测试洛伐他汀胶囊中洛伐他汀含量的方法分析

金 珊

（长春市人民医院，吉林 长春 130051）

测试洛伐他汀胶囊中洛伐他汀含量的方法分析

金 珊

（长春市人民医院，吉林 长春 130051）

目的探讨高效液相方法测试洛伐他汀胶囊中洛伐他汀含量的的有效方法，并对其可靠性及验证性进行分析。方法采用TC-C18的色谱柱，使用流动相为60∶40的乙腈-0.020 mol/L磷酸二氢钾溶液，波长238 cm，外标法定量。结果洛伐他汀含量为2.56～250 mg/L间，其开环酸含量在1.024～0.00 mg/L，二者之间具有良好线性关系，相关系数分别为0.9998、0.9990（n=6），二者具有良好密度；洛伐他汀加样回收率高达99.22%；在室温环境下可维持8小时的稳定。结论高效液相方法测试洛伐他汀具有较高的准确性，用时短且操作方便，能够对洛伐他汀开环酸同时检测，在洛伐他汀含量检测中具有显著效果。

洛伐他汀；开环酸；高效液相方法；含量

洛伐他汀为20世纪80年代开始广泛使用的新型调脂药物，疗效独特，因此在心血管系统疾病的治疗中广泛使用。作为HMG-CoA还原酶抑制剂，遇水可溶解，形成-羟基酸。药物能够对体内的胆固醇合成产生竞争性抑制作用，促进低密度脂蛋白受体合成，从而对冠心病及动脉粥样硬化产生显著效果[1]。近年来对洛伐他汀检测方法不断增加，然而相关实验尚不多见，本次实验通过高效液相方法对洛伐他汀胶囊内洛伐他汀及其开环酸含量进行测定，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 设备与仪器：采用仪器为Agflent 1260型髙效液相色谱仪，同时使用其配套脱气机、紫外检测器、恒温箱、液相色谱泵、自动进样器及柱温箱；控制系统为德国Chemstation化学工作站系统；使用瑞士梅特勒-托利多集团生产的XS205电子天平；上海沪西分析仪器厂生产XW-80AS涡旋混合器；重庆颐洋企业发展有限公司承山AHL-2001-P痕量型分析型超纯水机；采用昆山市超声仪器有限公司生产的KQ2200B超声波清洗机。

1.2 材料与试药：洛伐他汀胶囊（生产公司：江苏苏中药业集团股份有限公司，国药准字：H19990033）使用中国药品生物制品检定研究院提供的洛伐他汀对照品，批号为100600-201003；汕头市西陇化工厂有限公司生产的磷酸二氢钾，分析纯（批号：090307）；美国Tedw A司生产的乙腈，色谱纯（批号：1202257）；采用自制去离子超纯水，分析纯为乙酸乙酯、盐酸及氢氧化钠。

1.3 方法

1.3.1 色谱条件：采用美国Agilent公司生产的（5μm、4.6×150mm）TC-C18柱；美国Phenomenex公司生产的（10 μm、4 mm×3 mm）保护柱；采用流动相为60∶40的乙腈-0.020 mol/L磷酸二氢钾溶液，35 ℃柱温；1 mL/min流速；波长238 nm，10 μL进样量。

1.3.2 溶液配制方法：将乙腈5 mL加入洛伐他汀50 mg，之后注入浓度为1 mol/L氢氧化钠溶液2.5 mL，超声下放置30min保证溶液内物质完全反应，并将纯水150 mL加入，采用盐酸将pH值调至3.5，并采用乙酸乙酯150 mL分次获取，获取乙酸乙脂层蒸干后得到洛伐他汀开环酸。采用精密称分别取洛伐他汀50 mg、开环酸对照品20 mg，并放置50 mL容量瓶内，注入乙腈进行溶解，之后将乙腈进行稀释，保证与刻度线同一水平线，摇匀得到0.4 g/L洛伐他汀开环酸及1 g/L洛伐他汀储备溶液。

