3种检测方法诊断喉结核42例效果评价

费兵，殷 勇，吴 真，张布衣，闵克华，黄剑飞，吴 昊，达 鹏*，黄 云

（1金湖县人民医院耳鼻咽喉科，江苏211600；2南通大学附属医院耳鼻咽喉科；3常熟第二人民医院耳鼻咽喉科；4浙江大学医学院附属第二医院病理科；5金湖县中医院耳鼻咽喉科；6南通大学附属医院病理科；7南通市结核病防治所)

·论著与经验交流·

3种检测方法诊断喉结核42例效果评价

费兵1，2，殷 勇2，吴 真3，张布衣4，闵克华5，黄剑飞6，吴 昊2，达 鹏2*，黄 云7

（1金湖县人民医院耳鼻咽喉科，江苏211600；2南通大学附属医院耳鼻咽喉科；3常熟第二人民医院耳鼻咽喉科；4浙江大学医学院附属第二医院病理科；5金湖县中医院耳鼻咽喉科；6南通大学附属医院病理科；7南通市结核病防治所)

目的：评价抗酸染色、血清结核抗体、结核感染T细胞斑点实验在喉结核诊断中的作用。方法：确诊的喉结核患者42例（喉结核组）和声带息肉患者26例（对照组）标本采用抗酸染色，分离外周血血清进行结核抗体检测，结核感染T细胞斑点实验，对这3种检测方法结果进行分析比较。结果：结核感染T细胞斑点实验诊断喉结核阳性38例（90.5%），高于血清结核抗体阳性13例（30.9%），抗酸染色阳性7例（16.6%），差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：结核感染T细胞斑点实验是一种具有较高敏感性和特异性的检测结核感染的技术，对快速而准确地诊断喉结核具有较高临床应用价值。

喉结核；T细胞斑点试验；血清结核抗体试验；抗酸染色试验

近年来结核病疫情呈上升趋势，喉结核的发病率也在逐年增加。与过去相比喉结核的发病形式和临床特征等均已发生较大改变，该病的诊断更加困难[1]。因此方便、快捷的诊断该病以减少误诊极其重要。2007年8月—2012年12月，我们采用抗酸染色、分离外周血血清进行结核抗体检测、结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）确诊喉结核患者42例，本文比较这3种检测方法对喉结核的诊断价值，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 （1）喉结核组：喉结核患者42例，男23例，女19例，年龄30~65岁，平均47.1岁。声音嘶哑23例，咽痛、咽部异物感19例。电子喉镜检查：病变部位：声带前中部22例，声带后部20例；病变形态：粘膜苍白水肿、局部点状浅溃疡10例，肉芽样增生表面伪膜覆盖17例，肉芽样新生物11例，结节样隆起9例。既往有肺结核病史3例，胸部X线检查为陈旧性改变，其余患者胸部X线未见异常。（2）对照组：选择同期的声带息肉患者26例，男14例，女12例，年龄31~66岁，平均48.3岁。均表现为声音嘶哑。电子喉镜检查：符合息肉样改变，手术切除后病理确诊。均无结核病史和任何临床症状，经胸部X线检查确定无异常。

1.2 方法 （1）抗酸染色：组织切片3μm厚，TO生物透明剂脱蜡2次，每次5～10 min，其余步骤按试剂盒说明书进行。检验结果解释：结核菌呈红色杆状或螺旋状，单个或成簇排列，其他细菌及细胞呈蓝色[2]。（2）血清结核抗体检测：采集患者静脉血置室内1小时以上，离心获得待测血清，按试剂盒说明进行检测。检测区中央位置显示红色圆点为阳性，未显示为阴性。（3）结核感染T细胞斑点试验：根据T-SPOT. TB试剂盒操作：肝素抗凝管采集5mL外周静脉血，密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。阳性结果定义为：测量孔点数是阴性对照的2倍以上或比阴性对照多5个点[3]。

*[通信作者]达鹏，E-mail:jdlydap@126.com

1.3 统计学处理 应用SPSS19.0软件对数据进行处理，计数资料差异性比较使用卡方检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 抗酸染色 喉结核患者42例中抗酸染色阳性7例，阴性35例。声带息肉患者26例中抗酸染色阳性0例，阴性26例。抗酸染色检测喉结核敏感度为16.6%，特异度为100.0%。

