人前列腺癌组织中PCA-1及Ki-67蛋白的表达*

姚 杰,刘秉乾,魏金星

郑州大学第一附属医院泌尿外科 郑州 450052

前列腺癌是欧美国家老年男性最常见的恶性肿瘤，近年来在我国此病的发病率快速上升。目前对前列腺癌的治疗主要采取以根治性手术为主，辅以内分泌治疗和放疗的综合治疗方案，但患者的生存率未见显著改善，寻找与前列腺癌进展相关的蛋白并进行靶向治疗是目前前列腺癌研究的热点。前列腺癌抗原-1(prostate cancer antigen-1,PCA-1)是近年来发现的前列腺癌特异基因，与前列腺癌的发生和进展密切相关[1-2]，但是作用机制尚不明确。Ki-67是一种增殖细胞相关的核抗原，其功能与有丝分裂密切相关，在细胞增殖中不可或缺。该研究采用免疫组织化学SP法检测前列腺癌组织中PCA-1和Ki-67蛋白的表达，探讨PCA-1在前列腺癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖之间的关系。

1 对象与方法

1.1研究对象收集2011年1月至2012年5月在郑州大学第一附属医院泌尿外科切除的前列腺癌组织标本153例。患者年龄55～82岁，中位年龄69岁。Gleason组织分化程度：高、中分化93例，低分化60例；TNM分期：T1、T2期63例，T3、T4期90例。患者术前均未接受化疗和激素治疗。收集同期住院患者的前列腺增生组织标本135例，患者年龄59～80岁，中位年龄66岁。所有组织标本均经组织病理学确诊。

1.2PCA-1和Ki-67蛋白的检测采用免疫组化SP法。PCA-1和Ki-67一抗及二抗(SP-9002通用试剂盒)和DAB显色试剂盒均购于北京中杉金桥生物技术有限公司。标本4 μm厚切片，一抗按照1100稀释，DAB显色，苏木素复染，常规脱水、透明、封片。用PBS代替一抗作阴性对照。PCA-1及Ki-67均以细胞核或细胞质呈现棕黄色颗粒或者黄色颗粒为染色阳性细胞。于阳性细胞最密集处连续观察5个高倍镜视野，每个视野计数100个细胞，计算阳性细胞百分比，按阳性细胞百分比评分：0为0分，～20%为1分，～50%为2分，>50%为3分。按染色强度计分：淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。以上2者的乘积>3分为阳性。

1.3统计学处理采用SPSS 17.0分析，前列腺癌和前列腺增生组织中、不同临床病理特征患者的前列腺癌组织中2种蛋白阳性表达率的比较采用χ2检验，以列联系数评估前列腺癌组织中2种蛋白表达的关系。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 2种组织中PCA-1与Ki-67蛋白的表达见图1、表1。

图1 2种组织中PCA-1(1)和Ki-67(2)蛋白的表达 (SP，×400)A：前列腺增生；B：前列腺癌。

例(%)

2.2前列腺癌组织中PCA-1和Ki-67蛋白的表达和临床病理特征的关系见表2。

表2前列腺癌组织中PCA-1
和Ki-67蛋白的表达与临床病理特征的关系

例(%)

2.3前列腺癌组织中PCA-1与Ki-67蛋白表达的关联性分析见表3。

表3前列腺癌组织中PCA-1与Ki-67蛋白表达的关联性

PCA-1Ki-67阳性阴性合计阳性11028138阴性41115合计11439153

rP=0.340，P<0.001 。

3 讨论

目前一致认为与前列腺癌进展相关的肿瘤标记物有PSA、P504s等，但是随着研究的进展及临床的验证，这些标记物在前列腺增生及前列腺炎等良性疾病中也可以有异常表达，因此寻找一个更具有特异性的前列腺癌肿瘤标记物就显得至关重要。PCA-1是2005年Nobom等利用荧光差异显示分析技术克隆出的一种新的人类基因，仅在前列腺癌细胞株及组织标本中表达[1-2]。

Ki-67蛋白是反映细胞增殖活性的核标记物，与细胞有丝分裂的周期密切相关，Ki-67抗原自进入G1期开始表达，在G2期和M期的表达达到高峰，之后Ki-67抗原迅速降解，G0期不表达[3-5]。Ki-67现已成为检测肿瘤细胞增殖动力学的关键指标。临床研究[6]表明，Ki-67的表达与肿瘤的良恶性、恶性肿瘤的发展甚至于肿瘤的转移和预后等都高度相关。

该研究结果显示，前列腺癌组织中PCA-1蛋白的阳性表达率为90.2%，远高于前列腺增生组织。该研究结果亦表明PCA-l表达与前列腺癌的肿瘤组织分化程度和临床分期相关，提示PCA-1的表达与前列腺癌的发生发展密切相关，可以作为预测因子辅助判断患者的预后。前列腺癌组织中Ki-67的表达与PCA-1的表达呈正关联，提示PCA-1的表达与前列腺癌的细胞增殖关系密切，PCA-1可能是通过增加前列腺癌细胞增殖活性促进前列腺癌的进展。

[1] 刘秉乾，武玉东，魏金星，等.前列腺癌组织中前列腺癌抗原-1的表达及临床意义[J].中华男科学杂志，2007,13(11)：997

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[3] 樊素珍，苑中甫.宫颈癌组织中Annexin A2和Ki-67蛋白的表达[J].郑州大学学报：医学版，2010,45(1)：81

[4] 南燕，李红雨，许雅娟.宫颈癌组织中TSPAN-1与Ki-67蛋白的表达[J].郑州大学学报：医学版，2010,45(3)：469

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[6] 于勇，李道源，陆浩源，等.hK2、Ki-67在前列腺癌组织中的表达及其临床意义[J].中国癌症防治杂志，2012,4(2)：190