转导通路，在外周和中枢都有重要的作用[10-12]，同时能增强组胺、5-羟色胺、缓激肽等其他炎症、疼痛介质的协同作用[13-14]。MDA是自由基引发的脂质过氧化反应的产物，在外周和中枢氧自由基均有致痛作用。SOD是自由基有力的清除剂，可通过减少自由基的大量产生而达到镇痛作用。本研究结果显示桂产藿香蓟乙醇提取物能降低实验小鼠血清中PGE2和MDA含量，提高小鼠血清SOD活性，提示桂产藿香蓟乙醇提取物镇痛作用可能与减少炎症介质释放、清除氧自由基有关。

有文献报道，小鼠热板法实验的舔足底反应不仅仅是脊髓反应，而且可能和高级中枢有关[15]，而对冰醋酸引起小鼠疼痛的扭体法实验可能外周镇痛有关[16]，本实验显示桂产藿香蓟乙醇提取物对热板法和扭体法实验小鼠均有明显的镇痛作用，可以推测桂产藿香蓟乙醇提取物的镇痛作用与中枢和外周均有关系。

[参考文献]

[1] Okunade AL. Ageratum conyzoides L.（Asteraceae） [J]. Fitoterapia，2002，73（1）：1-16.

[2] Chah KF，Eze CA，Emuelosi CE，et al. Antibacterial and wound healing properties of methanolic extracts of some Nigerian medicinal plants [J]. J Ethnopharmacol，2006，104（2）：164-167.

[3] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999：6678-6679.

[4] 张慧芹，蔡华丹，杨美娟，等.茵陈蒿汤水提物和醇提物对D-氨基半乳糖胺诱导大鼠急性肝损伤保护作用的比较研究[J].北京中医药大学学报，2013，36（2）：113-116.

[5] 周秋雯，徐建国.慢性疼痛动物模型的研究进展[J].医学研究生学报，2008，21（6）：638-642.

[6] 徐叔云，卞如镰，陈修.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2003：882-887.

[7] 张芬，祝慧凤，薛莉君，等.瓦松镇痛作用研究[J].时珍国医国药，2011，22（12）：2478-2479.

[8] 唐秀能，黄仁彬，黄媛恒，等.月光花豆乙醇提取物的镇痛作用及其机制研究[J].时珍国医国药，2009，20（12）：3153-3154.

[9] Grisham MB，Granger DN，Lefer DJ. Modulation of leukocyte-endothelial interaclions by teactive metabolites of oxygen and nitrogen relevance to ischemic heart disease [J]. Free Radic Bio Med，1998，25（4-5）：404-433.

[10] Flodgren GM，Crenshaw AG，Alfredson H，et al. Glutamate and prostagland in E2 in the trapeziusm uscle of female subjects with chronicm uscle pain and controls determined by microdialysis [J]. Eur J Pain，2005，9（5）：511.

[11] Heinricher MM，Neubert MJ，Martenson ME. Prostaglandin E2 in the midbrain periaqueductal gray produces hyperalgesia and activates pain-modulating circuitry in the rostral ventromedial medulla [J]. Neuroscience，2004，128（2）：389-398.

[12] Gühring H，Gorig M，Ates M，et al. Suppressed injury-induced rise in spinal Prostaglandin E2 production and reduced early thermal hyperalgesia in iNOS-deficient mice [J]. J Neurosci，2000，20（17）：6714-6720.

[13] Magder S，Neculcea J，Neculcea V，et al. Lipopolysaccharide and TNF-alpha produce very similar changes in gene expression in human endothelial cells [J]. J Vasc Res，2006， 43（5）：447-461.

[14] 李玉林.病理学[M].北京：人民卫生出版社，2008：60-69.

[15] 程体娟，杨军英，王奋刚，等.嘛呢骨痹液的抗炎镇痛作用实验研究[J].中药新药与临床药理，2004，15（1）：32-34.

[16] 黄庆芳，冯承恩，房志坚，等.金钮扣提取物的解热、镇痛作用[J].中国医院药学杂志，2012，32（13）：1066-1068.