1.3.3 配制供试品溶液方法：洛伐他汀胶囊10粒，天平精密称定后，均匀混合内容物，并取洛伐他汀20 mg放于容量为50 mL的容量瓶内，适量乙腈，摇动溶解洛伐他汀，之后稀释乙腈，与刻度线同一水平，摇匀。0.45 μm微孔滤膜过滤，精密取滤液5 mL放置在50 mL容量瓶内，加流动相定容至刻度线，充分摇匀后，得到供试品溶液。

取适量阴性对照液、洛伐他汀对照品溶液、供试品溶液，进样10 μL，对三份溶液色谱图进行观察；取适量洛伐他汀及其开环酸对照物溶液，1∶1摇匀，得到进样洛伐他汀及其开环酸混合对照品溶液（含量分别为0.5、0.2 mg/L），进样10 μL，对不同浓度洛伐他汀及其开环酸峰面积进行观察。备制（洛伐他汀40 μg/mL、其开环酸l0 μg/mL）浓度的对照品工作溶液，备5份，进样10 μL，对峰面积进行测定。在室温下取供试品溶液，分别在0、4、6、8 h后对色谱峰进行测定。

2 结 果

洛伐他汀峰的理论塔板数＞3000，阴性对照液内未出现干扰峰测定，供试液与对照液内洛伐他汀峰维持时间相同，周围未出现干扰峰；洛伐他汀在2.56～250 mg/L，其开环酸含量在1.024～0.00 mg/L范围内具有良好线性关系，横坐标为洛伐他汀浓度，纵面积为纵坐标，相关系数为0.9998（n=6）；横坐标为洛伐他汀开环酸浓度，纵坐标为峰面积，相关系数0.9990（n=6）；洛伐他汀RSD值为0.19%，其99开环酸RSD为0.44%，具有良好精密度；洛伐他汀的加样回收率为98.98%；洛伐他汀在室温下放置8h后，RSD数值0.49%，洛伐他汀可在室温环境下维持8 h稳定。

3 讨 论

高效液相色谱分析是生化及分析化学中常用的方法，具有高压、高效、高敏感度、适应范围广及分析速度快等优势，而其色谱柱能够循环使用，样品不会受到破坏，极易回收，具有广泛的使用价值[2-3]。本次试验中，笔者使用填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相Ⅰ为甲醇-水-磷酸，结果显示标准品、供试品内洛伐他汀色谱峰的纯度较高，完全符合要求，同时标准品的峰值能够与基线分离保持一致。在对样品进行处理时，本次试验采用直接处理方法，操作方法比较简单，分离效果良好，同时其基线相对稳定，谱峰突出且尖锐，能够得到满意的测量结果。洛伐他汀能够与体内胆固醇合成过程中产生的限速酶羟甲戊二酰辅酶A还原酶产生竞争性抑制作用[4-5]，从而抑制胆固醇的合成，低密度脂蛋白受体合成明显增加，主要对肝脏产生影响，在冠心病及动脉粥样硬化的防治中具有显著效果[6]。本次试验中在对洛伐他汀含量进行检测时，同时对其开环酸含量进行检测，发现其含量为99.99%，总之在洛伐他汀的检测中，采用高效液相色谱法操作简单，准确性高，可作为洛伐他汀胶囊质量控制的重要手段。

[1] 高燕霞,姜建国,张西如,等.HPLC法测定洛伐他汀胶囊的溶出度[J].中国抗生素杂志,2009,34(11):678-683.

[2] 谢静,李东,王敏,等.HPLC 法测定血脂康胶囊中洛伐他汀的含量[J].中国药房,2010,21(45):4287-4289.

[3] 刘源,李东,谢静,等.高效液相色谱法测定脂必泰胶囊中洛伐他汀含量[J].中药材,2010,33(6):1002-1003.

[4] 罗仁才,孙开奇,谢申猛,等.红曲中洛伐他汀总量的测定方法[J].卫生研究,2003,32(2):157-158.

[5] 张庆庆,危勤涛,汤斌.毛细管电泳法测定红曲胶囊中洛伐他汀含量[J].中国实验方剂学杂志,2008,14(11):4-6.

[6] 冯建立,许振良,王学军,等.发酵液中洛伐他汀及其开环酸的HPLC测定[J].中国医药工业杂志,2006,37(7):494-495.

R927.2

B

1671-8194（2014）28-0086-02