口蹄疫灭活抗原在不同保存条件下146S降解情况的研究

苍枫 郝鹏 张立华 曹玉梅 张慧芳 李敏 董俊余 张永峰 熊德晶 刘国英 范秀丽/金宇保灵生物药品有限公司

口蹄疫灭活疫苗中完整病毒146 S粒子的含量是影响疫苗免疫效果的关键因素，生产过程中采用合理的保存温度和浓度，有助于延长病毒的保存期和维持较高的抗原水平，对生产过程中科学地指导的抗原的保存有重要意义。本文针对不同保存温度和浓度对口蹄疫灭活抗原146 S含量的降解率进行了测定。

（一）材料

1.口蹄疫病毒抗原。O型O/GX/09-7株灭活抗原，由金宇保灵公司生产部提供。

2.乳化佐剂。206佐剂，购自赛比克公司。

3.仪器设备。超速冷冻离心机，紫外分光光度计，生物安全柜，玻璃容器，移液器等。

（二）方法

1.样品抽取。随机抽取本公司生产部O型/GX/09-7株灭活抗原液及其相应批号的10倍浓缩纯化液，分别取样进行初始样品146 S含量的测定。

2.样品分装。将原液样和10倍浓缩后样分别分装，20 ml/瓶。每组样品不少于20个。

表1 不同温度和浓度对灭活抗原完整病毒146 S影响的检测结果

表2 原液样品和10倍浓缩后样1～7个月内146 S变化曲线

3.样品保存。每种样品分2组，分别在-20℃和4℃冰箱中保存7个月。

4.定期检测。每月定期各取出1个样品分别进行146 S的测定。

5.146 S测定。按照我公司内部使用的蔗糖密度梯度紫外光定量法，检测146S抗原的含量。

（三）结果（见表1、2）

（四）讨论

口蹄疫O/GX/09-7株灭活病毒在4℃和-20℃保存的7个月中，完整病毒146 S粒子的含量均有所下降。4℃保存条件下，原液样和浓后样完整病毒146 S粒子的降解率分别为27.5%、12.3 %；-20℃保存条件下，其降解率分别为87.5%、92.4%。本实验数据显示：4℃比-20℃保存条件更有利于抗原的保存；浓度对其影响不显著。建议在FMD生产过程中，灭活抗原在6个月的保存期内采用4℃条件存放。

当然，口蹄疫完整病毒146 S粒子的稳定性受很多因素的影响，如溶液的PH值、渗透压、冻融次数等，最佳保存条件将综合考虑各种因素对其的影响，进一步科学的结论有待于更多实验的验证和数据的积累。

（略）