（收稿日期：2013-11-08 本文编辑：李继翔）

3 讨论

热板法和甩尾法是两种较为典型的物理刺激致痛模型，扭体法致痛模型中较为典型的化学刺激模型。本实验采用物理刺激致痛模型和化学刺激致痛模型的方法来观察桂产藿香蓟乙醇提取物对实验小鼠的镇痛作用，结果显示，桂产藿香蓟乙醇提取物能显著提高热板法小鼠热刺激痛阈，在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期和小鼠甩尾反应潜伏期，能显著减少醋酸致痛时小鼠扭体反应的次数，统计学结果比较具有显著性差异。说明桂产藿香蓟乙醇具有明显的镇痛作用。

产生疼痛的主要原因大多由PGE2、白三烯和氧自由基过多引起[9]。PGE2是一种非常重要致痛介质，可直接作用于神经末梢引起疼痛，下调痛觉感受器的痛阈值，提高其对其他致痛因子的敏感性，也可启动疼痛所介导的信号转导通路，在外周和中枢都有重要的作用[10-12]，同时能增强组胺、5-羟色胺、缓激肽等其他炎症、疼痛介质的协同作用[13-14]。MDA是自由基引发的脂质过氧化反应的产物，在外周和中枢氧自由基均有致痛作用。SOD是自由基有力的清除剂，可通过减少自由基的大量产生而达到镇痛作用。本研究结果显示桂产藿香蓟乙醇提取物能降低实验小鼠血清中PGE2和MDA含量，提高小鼠血清SOD活性，提示桂产藿香蓟乙醇提取物镇痛作用可能与减少炎症介质释放、清除氧自由基有关。

有文献报道，小鼠热板法实验的舔足底反应不仅仅是脊髓反应，而且可能和高级中枢有关[15]，而对冰醋酸引起小鼠疼痛的扭体法实验可能外周镇痛有关[16]，本实验显示桂产藿香蓟乙醇提取物对热板法和扭体法实验小鼠均有明显的镇痛作用，可以推测桂产藿香蓟乙醇提取物的镇痛作用与中枢和外周均有关系。

[参考文献]

[1] Okunade AL. Ageratum conyzoides L.（Asteraceae） [J]. Fitoterapia，2002，73（1）：1-16.

[2] Chah KF，Eze CA，Emuelosi CE，et al. Antibacterial and wound healing properties of methanolic extracts of some Nigerian medicinal plants [J]. J Ethnopharmacol，2006，104（2）：164-167.

[3] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999：6678-6679.

[4] 张慧芹，蔡华丹，杨美娟，等.茵陈蒿汤水提物和醇提物对D-氨基半乳糖胺诱导大鼠急性肝损伤保护作用的比较研究[J].北京中医药大学学报，2013，36（2）：113-116.

[5] 周秋雯，徐建国.慢性疼痛动物模型的研究进展[J].医学研究生学报，2008，21（6）：638-642.

[6] 徐叔云，卞如镰，陈修.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2003：882-887.

[7] 张芬，祝慧凤，薛莉君，等.瓦松镇痛作用研究[J].时珍国医国药，2011，22（12）：2478-2479.

[8] 唐秀能，黄仁彬，黄媛恒，等.月光花豆乙醇提取物的镇痛作用及其机制研究[J].时珍国医国药，2009，20（12）：3153-3154.

[9] Grisham MB，Granger DN，Lefer DJ. Modulation of leukocyte-endothelial interaclions by teactive metabolites of oxygen and nitrogen relevance to ischemic heart disease [J]. Free Radic Bio Med，1998，25（4-5）：404-433.

[10] Flodgren GM，Crenshaw AG，Alfredson H，et al. Glutamate and prostagland in E2 in the trapeziusm uscle of female subjects with chronicm uscle pain and controls determined by microdialysis [J]. Eur J Pain，2005，9（5）：511.

[11] Heinricher MM，Neubert MJ，Martenson ME. Prostaglandin E2 in the midbrain periaqueductal gray produces hyperalgesia and activates pain-modulating circuitry in the rostral ventromedial medulla [J]. Neuroscience，2004，128（2）：389-398.

[12] Gühring H，Gorig M，Ates M，et al. Suppressed injury-induced rise in spinal Prostaglandin E2 production and reduced early thermal hyperalgesia in iNOS-deficient mice [J]. J Neurosci，2000，20（17）：6714-6720.

[13] Magder S，Neculcea J，Neculcea V，et al. Lipopolysaccharide and TNF-alpha produce very similar changes in gene expression in human endothelial cells [J]. J Vasc Res，2006， 43（5）：447-461.

[14] 李玉林.病理学[M].北京：人民卫生出版社，2008：60-69.

[15] 程体娟，杨军英，王奋刚，等.嘛呢骨痹液的抗炎镇痛作用实验研究[J].中药新药与临床药理，2004，15（1）：32-34.

[16] 黄庆芳，冯承恩，房志坚，等.金钮扣提取物的解热、镇痛作用[J].中国医院药学杂志，2012，32（13）：1066-1068.

