利巴韦林注射液中间产品含量快速测定方法

肖七琪 周其超 张 悦

（西南药业股份有限公司，中国 重庆 400038）

利巴韦林注射液（1ml：100mg）是由利巴韦林和药用炭配制成的水溶性溶液。利巴韦林是一种广谱抗病毒药，具有抑制呼吸道合胞病毒、流感病毒、甲肝病毒、腺病毒等多种病毒生长的作用。在当前流感盛行的时期，利巴韦林注射液发挥了很大的作用。为了保证药品质量，生产车间需对该药品实施中间产品监控，对产品含量、pH值和颜色进行测定，2010版《中国药典》规定利巴韦林注射液的检测方法为高效液相检测法。由于高效液相色谱仪价格高昂，如果没购买该设备，就无法对中间产品实行质量控制，所以仍选用原有的氮测定法，而氮测定法方法操作较复杂，测定一份样需要1.5小时，由于利巴韦林注射液市场需求量大，而现在每晚2个批次投产，平行检测两次，需要6小时左右，无法满足生产需要，因此本研究拟探索一种通过紫外分光光度法，快速测定利巴韦林中间产品含量的新方法。

1 仪器与试药

UV—2401PC型紫外分光光度计（日本岛津），电子天平（sartotius）利巴韦林（广东肇庆星湖制药有限公司、10kg/桶、含量99.8%、原料批号 L080102），注射用水（自制）。

2 试验方法

2.1 溶液的制备

2.1.1 对照品的制备

精密称取利巴韦林对照品100mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。再精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.1.2 供试品的制备

精密量取利巴韦林注射液 （1ml：100mg）1ml置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取1ml置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。

2.1.3 标准曲线的制备

精密称取经105℃干燥至恒重的利巴韦林对照品100 mg，置100 mL量瓶中，加注射用水溶解并稀释至刻度，精密取稀释液0.2ml，0.4ml，0.8ml，1.0ml，1.6ml，2.0ml，置 100 ml容量瓶，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为 2.0μg/ml，4.0μg/ml，8.0μg/ml，10μg/ml，16μg/ml，20 μg/ml的利巴韦林对照品溶液（标准储备液）。以注射用水为空白，在206nm波长处测定吸收度。以浓度(C)对吸收度(A)计算，得回归方程为 C=0.0327A+0.148(r2=0.9995，n=6)。 表明利巴韦林浓度在 2～20μg/mL范围内与吸收度呈良好的线性关系。

图1 利巴韦林线形图

2.1.4 精密度测定

精密吸取1.0ml标准储备液，分别按UV法测定，在206nm处测定溶液吸收度，经6次取样测定所得结果之间的接近程度，计算出含量，如下表：

表1 精密度试验结果

计算出RSD=0.59%，符合标准。

2.1.5 稳定性实验

取浓度为20μg/ml利巴韦林对照品溶液，在25℃，分别于0h，1h，3h，5h，10h，24h内，206nm处测定吸收度，结果表明吸收度无明显变化，本品在24h内稳定。

2.1.6 样品测定

分别取对照品溶液及供试品溶液，以注射用水做空白，在206nm处测定吸收度，计算即得含量。

C供——供试品含量，A供——供试品吸收度，A对——对照品吸收度

3 讨论

3.1 利巴韦林注射液（1ml：100mg），在处方上无辅料干扰。

3.2 确定利巴韦林溶液的吸收波长

3.2.1 结构分析

利巴韦林是含有—OH、—NH2基团的化合物，为N—à跃进，从结构确定有弱的紫外吸收。

3.2.2 确定波长

配制利巴韦林溶液的浓度为每1ml中约含被测物质10ug，用UV—2401PC型紫外分光光度计在200～400nm波长处自动扫描，从图4得知，利巴韦林在206nm波长处有最大吸收峰。

图2 波长—吸收峰图

3.3 确定吸收系数

根据郎伯比尔定律A=ECLC——被测物质的质量L——液层厚度，cm精密称取利巴韦林原料1g，用注射用水稀释至100ml，用1cm的石英池在206nm处测得为475。

4 结果

中间产品检验氮测定法与紫外分光光度法测定结果比较：对利巴韦林注射液进行分析可用紫外分光光度法测定，现用氮测定法和紫外分光光度法，在允许误差±2%范围内测定利巴韦林注射液中间产品含量，结果如表2所示：

表2 氮测定法与紫外分光光度法对比表

表3 紫外分光光度法与高效液相法含量测定法比较表

对生产的256个批次的利巴韦林注射液进行追踪监控，车间的中间产品测定结果（紫外分光光度法之对照品法）与质检中心的成品测定结果（高效液相法）对比，结果稳定，误差均在规定范围内，全部符合公司内控标准。现摘取12个批次，车间化验室中间产品测定结果（紫外分光光度法之对照品法）与质检中心的成品测定结果（高效液相法）对比，结果见表3：

从表2、表3结果看，本法是切实可行的，可以快速准确的测定含量。

［1］国家药典委员会.2010版《中国药典》二部附录IV[M].中国医药科技出版社.

［2］国家药典委员会.2010版《中国药典》二部附录VII[M].中国医药科技出版社.

［3］《探索利巴韦林注射液半成品含量快速测定的方法》QC成果报告[R].西南药业股份有限公司.