欧盟蜂蜜抗生素残留监控体系研究及对我国的启示

陈 炯，李玉伟，宁准梅，* ，贾英杰

(1.上海冠生园食品有限公司技术中心，上海200233;2.上海冠生园蜂制品有限公司，上海201419)

中国是蜂蜜生产及出口大国，蜂蜜年出口量占全球蜂蜜年出口总量的20%左右［1］。欧盟是世界上重要的蜂蜜进口地区，2009年进口蜂蜜占世界蜂蜜总进口量31%，居世界第一［2］。欧盟是我国蜂蜜出口的主要市场之一，但受2002年氯霉素残留、2008年红霉素超标等抗生素方面的影响［3］，出口量很不稳定。2006年以来欧盟食品和饲料预警系统RASFF中有关从中国进口蜂蜜的通报有31例，其中90%以上是由抗生素残留超标引起的。抗生素残留问题已成为我国蜂蜜走向世界的主要障碍，关注欧盟对抗生素残留监控体系的动态是促进我国蜂产品行业健康发展的重要途径。本文将就欧盟关于蜂蜜中抗生素残留标准及监控体系进行研究分析，对比我国现行蜂蜜抗生素残留标准，以期对我国完善蜂蜜中抗生素残留监控体系有所启发，从而提高我国蜂蜜的质量和出口竞争力。

1 欧盟蜂蜜中抗生素残留监测体系概况

1.1 欧盟动物源性食品安全法规

动物源性食品是指来源于动物并供人类消费的产品及其制品［4］。与我国对蜂蜜的定义不同，欧盟2001/110/EC指令对蜂蜜的定义是由意大利蜂采集植物花蜜等酿造的天然甜物质［5］。蜂蜜属于动物源食品，欧盟关于动物源食品的法规适用于蜂蜜。

欧盟的《食品安全白皮书》提出了通过立法来完善“从农田到餐桌”的一系列食品安全保障措施［6］，是欧盟制定动物源食品质量体系的法律基础。(EC)NO.178/2002《一般食品法》规定了食品安全必须考虑整个食品链、风险评估是食品安全政策基础、所有食品生产与经营者必须对食品安全负责、产品必须在所有食品链环节中具有可追溯性、消费者对食品安全有知情权等五个主要内容［7－8］。(EC)NO.183/2005要求产品在整个生产过程中的每一个环节都要符合标准［9］。

欧盟的综合食品安全法是以预防管理为原则、以全程管理为手段来保障食品质量安全。欧盟动物源性食品安全标准体系包括一系列以条例(regulation)、决议(decision)和指令(directive)等形式颁布的法规［10－11］。

1.2 欧盟蜂蜜抗生素残留限量的沿革

伴随着欧盟食品安全管理理念的发展，欧盟关于抗生素残留限量立法管理逐步发展完善。氯霉素的最大残留限量标准(MRL)是制约中国蜂蜜出口的一个很重要的因素［12］。欧盟对蜂蜜中氯霉素、硝基呋喃等抗生素残留限量的沿革是个逐步提高发展的过程。

欧盟96/23/EC指令将需要监控的物质分为A、B两组［13］，A组是具有合成作用的物质和未经许可的物质，其中A6为(EEC)2377/90理事会条例附录Ⅳ中所包含的禁用物质，包括氯霉素、硝基呋喃等;B组是兽药和污染物，其中B1为抗生素类物质，包括磺胺类和喹啉等。欧盟关于动物源食品残留限量监控计划或指令中关于抗生素的代码是A6或B1。指令附录Ⅱ显示在蜂蜜中需检测的各种物质残留包括B1，但并不包含A6，说明当时在蜂蜜中并不要求检测氯霉素、硝基呋喃等物质的残留。

为了确保指令96/23/EC的一致执行，欧盟委员会发布了关于分析方法性能指标和结果解释的决议2002/657/EC，确定解释官方控制实验室测试结果的通用标准，对样品中至少必须检出和能被确证的分析物的最小含量定义为最低要求执行限(MRPL)，并确定了不同物质的检测筛选方法和确认方法的要求［14］。A、B组物质的确定方法分别至少需要4、3个识别点，因此欧盟对蜂蜜中氯霉素、硝基呋喃等检测的确认方法均需采用液相－串联质谱法［15－16］。2002/657/EC的补增2003/181/EC决议附录Ⅱ中蜂蜜基质中的氯霉素MRPL为0.3μg/kg，禽肉、水产品基质中硝基呋喃MRPL为1μg/kg［17］。当时硝基呋喃及其代谢物的限量值还不要求适用于蜂蜜中。

