中枢神经系统白血病脑脊液中白细胞介素2 受体、铁蛋白和纤维结合蛋白的变化及其临床意义

李 晴

随着联合化疗、放疗和骨髓移植治疗等的治疗方案的进一步发展，在成人白血病患者中，其持续缓解率已经明显的较前提高，长期无病生存期明显延长。但是在白血病患者中，特别是急性淋巴细胞白血病患者中，中枢神经系统白血病(central nervous system leukemia，CNSL)发生会大大影响了患者的生存质量，和生存期。及时预防和早期治疗中枢神经系统白血病已经成为临床工作中的重要问题。可是由于大部分药物的脂溶性差，并且难以透过血脑屏障，，这些药物在普通化疗过程中都不能进入中枢神经系统，发挥杀灭白血病细胞的作用。因此中枢神经系统称为白血病的的逃逸地点，进一步成为临床白血病治疗缓解后引起复发的重要策源地。但是由于诊断中枢神经系统白血病的诊断标准没有敏感性和特异性强的检测指标，引起许多CNSL 漏诊、误诊。研究发现，脑脊液中可溶性白细胞介素2 受体、铁蛋白和纤维结合蛋白在中枢神经系统白血病中的表达有一定的临床提示意义［1-3］，但是该三者联合检测是否有一定的临床诊断意义，文献并无报道。本组为了寻找CNSL 新的诊断方法，提高CNSL 的诊断率，选取脑脊液中可溶性白细胞介素2 受体、铁蛋白和纤维结合蛋白进行检测，以探讨这几个指标在CNSL 诊断中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

病例来源于2013 年1 月～2013 年12 月广州市第一人民医院血液科诊治的43 例白血病患者，男25 例，女18 例，中位年龄43 岁。其中AML 30 例(M2 1 例，M3 6 例，M5 36例)，ALL 13 例(L1 5 例，L2 3 例，L3 5 例)，按文献标准确诊中枢神经系统白血病［4］。依据是否合并CNSL 分为两组，CNSL 组16 例和无CNSL 组27 例。

1.2 CSF 采集

为白血病患者在进行治疗性、或者预防性鞘内注射化疗时留取的脑脊液标本，在室温下对标本惊醒3000 rpm/min离心25 min，吸取上清液，放置在-20 ℃冰箱中冷冻保存。标本收集完毕后一次性进行检测。

1.3 白细胞介素2 受体、铁蛋白和纤维结合蛋白的检测

采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测，试剂盒由上海信然实业有限公司、北京方程生物科技有限公司、上海研域生物科技有限公司提供。按照产品说明书进行相关操作。

1.4 统计学处理

采用SPSS 13.0 统计软件，计量数据用均值±标准差(±s)表示，所有均数采用t 检验。

2 结果

两组患者脑脊液中可溶性白细胞介素2 受体、铁蛋白和纤维结合蛋白CNSL 组高于无CNSL 组，2 组间有显著性差异(p ＜0.05)。见表1。

表1 中枢神经系统白血病脑脊液中可溶性白细胞介素2 受体、铁蛋白和纤维结合蛋白含量

3 讨论

到目前为止，各种研究已经正式，可溶性白细胞介素2的受体存在于NK 细胞、激活的T 淋巴细胞、激活的B 淋巴细胞、大颗粒淋巴细胞和某些肿瘤细胞的表面［5］，对已知的各种血液肿瘤患者进行血清的可溶性白细胞介素2 进行滴度测定后发现，可溶性白细胞介素2 的滴度水平与患者的肿瘤负荷量及肿瘤的活动程度呈正相关，肿瘤符合越大、肿瘤的活动程度越高，血清中IL -2 的含量越多［6-7］。已经有学者研究发现，在急性淋巴细胞白血病和霍奇金淋巴瘤患者中，当发生中枢神经系统受累时，脑脊液的可溶性白细胞介素2 的含量明显升高，而进行了鞘内化疗药物注治疗后，含量立即出现明显下降。在本实验中，CNSL 患者组的可溶性白细胞介素2 受体明显高于无CNSL 组，也证实了可溶性白细胞介素2 受体与中枢神经系统白血病的发生有关系。还有学者进行了进一步研究发现，但白血病患者出现骨髓白血病复发时，可溶性白细胞介素2 受体在血浆中的浓度也会明显升高。因此，脑脊液中可溶性白细胞介素2 受体水平应该能够作为诊断中枢神经系统白血病和评价中枢神经系统白血病治疗效果的可靠指标。

铁蛋白作为体内贮存铁的主要物质，是一种含铁的蛋白质。研究表明，在正常人群中，各种体液和血清中，在网状内皮细胞上，都含有微量的铁蛋白。在一般检查中，血清铁蛋白含量可以代表体内铁的储备状态。目前发现，在急性白血病患者中，由于白血病细胞合成过多的铁蛋白并且释放入血液中，或者是因为白血病细胞浸润周围组织，引起周围正常组织损伤，使正常组织中的铁蛋白释放如外周血中，外周血的血清铁蛋白的含量明显高于正常人群。已经有实验证实，中枢神经系统白血病的患者其脑脊液内测定铁蛋白含量，可以发现明显升高的现象，推测可能是由于白血病细胞浸润中枢神经系统后，继发性的破坏周围组织、并且发生自发溶解，大量释放铁蛋白。在本实验中，CNSL 患者组的铁蛋白含量也明显高于无CNSL 组。这个结果与国外研究类似。而且学者继续观察后发现，随着化疗的开始，患者脑脊液中的铁蛋白开始下降。Srinirasan 等观察发现血清铁蛋白在未缓解的白血病患者中明显升高［8］，所以血清铁蛋白可能也与肿瘤负荷有关。本研究认为测定脑脊液内铁蛋白的含量，也可用于中枢神经系统白血病的诊断和疗效的监测。

纤维结合蛋亡是一种由体外培养的胶质细胞或者是退行性变性的胶质细胞产生的，在蛋白酶的作用下，从细胞外基质分解出来的高分子糖蛋白。在正常成年人的大脑内，纤维结合蛋白主要分布在血管内皮细胞基膜上。Sakaguchi 等研究都发现［8-9］，在急性淋巴细胞白血病患儿中，，无脑膜白血病患者脑脊液纤维结合蛋白水平明显低于脑膜白血病复发的患者。在本实验中，无CNSL 患者组的纤维结合蛋白含量明显低于CNSL 组，也证明了这种关联的存在。

本研究发现，通过检测患者脑脊液中可溶性白细胞介素2 受体、铁蛋白和纤维结合蛋白的含量，可能提供一种诊断中枢神经系统白血病、预测中枢神经系统白血病的发生的新思路。但是由于单一的指标存在敏感性和特异性不一致的关系，因此应该应用三种指标联合检测的方法，更好的为中枢神经系统白血病的诊断和治疗提供依据。

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