（收稿日期：2013-11-08 本文编辑：李继翔）

3 讨论

热板法和甩尾法是两种较为典型的物理刺激致痛模型，扭体法致痛模型中较为典型的化学刺激模型。本实验采用物理刺激致痛模型和化学刺激致痛模型的方法来观察桂产藿香蓟乙醇提取物对实验小鼠的镇痛作用，结果显示，桂产藿香蓟乙醇提取物能显著提高热板法小鼠热刺激痛阈，在给药后30、60、90、120 min均能显著延长小鼠舔足反应的潜伏期和小鼠甩尾反应潜伏期，能显著减少醋酸致痛时小鼠扭体反应的次数，统计学结果比较具有显著性差异。说明桂产藿香蓟乙醇具有明显的镇痛作用。

产生疼痛的主要原因大多由PGE2、白三烯和氧自由基过多引起[9]。PGE2是一种非常重要致痛介质，可直接作用于神经末梢引起疼痛，下调痛觉感受器的痛阈值，提高其对其他致痛因子的敏感性，也可启动疼痛所介导的信号转导通路，在外周和中枢都有重要的作用[10-12]，同时能增强组胺、5-羟色胺、缓激肽等其他炎症、疼痛介质的协同作用[13-14]。MDA是自由基引发的脂质过氧化反应的产物，在外周和中枢氧自由基均有致痛作用。SOD是自由基有力的清除剂，可通过减少自由基的大量产生而达到镇痛作用。本研究结果显示桂产藿香蓟乙醇提取物能降低实验小鼠血清中PGE2和MDA含量，提高小鼠血清SOD活性，提示桂产藿香蓟乙醇提取物镇痛作用可能与减少炎症介质释放、清除氧自由基有关。

有文献报道，小鼠热板法实验的舔足底反应不仅仅是脊髓反应，而且可能和高级中枢有关[15]，而对冰醋酸引起小鼠疼痛的扭体法实验可能外周镇痛有关[16]，本实验显示桂产藿香蓟乙醇提取物对热板法和扭体法实验小鼠均有明显的镇痛作用，可以推测桂产藿香蓟乙醇提取物的镇痛作用与中枢和外周均有关系。

[参考文献]

[1] Okunade AL. Ageratum conyzoides L.（Asteraceae） [J]. Fitoterapia，2002，73（1）：1-16.

[2] Chah KF，Eze CA，Emuelosi CE，et al. Antibacterial and wound healing properties of methanolic extracts of some Nigerian medicinal plants [J]. J Ethnopharmacol，2006，104（2）：164-167.

[3] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999：6678-6679.

[4] 张慧芹，蔡华丹，杨美娟，等.茵陈蒿汤水提物和醇提物对D-氨基半乳糖胺诱导大鼠急性肝损伤保护作用的比较研究[J].北京中医药大学学报，2013，36（2）：113-116.

[5] 周秋雯，徐建国.慢性疼痛动物模型的研究进展[J].医学研究生学报，2008，21（6）：638-642.

[6] 徐叔云，卞如镰，陈修.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2003：882-887.

[7] 张芬，祝慧凤，薛莉君，等.瓦松镇痛作用研究[J].时珍国医国药，2011，22（12）：2478-2479.

[8] 唐秀能，黄仁彬，黄媛恒，等.月光花豆乙醇提取物的镇痛作用及其机制研究[J].时珍国医国药，2009，20（12）：3153-3154.

[9] Grisham MB，Granger DN，Lefer DJ. Modulation of leukocyte-endothelial interaclions by teactive metabolites of oxygen and nitrogen relevance to ischemic heart disease [J]. Free Radic Bio Med，1998，25（4-5）：404-433.

[10] Flodgren GM，Crenshaw AG，Alfredson H，et al. Glutamate and prostagland in E2 in the trapeziusm uscle of female subjects with chronicm uscle pain and controls determined by microdialysis [J]. Eur J Pain，2005，9（5）：511.

[11] Heinricher MM，Neubert MJ，Martenson ME. Prostaglandin E2 in the midbrain periaqueductal gray produces hyperalgesia and activates pain-modulating circuitry in the rostral ventromedial medulla [J]. Neuroscience，2004，128（2）：389-398.

[12] Gühring H，Gorig M，Ates M，et al. Suppressed injury-induced rise in spinal Prostaglandin E2 production and reduced early thermal hyperalgesia in iNOS-deficient mice [J]. J Neurosci，2000，20（17）：6714-6720.

[13] Magder S，Neculcea J，Neculcea V，et al. Lipopolysaccharide and TNF-alpha produce very similar changes in gene expression in human endothelial cells [J]. J Vasc Res，2006， 43（5）：447-461.

[14] 李玉林.病理学[M].北京：人民卫生出版社，2008：60-69.

[15] 程体娟，杨军英，王奋刚，等.嘛呢骨痹液的抗炎镇痛作用实验研究[J].中药新药与临床药理，2004，15（1）：32-34.

[16] 黄庆芳，冯承恩，房志坚，等.金钮扣提取物的解热、镇痛作用[J].中国医院药学杂志，2012，32（13）：1066-1068.

（收稿日期：2013-11-08 本文编辑：李继翔）