2005/34/EC决议提出2002/657/EC制定的MRPL应作为采取行动的参考点，与检测的基质无关。这就意味着2003/181/EC附录Ⅱ的氯霉素、硝基呋喃的最低要求执行限量同样适用于蜂蜜［18］。

2005/233/EC欧盟开始解禁中国蜂蜜，但从中国进口的动物源食品的保护措施2005/573/EC决议中指出，中国出口的蜂蜜除必须符合欧盟进口第三国蜂蜜的规定外，还需递交一份中国主管机关的不会损害人类健康的声明，并附该产品的氯霉素和硝基呋喃及其代谢物等残留检验报告［19］。

2009年5月欧洲议会和欧盟理事会颁布了(EC)NO.470/2009条例，制定了确定动物源性食品中药理活性物质残留限量的程序，规定任何被批准预期在欧盟内用于食用动物的兽药药理活性物质，都应受到欧洲药品管理局的审查，并充分参考欧洲食品安全局相关的科学调查结果后，给出科学风险评估结果和风险管理建议，评估结果提交给兽医药品委员会进行鉴定区分，进而制定最高残留限量或行动参考点(reference points for action，RPFA)［20］。

2009年12月欧盟委员会条例(EU)No.37/2010的附录完整列出了对动物源食品中药物活性物质最高残留量以及分类。附录表Ⅰ中为允许使用药物，然而抗生素类药物均不在蜜蜂的允许使用范围内。表Ⅱ为禁用药理活性物质，包括氯霉素、氯丙嗪、氨苯砜、二甲硝咪唑、甲硝唑、硝基呋喃、洛硝哒唑［21］。这意味着在蜂蜜中，氯霉素、硝基呋喃等为禁用药物，而其他抗生素为非法使用药物。

1.3 欧盟现行第三国进口蜂蜜监控计划及RASFF分析

欧盟在第三国进口蜂蜜残留物监控计划中规定，A6即(EU)No.37/2010附录表Ⅱ中所包含的化合物、B1抗生素(包括链霉素、磺胺类、四环素、泰乐菌素等)的监测是必不可少(essential，E)，而其他物质如B2c氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯等的监测是非常需要(highly desirable，HD)［22］，说明欧盟对禁用物质特别是氯霉素、硝基呋喃及其代谢物以及抗生素的监测是极其严格的。

欧盟食品和饲料预警系统(RASFF)是根据欧盟条例(EC)NO.178/2002建立的一个食品安全信息交换平台［23］。整理统计2003年至今RASFF中有关蜂蜜的通报后发现:有关蜂蜜的通报有192例，有33例的通报原因是包装不良、没有进口授权许可以及卫生状况不良等，其余都是抗生素引起的。其中磺胺类抗生素出现次数达28.2%，链霉素、氯霉素、泰乐菌素、硝基呋喃分别为15.9%、13.5%、10.0%、8.8%，四环素、土霉素、红霉素、喹诺酮、林可霉素均有检出。2008.BBA通报中红霉素检出含量为0.2μg/kg，被判为重新发货(re－dispatched);2007.BML通报中泰乐菌素检出含量为0.4μg/kg即被拒收［24］。而我国最新的大环内酯类药物的液相－串联质谱方法GB/T 23408－2009中红霉素、泰乐菌素的测定低限分别是0.1、0.2μg/kg。

欧盟各成员国对从第三国进口蜂蜜抗生素的监控是非常苛刻的，如何应对欧盟对蜂蜜抗生素残留限量的监控是我国出口蜂蜜企业所面临的难题，掌握最先进的检测技术是其中一个必需的手段。

2 我国蜂蜜中抗生素残留监控体系概况

2.1 我国动物源性食品安全法律法规

我国《食品安全法》确立了我国食品安全的统一立法管理模式。法规确定了食品安全国家标准由卫生部负责制定，食品中兽药残留的限量规定及其检验方法与规程由卫生部、农业部制定。