2.2 血清结核抗体检测 喉结核患者42例中血清结核抗体检测阳性13例，阴性29例。声带息肉患者26例中血清结核抗体检测阳性8例，阴性18例。血清结核抗体检测喉结核敏感度为30.9%，特异度为69.2%。

2.3 T-SPOT．TB检测 喉结核患者42例中TSPOT．TB阳性38例，阴性4例。26例声带息肉患者中T-SPOT．TB阳性2例，阴性24例。T-SPOT．TB检测喉结核敏感度为90.5%，特异度为92.3%。

2.4 喉结核组3种检测方法结果比较 喉结核患者42例标本采用抗酸染色，分离外周血血清进行结核抗体检测，结核感染T细胞斑点实验，使用卡方检验进行分析比较后发现，结核感染T细胞斑点实验诊断喉结核的阳性率显著高于血清结核抗体和抗酸染色，差异具有统计学意义（P＜0.01），见表1。

表1 3种检测方法对两组临床标本检测结果比较（例）

3 讨 论

喉结核是呼吸系统结核病中最常见的肺外结核，也是目前喉部发病率最高的肉芽肿性疾病之一。自20世纪50年代以来喉结核已很少见，但随着近年结核病发病率的上升，喉结核的发病率在逐年增多[4]。喉结核的病变部位，特征也在发生改变，临床易造成误诊误治。

实验室检查是确诊喉结核的主要依据，病理检查是确诊疾病的“金标准”。但由于喉部解剖的特殊,标本获取相对较少。有时可能需要多次或深部活检才能确诊，无形中增加了患者负担，延长了确诊时间。抗酸染色敏感度相对较低，本组阳性率为15.7%，低于文献报道的30.5%[2]，分析原因可能与实验取材有关。血清结核抗体检测是利用结核分枝杆菌抗原，检测血清或体液中的结核分枝杆菌特异性抗体。但由于人群中感染结核分枝杆菌十分普遍，广泛的卡介苗接种及结核病患者个体的免疫功能影响等因素，使血清结核抗体测定存在一定的假阳性和假阴性[5]。

T-SPOT．TB以ESAT-6和CFP-10作为刺激抗原，刺激机体外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cell，PBMC)，再通过ELISPOT技术检测结核感染后，特异度细胞因子IFN-7分泌T细胞水平来证实存在结核感染，从理论上保证该实验的高特异性和敏感性[6]。结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验，同时可对临床肉芽肿病变如结节病或Wegenen肉芽肿与结核病进行鉴别。结核感染T细胞斑点试验的“全或无”使检测结果更加直观，且检测时间一般不超过24h。Lalvani[7]研究显示T-SPOT.TB对免疫正常成年人活动性结核敏感度83.0%~97.0%，综合敏感度为90.0%；本研究运用结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验方法检测喉结核42例患者中38例阳性，敏感度为90.5%，在非结核组的特异性为92.3%，接近上述文献报道。

目前结核感染T细胞斑点试验已在呼吸，消化，骨科等专科得到运用，并获得较满意的效果。本项研究显示其对于早期，快速地诊断喉结核具有较高的临床应用价值。

[1]白玉萍，刘红刚．喉结核的研究现状[J]．国际耳鼻咽喉头颈外科杂志，2006，30（5）：309-312．

[2]罗春英，王建东，王璇，等．荧光定量聚合酶链反应检测石蜡包埋组织结核杆菌的应用价值 [J]．中华病理学杂志，2012，41（8）：562-563．

[3]谢希，陈进伟，高洁生，等．结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用[J]．临床内科杂志，2010，27（6）：396-399．

[4]白玉萍，刘红刚，韩一丁．近年喉结核的临床病理特征[J]．诊断病理学杂志，2007，14（5）：329-332．

[5]袁丽娜，党霞，史慧敏，等．不同检测方法对结核病的诊断价值[J]．郑州大学学报:医学版，2011，46（6）：945-947．

[6]吴海露，张振玉，袁捷，等．结核感染T细胞斑点试验在结核性腹膜炎诊断中的临床应用 [J]．临床荟萃，2012，27 （23）：2046-2049．

[7]Lalvani A.Diagnosing tuberculosis infection in the 21st century:new tools to tackle an old enemy[J].Chest,2007,131 (6):1898-1906.

R529.8

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2014-01-13

1006-2440（2014）01-0079-02