HCV-cAg与HCV-Ab联合检测的互补作用及HCV阳性者与ALT的关系

陈小龙 唐荣德 华关民 陈 敏 谭亮庆

广东省江门市新会中医院，广东江门 529100

丙型肝炎(丙肝)是一种主要经血液传播的传染病，而丙肝病毒(HCV)是其主要的致病因素，HCV感染的实验室检查是丙肝诊断的重要依据。近些年来的HCV检测技术主要是丙肝病毒抗体(HCV-Ab)和丙肝病毒核酸(HCV-RNA)检测，二者均存在一定的局限性。该院于2013年3月起正式开展了丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)检测，这与HCV-Ab联合检测能起到一定的互补作用，可望提高HCV感染的阳性检出率。但2项联合检测到底能起到多少互补作用以及HCV阳性者与丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系如何还值得探讨，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

该研究的研究对象为2013年3月1日—5月31日这一时段来我院作疾病诊治的并来源于2个方面的患者，一是手术前(含输血前)作例行检查的患者，共2 061例；二是ALT>80 U/L的肝炎和疑似肝炎患者，共242例。根据研究对象的2个来源，本文将其分为两组，即手术前检查组和ALT>80 U/L组。

1.2 检测方法

1.2.1 基本操作 将患者空腹抽血的血液标本离心分离出血清后，手术前检查组的标本均于抽血当天完成HCV-cAg和HCV-Ab，(简称丙肝2项)及ALT等的检测；ALT>80 U/L组如果医生已开出丙肝2项检查，则于抽血当天完成丙肝2项和ALT的检测；如果医生没有开出丙肝2项检查，除ALT于抽血当天完成检测外，将患者血清置于-20 ℃冰箱保存，每2周集中检测其丙肝2项。在正式开展HCV-cAg检测前，我们按照试剂盒说明书作了2周的预备实验，严格掌握其操作方法。

1.2.2 HCV-cAg检测 采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)定性检测患者血清中的HCV-cAg，试剂盒由湖南海润制药有限公司生产(产品批号：20121201)，检测患者标本时严格按照试剂盒说明书所介绍的方法操作。

1.2.3 HCV-Ab检测 采用两步间接酶联免疫吸附法(ELISA)定性检测患者血清中的HCV-Ab，试剂盒由珠海丽珠试剂有限公司生产(产品批号：2013010112)，检测患者标本时严格按照试剂盒说明书所介绍的方法操作。

1.2.4 ALT检测 采用速率法由Roche全自动生化仪完成，我院目前的ALT正常参考区间为0～40 U/L，故ALT>40 U/L示为升高，ALT>80 U/L示为升高1倍。

1.3 统计方法

计数资料以例数(n)和百分率(%)表示，采用χ2检验；计量资料以均值±标准差（±s）表示，采用t检验；所有数据由该院计算机医用数理统计系统计算结果。另外，该研究HCV检测阳性的概念是丙肝2项检测中任何一项出现阳性或2项均出现阳性被看成是HCV阳性，故研究中联合检测阳性在手术前检查组系已减去2项指标均阳性的10例，在ALT>80 U/L组系已减去2项指标均阳性的8例；在HCV阳性且ALT升高者中有个别患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性，这是由于重叠感染所致，因病例极少，故该研究忽略不计。

2 结果

2.1 两组丙肝2项的检测结果

通过组内比较，在手术前检查组中联合检测有2.7%的阳性率，显著高于单独HCV-cAg和单独HCV-Ab的1.6%(P<0.05)；在ALT>80 U/L组中联合检测有14.5%的阳性率，高于单独HCV-Ab的10.7%，显著高于单独HCV-cAg的7.0%(P<0.01)。组间比较揭示ALT>80 U/L组各项指标阳性检出率均显著高于手术前检查组，两组之间差异有统计学意义(均P<0.01)，见表1。

表1 两组丙肝2项的检测结果比较[n(%)]

2.2 两组HCV检测阳性者ALT的变化情况

ALT>80 U/L组的ALT均值和ALT>80 U/L例数在组内比较差异有统计学意义(P<0.01)，HCV-cAg和HCV-Ab单项阳性与手术前检查组比较差异有统计学意义(P<0.01)。而手术前检查组ALT均值和ALT>80 U/L例数是2项均阳性高于HCVAb阳性、HCV-Ab阳性高于HCV-cAg，ALT均值在HCV-cAg与HCV-Ab和2项均阳性比较差异有统计学意义(P<0.05)，ALT>80 U/L例数仅在HCV-cAg与2项均阳性比较中差异有统计学意义 (P<0.05)，见表2、表3。

表2 两组HCV检测阳性者ALT的变化情况(±s)

表2 两组HCV检测阳性者ALT的变化情况(±s)