我国有关动物源性产品中兽药残留限量的农业部公告有第193号公告《食品动物禁用的兽药及其它化合物清单》、第235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》等。此外，从1999年起农业部每年制定的年度残留监测计划也对我国兽药残留标准体系起到了补充作用［25］，对养殖生产中兽药的使用进行了规范。2002年发布实施的235公告是在蜂蜜等动物源性食品在遭受欧盟禁运的背景下为应对技术性贸易壁垒而颁布的，是我国兽药残留法规的基础，其框架和残留限量主要参考借鉴欧盟(EEC)2377/90 条例［26－27］。

2.2 我国蜂蜜中抗生素残留限量标准

蜂蜜食品安全国家标准GB14963－2011中要求蜂蜜中兽药残留限量应符合相关标准的规定。相关标准规定包括:a.卫生部在2011年4月发布了《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》中指出蜂蜜中可能添加了氯霉素。b.无公害蜂蜜(NY5134－2008)中对抗生素的安全指标是四环素族抗生素≤0.05mg/kg，氯霉素不得检出，磺胺类≤0.05mg/kg，其他兽药限量应符合国家有关规定。c.农业部公告193号规定了禁用氯霉素、硝基呋喃、硝基咪唑等抗生素。d.农业部第235号公告公布了氯霉素、硝基呋喃等31种禁用药物，而对其他抗生素在蜂蜜中的最高残留限量没有规定。

2.3 我国蜂蜜中抗生素残留检测方法国标

从2002年的杯碟法、液相色谱法(HPLC)到气相－质谱法(GC－MS)、酶联免疫法(ELISA)再到液相－串联质谱法(LC－MS/MS)，从单个抗生素检测到多种抗生素同时检测，我国蜂蜜中抗生素残留检测方法国标是持续更新和完善的。LC－MS/MS法已成为目前蜂蜜中抗生素最主要的测定确证方法，其检出限为各方法中较低。我国国标与欧盟以LC－MS/MS为检测方法的检出限差异见表1。大部分国标方法检出限略高于检出限最低值，但基本在欧盟方法检出限的幅度范围内，这与检测设备的配置、样品前处理方法、检测参数设置等不同有关。欧盟检测方法也呈现多种抗生素同时检测趋势，其中氟洛芬尼尚未出现在我国国标中，这可能与兽药使用习惯不同有关，但从另一方面说明了欧盟监控的抗生素种类繁多。

表1 我国国标与欧盟以LC－MS/MS为检测方法的检出限差异Table 1 Detection limit difference of LC－MS/MS test method in China GB and EU

2.4 我国蜂蜜抗生素残留监控体系存在的问题

我国蜂蜜中抗生素残留监控体系与欧盟相比，最突出的特点是抗生素残留限量标准不甚明确，标准之间以及标准与公告之间交叉重叠。无论从抗生素残留种类还是残留限量值远低于欧盟现行标准［30］。这与我国现有的蜂蜜生产模式和实际情况确实不足有关。

我国抗生素残留限量的修订不够及时，修订机制不够完善。我国现有抗生素残留限量标准是在贸易出现摩擦之后根据主要贸易国的限量指标来才制定或修订，反映出我国抗生素等兽药限量标准的制定和修订没有坚实的科学基础。我国虽制定了抗生素等兽药的最大残留量标准，但与其配套的法律法规不够完善，并受到检测技术水平等的限制［31］，致使其未得到全面、有效的落实。

3 对完善我国蜂蜜抗生素残留监控体系的启示

我国与欧盟间蜂蜜等动物源食品的贸易摩擦，主要在于我国兽药使用、监管手段和残留检测技术与欧盟存在差距［32］。但从另一个角度来看，欧盟是当今食品安全管理体系最为完善的地区之一，特别是欧盟建立了完善的食品中残留监控管理体系。我国应借鉴欧盟全程立法监管的理念与做法，尽快制定系统、完善的法律法规和标准体系，有效保障我国蜂蜜的质量安全和出口贸易。

