应用气相色谱法测定冰硼散中樟脑的含量

张 辉，陈文秋，余敏灵，薛 琼

(1.四川省医学科学院·四川省人民医院皮肤病性病研究所，四川 成都610031;2.四川省乐山市食品药品检验所，四川 乐山614000)

冰硼散是由冰片、硼砂、朱砂、玄明粉组成的中药成方制剂，收载于《中国药典》2010 版一部。其功能主治为清热解毒，消肿止痛。用于热毒蕴结所致的咽喉疼痛、牙龈肿痛、口舌生疮［1］，也有局部外用治疗宫颈糜烂和云南白药加冰硼散调菜油外擦治疗带状疮疹的报道［2，3］，但无冰硼散中樟脑定量分析的报道。处方中的冰片具有开窍醒神，清热止痛功效，《中国药典》2010 版一部对冰片中樟脑的含量做了限量规定［1］，测定樟脑的含量对评价冰硼散的质量有一定的临床意义。参阅相关文献［4～6］，本文采用毛细管气相色谱法对冰硼散中的樟脑进行了含量测定，为冰硼散的质量控制提供一种可行方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药 浙江福立分析仪器有限公司GC 9750 气相色谱仪;PEG 2000 石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);XS 205 电子天平(SETTLER公司);FID 检测器;樟脑对照品来源于中国药品生物制品检定所(批号110747-200507);冰硼散样品由泉州市灵源药业有限公司提供(批号:100907、100923、101025。规格:每瓶重0.6 g)。阴性对照样品所用原料均符合药用要求;其余试剂均为分析纯。

1.2 方法 ①对照品溶液制备:精密称取樟脑对照品60.00 mg，置100 ml 量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。②供试品溶液和阴性对照液制备:取冰硼散适量，研细，精密称取2.0136 g，置具塞锥形瓶中，精密加乙酸乙酯10 ml，精密称定重量，超声处理15 min，再精密称定重量，加醋酸乙酯补足减失的重量，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取处方量药品(除冰片外)，按质量标准规定工艺制成阴性对照品制剂，精密称取阴性对照品制剂2.1012 g，置具塞锥形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密称定重量;超声处理15 min，再精密称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为阴性对照溶液。③色谱条件:PEG2000 石英毛细管柱(30 m× 0.25 mm×0.25 μm)，柱温:140 ℃。载气N2;进样口温度180 ℃，流速1.2 ml/min;进样量:1 ∶l，分流比15 ∶1。FID 检测器温度:180 ℃。④系统适应性试验:精密量取对照品贮备液5 ml，置10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为对照品供试溶液，取对照品供试溶液、供试品溶液和阴性对照溶液照第③项色谱条件分别进样，结果绘图。⑤线性关系:精密量取樟脑对照品贮备液1、2.5、4、5.5、7 和8.5 ml，分别置6 个10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，分别吸取上述溶液各1 μl 注入气相色谱仪中，按第③项色谱条件进行测定。以樟脑峰面积(A)为纵坐标与樟脑浓度(μg/ml)为横坐标作回归曲线。⑥精密度试验:精密量取对照品贮备液5 ml，分置6 个10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，按第③项色谱条件，分别吸取上述溶液各1 μl 注入气相色谱仪中，进行测定。连续进样6 次。⑦重现性试验:取冰硼散(批号:100907 每1 g 冰硼散含樟脑0.436 mg)适量，研细，称取细粉适量(约2 g)，共6 份，精密称定，分置6 个具塞锥形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密称定重量，超声处理15 min，再精密称定重量，加乙酸乙酯补足减失的重量;用0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。分别吸取上述溶液各1 μl注入气相色谱仪中，按第③项色谱条件进行测定。⑧稳定性试验 取供试品溶液于0、2、4、6、8、12 小时测定。⑨加样回收试验:取冰硼散(批号:100907 每1 g 冰硼散含樟脑0.436 mg)适量，研细，称取9 份(每份约1 g)，精密称定，分别置于9 个10 ml 量瓶中，精密加入樟脑对照品贮备液0.60、0.60、0.60、0.75、0.75、0.75、0.90、0.90 和0.90 ml，分别加乙酸乙酯9.40、9.40、9.40、9.25、9.25、9.25、9.10、9.10 和9.10 ml，精密称定重量，超声处理15 min，再精密称定重量，加乙酸乙酯补足减失的重量，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。按第③项色谱条件测定，结果用第⑤线性关系回归方程计算。⑩样品含量测定:取冰硼散(批号:100907、100923、101025)适量，研细，称取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密称定重量;超声处理15 min，再精密称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。按第③项色谱条件测定，用第⑤线性关系回归方程含量。

2 结果

2.1 系统适应性 见图1。供试品溶液色谱图中有与对照品溶液色谱图中樟脑色谱峰相对应的色谱峰，并且该色谱峰与其他色谱峰的分离度大于1.5，理论塔板数大于2000;而阴性对照溶液无这一色谱峰。

2.2 线性关系 线性关系回归曲线结果:y =79.7867x+10.0125，r=0.9999(n=6)。表明樟脑进样量在60 ～510 ng 线性关系良好。

2.3 精密度 精密度试验结果樟脑的平均峰面积为23936，RSD 为1.33%。

2.4 重现性 重现性试验结果樟脑平均峰面积(折算为样品称量2.0000 g 时)为7002，RSD 为1.78%。

2.5 稳定性 稳定性试验结果樟脑峰面积变化不大，RSD 为1.96%，表明样品溶液在室温条件下12 h 内稳定，能满足含量测定要求。

2.6 加样回收试验结果 回收率平均98.9%，RSD 1.2，见表1。

图1 气相色谱图 a:阴性对照;b:对照品;c:样品;1.樟脑

表1 樟脑回收率试验结果 (n=6)

2.7 样品含量 见表2。

表2 样品含量测定结果

3 讨论

①该方法快速，准确，被测溶液稳定，适合于冰硼散中樟脑的定量分析，可作为冰硼散中樟脑限量检查的方法。②樟脑作为合成龙脑的一种杂质，本文对樟脑定量检测的研究可间接考察制剂所用原料质量水平，从而促进制剂质量的提高。

［1］国家药典委员会.《中华人民共和国药典》2010 年版一部［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:702.

［2］师彩梅，贾守月.局部外用冰硼散治疗宫颈糜烂疗效观察与分析［J］.基层医学论坛，2010，14(8 月中旬刊):709.

［3］朱必建，刘剑秋. 云南白药加冰硼散调菜油外擦治疗带状疮疹30 例疗效观察［J］.实用中西医结合临床，2010，10(6):13.

［4］刘亚梅，蒲旭峰，张良.毛细管气相色谱法测定青蒿及青蒿油中石竹烯和樟脑的含量［J］.华西药学杂志，2007，22(2):218-220.

［5］周刚，王巨才，禹凤英，等.毛细管气相色谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中薄荷脑和樟脑的含量［J］. 解放军药学学报，2006，22(2):150-152.

［6］阎正，陈培云，曹照真，等.毛细管柱气相色谱法测定中药膏药中樟脑、薄荷脑、龙脑及异龙脑含量［J］.理化检验手册-化学分册，2008，44(12):1196-1198.