注：组内与2项均阳性比较，△P<0.05；组内与HCV-Ab比较，▲P<0.05；与手术前检查组比较，*P<0.01。

2项均阳性ALT手术前检查组 50.0±46.0△▲ 72.8±46.8 92.0±45.9 ALT>80U/L 组 (118.5±28.5)* (112.8±31.0)* 108.7±23.4组别 HCV-cAg阳性ALT HCV-Ab阳性ALT

表3 两组HCV检测阳性者ALT>80U/L例数[n(%)]

3 讨论

HCV感染通常是持续性的终生感染，它可以通过输血、静脉吸毒、密切接触等途径传播。目前特别在县以下的基层医院对于HCV感染的临床诊断仍以ELISA方法检测HCV-Ab为主，因基层医院暂时还没有条件采用聚合酶链反应(PCR)技术来检测HCV-RNA。但由于厂家之间使用丙肝基因重组抗原质量及各抗原片段包被比例的不同，各厂家试剂间的敏感性和特异性存在着一定差异，从而导致HCV-Ab检测结果不一致。有人[1]认为，因感染丙肝后HCV-Ab出现较慢，一般情况下抗体的血清学转换可以延迟到暴露后几个月才发生，此时可出现HCVAb的假阴性。另外，在HCV-Ab的ELISA试剂盒中，由于酶标抗体是广谱抗人IgG抗体，容易产生假阳性结果。HCV-cAg是在丙肝感染者体内出现的早期感染标志，与HCV-RNA符合性较高[2]，故近些年来有些医院开展了HCV-cAg的检测，也出现了相关的报道。如许方[2]等通过同时检测HCV-cAg和HCV-Ab 2项指标，且对HCV-cAg阳性但HCV-Ab阴性的标本进一步做HCV-RNA定量检测，结果为90例丙肝抗体阳性组中，34例为HCV-cAg阳性，阳性率为37.78%；391例丙肝抗体阴性而ALT升高组中，2例为HCV-cAg阳性，阳性率为0.51%。史璇[3]在探讨HCV-cAg对HCV感染诊断和治疗中的作用中，发现90例HCVAb阳性者HCV-cAg检测阳性率为 42.2%。朱鸿[4]等对173例HCV感染患者和82例健康对照者作了HCV-Ab、总HCV-cAg和HCV-RNA检测，结果是HCV感染者HCV-Ab均为阳性，而HCV-RNA阳性率为49.7%，HCV-cAg阳性率为36.4%。郭华[5]等回顾性分析本院输血和手术前检测患者HCV的结果， HCVAb为2.0%、HCV-cAg为0.6%，HCVcAg阳性率低于HCV-Ab，认为HCV-Ab和HCVcAg检测均具有一定的特异性。

为了了解HCV-cAg与HCV-Ab联合检测对诊断HCV感染的互补作用及HCV阳性者与ALT的关系，从研究结果可以看出，在手术前检查组中联合检测丙肝2项有2.7%的阳性率，显著高于单独HCV-cAg和单独HCV-Ab的1.6%(P<0.05)；在ALT>80 U/L组中联合检测有14.5%的阳性率，高于单独HCVAb的10.7%，显著高于单独HCV-cAg的7.0%(P<0.01)。结果说明丙肝2项联合检测明显优于单项检测，这对HCV感染的诊断起到了很好的互补作用，大大提高了阳性检出率。由于该研究特地选择ALT>80U/L的肝炎和疑似肝炎病例来进行实验观察，故组间比较揭示ALT>80 U/L组各项指标阳性检出率均显著高于手术前检查组(P<0.01)，ALT>80 U/L组的ALT均值和ALT>80 U/L例数在组内比较差异无统计学意义，而与手术前检查组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。值得注意的是，手术前检查组ALT均值和ALT>80 U/L例数是2项均阳性高于HCV-Ab阳性、HCVAb阳性高于HCV-cAg，结果提示ALT的变化与HCV的感染过程有关。由于ALT是反映肝功能是否正常的最灵敏的指标，它在丙肝中多呈轻度或中度升高。HCV-cAg是HCV感染者体内的早期标志物，在HCV感染早期，患者虽然出现HCV-cAg阳性，但许多患者肝脏还未受损，故肝功能异常者较少；HCV-Ab的出现是在HCV感染后的6～12周[6]，大部分病毒携带者已发展为丙肝导致肝脏受损，但有些患者已经过治疗使得ALT降低，故仅一部分HCV-Ab阳性者肝功能异常；而HCV-cAg与HCV-Ab2项指标均阳性的病例，说明患者正在丙肝患病之中且还未得到治疗，肝脏正在受损，故大部分患者肝功能异常。

由于HCV感染的早期存在“窗口期”[7]，在这一阶段检测不到HCV-Ab，因此开展HCV-cAg检测有利于丙肝感染患者的早期发现，可以在一定程度上弥补HCV-Ab检测的不足；且2项联合检测明显优于单项检测，这对HCV感染的诊断起到了很好的互补作用，加上ALT等肝功能指标的检测，有利于HCV感染的正确诊断。

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