3.1 健全我国抗生素残留限量标准体系

目前我国蜂蜜食品安全标准对蜂蜜中抗生素残留限量的规定不明确，使得养蜂过程、蜂蜜收购、生产加工等各环节都无所适从。这样不利于政府执法部门对蜂蜜的市场监控，也不利于蜂蜜加工企业的质量控制，更不利于养蜂行业的良性发展。因此，政府主管部门应在充分了解国内养蜂行业现状及国际上蜂蜜行业的发展趋势后，确定蜂蜜中抗生素残留的指标和限量并逐步完善。

欧盟对动物源食品抗生素残留设立单独的法律法规并不断修订完善，而我国最严格的兽药残留限量标准2002年后就没有修订过，每年的兽药监测计划虽能对其进行补充，但没有形成整体合力，所以我国要以安全评估为基础、以跟踪即时为手段、以保障动物源性食品安全、促进进出口贸易为目的来健全完善我国的抗生素等兽药残留标准修订机制。

3.2 完善抗生素安全风险评估体系

动物源性食品的风险评估是建立动物源性食品兽药最高残留限量的科学依据，风险评估是促进食品安全的有效手段［33］。我国食品安全风险评估制度已经初步成型［34］。欧盟除官方的安全评价体系外，学者对蜂蜜抗生素残留的风险评估也做了相应研究［35］。我国应借鉴欧盟食品安全风险评估制度的卓越科学、独立性、透明性、公共协商等基本原则，加强以食品毒理学为核心的安全风险评估［36－37］，为制定食品安全标准奠定科学依据。

3.3 完善抗生素残留监控体系

一是从养蜂阶段要加强追溯管理系统的应用。欧盟的可追溯性制度是食品安全和风险管理的一种预防性和程序性措施，已成为欧盟食品法的一项基本原则［38－39］。蜂蜜的质量不是通过检测得来的，蜂农养蜂取蜜环节是保障蜂产品质量的关键所在［40－41］。我国蜂农的分布具有分散性和迁徙性，因此蜂产品追溯系统的建立是有难度的但也是相当有必要的，甚至能有效从源头上降低蜂产品中抗生素的残留。目前，蜂产品协会正进行蜂产品溯源信息体系的试点工作，期待着追溯管理系统能在中国蜂产品行业中得到有效的开展应用。

二是需要健全有效的官方抗生素残留监控措施。2012年对蜂蜜中氯霉素、硝基咪唑类、四环素族、磺胺类、氯苯砜、氟喹诺酮类、硝基呋喃类代谢物等残留进行监控，比2009年增加了氯苯砜和硝基呋喃代谢物的监控，说明蜂蜜的兽药残留监控计划已经在不断改进。但我们还应充分借鉴欧盟通过监控建立对兽药残留立法管理的倒逼机制，通过监控结果，完善技术法规，延伸风险评估范围实现风险管理［42］。

三是需要健全配套的法律法规，加强对生产经营者的自我监控及违规时采取的严格的惩罚措施。

3.4 健全蜂蜜抗生素检测体系

我国应加强动物源性食品中抗生素残留检测技术的研究，通过借鉴国外先进的科学技术和已有的实验成果，为我国进出口贸易中影响最大的抗生素残留提供一系列快速检测手段。兽药特别是抗生素残留检测技术一直是食品安全研究领域的一个重要课题［43－44］，近年来我国也陆续发布了一系列有关蜂蜜中抗生素的确认方法或筛选方法的相关检测标准。大多数抗生素的确证方法是采用液相－串联质谱法，其检测低限等各方面能满足欧盟确证方法的要求，但该法设备昂贵、检测技术要求高，难以适应现场及基层检测大批量、快速、仪器设备简单等现状。因此在开发确认方法的同时加快快速检测方法的研究和应用，满足中小企业对蜂蜜中抗生素残留限量初步筛选的质量监控需求。

4 结语

抗生素残留超标是我国蜂蜜行业发展的主要难题，我们要借鉴欧盟先进管理体系来建立完善一系列“从养蜂到餐桌”食物链的全程预防管理控制措施。综上所述，控制及改善蜂蜜抗生素残留的监控管理措施包括:加快抗生素风险评估体系;确定蜂蜜抗生素残留的指标限量并逐步完善;加强追溯管理和HACCP体系的建设;健全有效的抗生素残留监控措施及配套的法律法规;加强抗生素检测技术。这些措施的实施需要政府机构、行业协会、蜂农、企业以及科研机构的长期参与合作，才能有效改善蜂蜜中抗生素残留问题。近期农业部已发出加强兽药使用监管的通知及公开征求食品中农药最大残留限量意见，我们相信通过各方努力，蜂蜜等动物源性食品中抗生素等兽药残留问题能得以逐步解决，并促进我国食品行业持续健康发展。

［1］刁青云，王允中，黄宇，等.世界主要生产国蜂蜜出口国际竞争力比较分析［J］.世界农业，2011(10):16－18.

