CIN和宫颈癌患者宫颈粘膜脱落细胞的端粒酶荧光定量研究及比较

傅祝能，孙海芳，孙兰青，王贤芳，陈林海，吴荣辉，方海俊

(义乌市中心医院，浙江 义乌 322000)

端粒酶是一种核糖核蛋白酶，与肿瘤的发生发展密切相关，肿瘤细胞中端粒酶呈特异性地表达[1],国内研究多对各种肿瘤组织细胞端粒酶的定性或半定量的研究,直接取脱落细胞对宫颈癌等进行端粒酶实时荧光定量PCR的检测研究报道少见,故此我们进行该项研究。

一、对象与方法

1.一般对象。选正常对照组26例,体检健康女性,年龄20-56(34.8±6.8)岁，CINⅠ-Ⅱ组28例,年龄18-75(36.9±5.6)岁，CIN Ⅲ组21例，年龄21-78(39.8±5.5)岁；CIN患者中HPV阳性CIN组26例，HPV阴性CIN组23例，宫颈癌组24例,其HPV检测全阳性，年龄26-82(49.5±7.7)岁，各疾病组采集标本进行检测前均未进行手术治疗。

2.方法。检测标本采用女性宫颈粘膜脱落细胞标本,使用采样刷插入宫颈采集，紧贴宫颈口稍用力转动3圈，将采样刷放入流式荧光杂交法检测HPV[2]，HPV标本均当天采集，次日检测完毕。采集标本放-70℃保存备检，采用美国某公司7500 Fast Real-Time PCR System型进行端粒酶定量检测前取出，以SYBR为荧光染料，以293细胞为阳性对照，试剂盒购自上海某医药科技有限公司，2个月内检测完。

二、结 果

各组观察指标如下(见附表)。

三、讨 论

本文采用TRAP实时荧光定量法进行女性宫颈粘膜脱落细胞端粒酶活性定量研究，方法简捷，重复性强，结果显示，CIN Ⅲ组、HPV阳性CIN组及宫颈癌组的宫颈粘膜脱落细胞端粒酶定量值明显高于正常女性，表明女性CIN患者的宫颈粘膜脱落细胞端粒酶活性定量结果升高，在CINⅠ-Ⅱ组阶段及HPV阴性的CIN组其升高不明显，而进入CIN Ⅲ组阶段或HPV阳性CIN组的端粒酶活性定量结果升高更明显，其升高已具有统计学意义，即其进一步恶变发展为宫颈癌的风险更大，而一旦发生恶变，进入宫颈癌阶段，因而，采取女性宫颈粘膜脱落细胞进行端粒酶活性定量检测可作为鉴别诊断CIN和宫颈癌的方法之一[3]。综上所述，宫颈粘膜脱落细胞端粒酶荧光定量测定，可作为鉴别诊断CIN和宫颈癌的手段，尤其可作为女性妇科对宫颈癌的有效筛查和早期诊断手段之一。

附表 各组观察指标比较

注:与正常女性组比较，△P<0.05,△△P<0.01

[1]Shay JW,Wright WE.Telomerase activing in human canaer[J].Current Opinion in oncology,1996,8:66-71.

[2]傅祝能，吴荣辉，郭小妹，等.用流式荧光杂交技术调查浙江义乌妇女HPV感染及分型[J].临床检验杂志,2011,29(8):570-571.

[3]傅祝能，王香梅，单小云，等.端粒酶和姊妹染色单体互换在恶性肿瘤诊断中的价值[J].中华检验医学杂志,2005，28(5):500-502.