［2］出口商品技术指南－蜂蜜［S］.中华人民共和国商务部，2011:23.

［3］高芸.中国蜂蜜贸易研究与趋势预测［J］.中国蜂业，2012(12):44－46.

［4］TheEuropeanParliamentandtheCouncil.COUNCIL DIRECTIVE 2002/99/EC of 16 December 2002 laying down the animalhealth rules governing the production，processing distribution and introduction of products of animal origin for human consumption［Z］.Official Journal of the European Communities，2003.L18:11.

［5］TheEuropeanParliamentandtheCouncil.COUNCIL DIRECTIVE 2001/110/EC of 20 December 2001 relating to honey［Z］.Official Journal of the European Communities，2002.L10:47.

［6］丁健，赵小丽，宾军宜，等.意大利畜产品质量安全管理体系介绍［J］.中国畜牧业，2012(9):54－57.

［7］杜志华，李丹.欧盟动物源性食品安全法律问题研究［J］.河南省政法管理干部学院学报，2010，123(6):83－88.

［8］赵荣，陈绍志，乔娟.美国、欧盟、日本食品质量安全追溯监管体系及对中国的启示［J］.世界农业，2012(3):1－4.

［9］吴越，宁喜斌.欧盟食品安全新法规对我国水产品贸易的影响及其对策分析［J］.食品工业科技，2006，27(8):186－189.

［10］朱俊波.我国蜂蜜出口贸易中的技术性贸易壁垒及其影响分析［D］.无锡:江南大学，2008:15.

［11］燕鹏.欧盟TBT对我国水产品出口的影响与对策分析［D］.沈阳:辽宁大学，2007:18.

［12］Wei G X，Huang J K，Yang J，et al.Honey Safety Standards and Its Impacts on China＇s Honey Export［J］.Journal of Integrative Agriculture，2012，11(4):684－693.

［13］The European Parliament and the Council.COUNCIL DIRECTIVE 96/23/EC of 29 April 1996［Z］.Official Journal of the European Communities，1996.L125:10.

［14］The European Parliament and the Council.COMMISSION DECISION 2002/657/EC of 12 August 2001［Z］.Official Journal of the European Communities，2002.L221:8.

［15］Anastasios E，Olympia P，Despina J，et al.Determination of a liquid chromatography－tandem mass spectrometry method for the determination of sulfonamides，trimethoprim and dapsone in honey and validation according to Commission Decision 2002/657/EC for banned compounds［J］.Talanta，2012，(97):32－41.

［16］John O，Mary M，Robert I M，et al.Simultaneous detection of four nitrofuran metabolites in honey using a multiplexing biochip screening assay［J］.Biosensors and Bioelectronics，2011，26:4076－4081.

［17］The European Parliament and the Council.COMMISSION DECISION 2003/181/EC of 13 March 2003 amending Decision 2002/657/EC asregardsthe settingofminimum required performance limits(MRPLs)for certain residues in food of animal origin［Z］.Official Journal of the European Union，2003.L71:17.

［18］The European Parliament and the Council.COMMISSION DECISION 2005/34/EC of 11 January2005 laying down harmonized standards for the testing for certain residues in products of animal origin imported from third countries［Z］.Official Journal of the European Union，2005.L16:61.

［19］The European Parliament and the Council.COMMISSION DECISION 2005/573/EC of 22 July 2005 amending Decision 2002/994/EC concerning certain protective measures with regard to the products of animal origin imported from China［Z］.Official Journal of the European Union，2005.L193:41.

［20］The European Parliament and the Council.REGULATION(EC)No 470/2009 OF THE EUROPEAN PARLIAMENT AND OF THE COUNCIL of 6 May 2009 laying down Community procedures for the establishment of residue limits of pharmacologically active substances in foodstuffs of animal origin［Z］.Official Journal of the European Union，2009.L152:11.

［21］The European Parliament and the Council.COMMISSION REGULATION(EU)No 37/2010 of 22 December 2009 on pharmacologically active substances and their classification regarding maximum residue limits in foodstuffs of animal origin［Z］.Official Journal of the European Union，2010.L15:1.

［22］EUROPEAN COMMISSION.Instructionforusingthe Residues Planning Template［EB/OL］.［2012－09－20］.http://ec.europa.eu/food/food/chemicalsafety/residues/third_countries_en.htm.

［23］˙Zaneta B，Marek S，Jacek N，et al.Determination of antibiotic residues in honey［J］.Trends in Analytical Chemistry，2011，30(7):1035－1041.

［24］RASFF PORTAL［DB/OL］.［2012－09－20］.https://webgate.ec.europa.eu/rasff－window/portal/.

［25］许飞，吴小平，江海羊，等.兽药残留监控体系的现状与展望［J］.中国兽药杂志，2011，45(5):47－50.

［26］李婷婷.中国与欧盟主要动物源产品中兽药残留限量差异性研究［D］.合肥:合肥工业大学，2009:25.

［27］李婷婷.动物源性产品质量安全标准沿革与现状［J］.中国牧业通讯，2008(3):13－14.

［28］Sara B，Antonio D C.Recent applications of liquid chromatography－massspectrometry to residue analysisof antimicrobials in food of animal origin［J］.Anal Bioanal Chem，2009，395:947－966.

［29］Bohm D A，Stachel C S，Gowik P.Confirmatory method for the determination of streptomycin and dihydrostreptomycin in honey by LC － MS/MS［J］.Food Additives and Contaminants，2012，29(2):189－196.

［30］田寒友，李家鹏，周彤，等.我国与欧盟、美国、日本、CAC畜禽兽药残留限量标准对比研究［J］.肉类研究，2012，26(2):43－46.

［31］李琳.国内外动物源性食品中兽药最高残留限量标准的对比研究［D］.北京:中国农业大学，2005:26.

［32］张鑫，顾欣，张文刚，等.欧盟建立动物源性食品中药理活性物质残留限量的程序法规研读［J］.中国兽医杂志，2010，44(7):32－36.

［33］Liu S，Xie Z M，Zhang W W，et al.Risk assessment in Chinese food safety［J］.Food Control，2013，(30):162－167.

［34］柴英辉.完善我国食品安全风险评估的几点探讨［J］.商品与质量，2012(4):300－302.

［35］Wim R，Els D，Huberl F D B，et al.Antimicrobials in beekeeping［J］.Veterinary Microbiology，2012，158(1－2):1－11.

［36］杨小敏，戚建刚.欧盟食品安全风险评估制度的基本原则之评析［J］.北京行政学院学报，2012(3):5－11.

［37］将士强，王静，张作芳.加强以食品毒理学为核心的安全风险评估建立完善的食品标准体系和安全链［J］.食品安全导刊，2011(7):80－82.

［38］杜志华，李丹.欧盟动物源性食品安全法律问题研究［J］.河南省政法管理干部学院学报，2010，123(6):83－88.

［39］Jostein S，Maitri T，Retter O，et al.The Trace Food Framework－ Principles and guidelines forimplementing traceability in food value chains［J］.Journal of Food Engineering，2013，115:41－48.

［40］Sapna J，Nimsha J.Antibiotic Residues in Honey［R］.Centre for Science and Environment，2010:4.

［41］郭溪川.蜂蜜质量安全追溯系统研究［D］.北京:中国农业科学院，2009:14.

［42］简秋，姬新.欧盟农药残留立法管理简介及对我国农产品质量安全管理的启示［J］.农产品加工:创新版，2010(8):49－56.

［43］李周敏，邵诚，方慧群.蜂蜜中残留抗生素的检测方法研究［J］.安徽医药，2012，16(5):568－570.

［44］Maria L G P，Patricia P B，Roberto R G，et al.Comprehensive qualitative and quantitative determination ofpesticidesand veterinary drugs in honey using liquid chromatography－Orbitrap high resolution mass spectrometry［J］.Journal of Chromatography A，2012，2148:130－138.